Celulas Tronco Flashcards
Quais as 3 características que definem as Células Tronco (CT)?
1 Autorrenovação (mesmo após longos períodos de senescência)
- Clonalidade (CT originam outras CT)
- Diferenciação em vários tipos celulares (in vivo e in vitro)
Quais as categorias das CT com base em sua capacidade de diferenciação? (2)
- Pluripotentes (Embrionárias - CTE) podem se diferencial em qualquer tipo de celular
- Multipotentes (Adultas) podem se diferencial em múltiplas, mas não todas, linhagens celulares
- Pluripotentes Induzidas (CTPi) derivam de celulas adultas geneticamente reprogramadas com potencial embrionário
Quais as 3 características das Células Tronco Embionárias (CTEs)?
- Derivado de um embrião pré ou peri-implantação
- Capacidade de autorrenovação e proliferação em estado indiferenciado propolngado
- Capacidade de formar derivados das 3 camadas germinativas após cultura por tempo prolongado (pluripotência)
Quais as limitações atuais para o uso clinico das Células Tronco Embrionárias Humanas (hCTE)? (3)
- Risco de Tumorigenicidade
- Imunocompatibilidade
- Isolamento dos tipos celulares para fins terapêuticos
V ou F?
Pré-diferenciação das hCTEs antes do uso clínico pode diminuir o risco de desenvolvimento de Teratomas.
V.
Quais as fontes de obtenção de hCTEs?
- Adipócitos (CTAs)
2. Medula Óssea (CTMs)
Qual a composição celular do tecido adiposo? (4)
- Adipócitos
- Células endoteliais microvasculares
- Células musculares lisas
- CTAs
Quais as possíveis diferenciações das CTAs? (4)
Diferenciação:
- Osteogênica
- Condrogênica
- Miogênica
- Adipogênica
Como é feita a coleta de hCTAs?
- Lipoaspiração (Vantagem: não ha necessidade de picar o tecido)
- Lipectomia
V ou F?
CTAs mantém capacidade de diferenciação osteogênica mesmo após lipoaspiracao com ultrassom
Verdadeiro
V ou F.
Quando coletado de múltiplos sítios, devem ser guardados separadamente por possuirem capacidades de diferenciação distintas
Verdadeiro.
V ou F?
Após a lipoaspiração, o tecido deve ser processado o mais rapidamente possível, sob condições ambientais de cultura celular estéril
Verdadeiro
Como é o processo de coleta e processamento das CTAs? (10 etapas)
1º Lavagem do tecido adiposo em Betadine diluído
2º Lavagem 2x em Tampão Fosfato (PBS) na proporção 1:1
3º Digestão 1:1 com solução salina de Hank balanceada contendo 0,075% (p/v) de colagenase tipo II, a 37ºC, em banho-maria com agitação (140 rpm), durante 60 min
4º Agitação e Aeração 15/15 min
5º Inativação com PBP contendo Soro Fetal Bovino (SFB) e 1% de penicilina/estreptomicina na proporção de 1:1
6º Centrifugação a 1000 rpm, por 6 min. Sobrenadante é descartado. Precipitado é a fração vascular estromal
7º Suspensão e Filtração em filtro de 100µm para remoção dos fragmentos teciduais não digeridos
8º Precipitação e Ressuspenção das células em placa de cultura em meio de crescimento
9º Incubação a 37ºC em atmosfera contendo 5% de CO2
10º Contagem de células (10ml de tecido adiposo = 1 milhão de hCTAs)
A que se deve a Heterogenicidade das CTAs?
CTAs apresentam subpopulaações com vários marcadores de superfície celular:
Positivas para CD105, STRO-1, CD29, CD144 e CD166
Negativas para CD3, CD4, CD11c, CD14, CD15, CD16, CD19, CD31, CD33, CD38, CD56, CD62p, CD104 e CD144
Quais as possíveis diferenciações das CTMs? (4)
- Adipócitos
- Osteócito
- Miócitos
- Cardiomiócitos