Ch 10 Flashcards
Qu’est ce que le clonage
technique permettant l’obtention de plusieurs segments d’ADN identiques
quelles sont les applications du clonâge
- production d’une grande quantité de protéine
- modification d’organismes
- recherche fondamentale (étude de la régulation de l’expression génique) VOIR DIAPO PR VOIR LES APPLICATIONS SUR LE SCHÉMA
que contient un vecteur?
- gène de résistance (permet de sélectionner les bactéries qui ont bien reçu le plasmide)
- plusieurs sites de restriction (site d’insertion de l’ADN étranger
- gène de sélection (permet la sélection des plasmides recombinés)
VECTEURS??? c quoi les bails i dont get it
transformation???
Quelles sont les applications de crispr cas9
- recherche fondamentale (désactivation de gènes spécifiques, facilite la modification d’organismes)
- agriculture (modification du génome pour augmeter productivité et résistance)
- médecine
détaille les applications en médecine du crispr
- cancer ( modifie les cellules du syst immu d’un latient pr qu’elles visent uniquement les cellules cancéreuses)
- xénotransplantation (transplantation d’un organe d’un animal à un autre)
- vieillissement
- élimination de l’ADN viral intégré dans notre ADN (traitement contre VIH, VPH…)
qu’est ce que le crispr? le cas 9?
- crispr: région dans l’ADN
- cas9: enzyme qui dégrade l’ADN du bactériophage
pourquoi le crispr cas 9 n’est pas l’outil parfait?
- peut couper des gènes qui ont l’air similaire et causer une mutuation innattendue
- c’est pas éthique
quels sont les rôles des anticorps lors de la réponse immunitaire humorale
- neutralisation (bloque adhésine ce qui empêche les m/o de s’accrocher)
- opsonisation (permet la phagocytose)
- activation du système du complément (opsonisation, rx inflammatoire, trous dans membrane plasmique des m/o)
comment sélectionner les cellules compétentes pr la transformation
- si on veut sélectionner les bactéries recombinés: check si gène de résistance présent dans le vecteur (si il le possède chill)
- si on veut sélectionner bactéries avc plasmide recombiné : check la couleur des colonies (blanc= plasmide recombinée, bleu=plasmide d’origine sans celui d’origine, bc of the gène de sélection)
décrit le processus de protection d’une bactérie lors d’une deuxième infection par un bactériophage (virus)
la bactérie conserve une région de l’ADN du bactériophage dans la région CRISPR to remember it. Puis:
- transcription de l’ARN de la bactérie infectée
- formation de complexe ARN + protéine cas
- reconnaissance du prophage grâce à l’ARN
- hydrolyse de cette région par la protéine Cas
- dégradation de l’ADN du bactériophage
carac des anticorps primaire et secondaire dans réponse immunitaire humorale
- La réponse immunitaire primaire crée les anticorps contre antigène A. Ça crée aussi des cellules mémoire qui vont engendrer la réponse immunitaire secondaire contre l’antigène A plus intense.
- attention, ça n’influe pas sur les autres antigènes présents
quel est le premier vaccin?
- vaccine contre virus de la vache 1798 par Edward jenner
déf variolisation
- injection du pu provenant d’un malade de la variole
- développement de symptômes léger
- immunisation (augmente % de survie)
décrit la variole
- agent: virus ADN double brin enveloppé
- réservoir: humain
- porte de sortie: voies respiratoires
- mode de transmission: aérienne
- porte d’entrée: voies respiratoires
- pathogénèse: se multiplie ds noeud lympathique et va jusqu’à la peau
- symptômes : céphalées, malaises, pustules, mortalité entre 1% et 20%
qu’est ce qui compose les vaccins
- antigènes
- parfois adjuvant
- autres choses
décrit antigènes dans vaccins
- région d’un m/o qui sera reconnu par syst immu
- entraine rep immu et production anticorps
- toujours là
- nv d’antigènes vsrient : monovalent, polyvalent, combiné (plusieurs de m/o diff)
décrit adjuvant dans vaccins
- déclenche rx inflammatoire
- augmente efficacité de la rep immu
quelles sont les autres choses ds vaccins
- traces du milieu de culture
- agents de conservation
- liquide de suspension
- agents de stabilisation
quels sont les types de vaccins (tf is vaccins inactivés)
- atténués (vivants)
- inactivés (morts) : entiers, protéines purifiées, polysaccharidiques, conjuguées *** what
- vaccins à ADN
- vaccins à ARN
décrit vaccins atténués
- m/o avc plusieurs mutstions donc perte de virulence
- m/o se réplique
- développent et entraîne des signes et symptômes plus légers que le vrai m/o
avantage vaccins atténués
très efficace, très bonne rep immu
désavantage vaccins atténués *** réversibilité
- hybridation possible avc d’autres m/o
- réversibilité???
comment on inactive des m/o? quelles sont les composantes d’un vaccin inactivé?
- inactivé complètement (grâce à un traitement physique à la chaleur ou chimique avc du formole)
- inactivé à protéine ou polysaccharides ou conjugués (fragments d’un m/o)
avantage inactivé
100% sécuritaire (pas de réplication de m/o)
désavantage inactivés
- si l’inactivation du m/o n’a pas marché = infection
- trop cher
- requiert adjuvant
décrit vaccin ADN
- plasmide avc gène d’un m/o
- permet la synthèse de protéine de surface (ex: spicule) dans nos cellules
vaccins adn avantages *** comment pistolet est un avantage??
- utilisation d’un pistolet à gène
- plus stable que ARNm (temp pièce)
vaccins adn désavantage ***???
recombinaison
décrit vaccins arn
- gouttelette avc fragment d’ARNm
- production d’une protéine à l’aide de l’ARNm
avantage vaccins arn
- aucune insertion possible ds le génome
- modification rapide
désavantage vaccins arn
- conservation entre -20 et -70
exemple de protocole d’immunisation du QC ** tf
- calendrier de vaccination
- liste des vaccins dispo
déf anticorps monoclonaux
- sln composés d’un type d’anticorps
- détection d’un seul antigène
utilité des anticorps monoclonaux
- détection ce pathogène
- test de grossesse
- test covid 19
- médicaments
déf immunofluorescence directe
- identification de m/o ds échantillon d’un patient
- anticorps fluo reconnaissent un antigène sur le m/o à identifier
déf immunofluorescence indirecte **c les amticorps qui brille??
identification des anticorps d’un patient pr en m/o en particulier:
- on voit de la brillance quand l’anticorps secondaire brillant trouve des anticorps qu’on cherche (le primaire)
a quoi sert immunofluorescence
technique pr identifier les m/o ou anticorps
quelles sont les 2 types de méthodes elisa
- directe
- indirecte
méthode directe elisa
- rechercher les antigènes
- recherche de drogue (antigènes) dans l’urine
méthode indirecte elisa
- recherche d’anticorps
- recherche d’anticorps spécifique pour une maladie dans le sang d’un patient
si plasmide recombiné, est ce que le gène de sélection s’exprime?
non
si le plasmide est bien reçu par la bactérie, est ce que le gène de résistance s’exprime ou non?
oui
à quoi ressemble méthode indirecte elisa (schéma)
- antigène est sur la paroi d’un puit
- si l’anticorps est présent dans l’échantillon du patient, il va se coller à l’antigène
- l’anti-hémoglobine humaine liée à des enzymes va se collé avc l’anticorps (two Y)
- le substrat de l’enzyme est ajouté = coloration
à quoi ressemble la méthode directe elisa (schéma)
- anticorps est sur la paroi d’un puit
- si l’antigène est présent dans l’échantillon du patient, il va se coller à l’anticorps
- anticorps lié à une enzyme se colle à l’antigène (sandwich)
- substrat de l’enzyme est ajouté = coloration
