Celulas Tronco Flashcards

1
Q

Quais as 3 características que definem as Células Tronco (CT)?

A

1 Autorrenovação (mesmo após longos períodos de senescência)

  1. Clonalidade (CT originam outras CT)
  2. Diferenciação em vários tipos celulares (in vivo e in vitro)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Quais as categorias das CT com base em sua capacidade de diferenciação? (2)

A
  1. Pluripotentes (Embrionárias - CTE) podem se diferencial em qualquer tipo de celular
  2. Multipotentes (Adultas) podem se diferencial em múltiplas, mas não todas, linhagens celulares
  3. Pluripotentes Induzidas (CTPi) derivam de celulas adultas geneticamente reprogramadas com potencial embrionário
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Quais as 3 características das Células Tronco Embionárias (CTEs)?

A
  1. Derivado de um embrião pré ou peri-implantação
  2. Capacidade de autorrenovação e proliferação em estado indiferenciado propolngado
  3. Capacidade de formar derivados das 3 camadas germinativas após cultura por tempo prolongado (pluripotência)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Quais as limitações atuais para o uso clinico das Células Tronco Embrionárias Humanas (hCTE)? (3)

A
  1. Risco de Tumorigenicidade
  2. Imunocompatibilidade
  3. Isolamento dos tipos celulares para fins terapêuticos
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

V ou F?

Pré-diferenciação das hCTEs antes do uso clínico pode diminuir o risco de desenvolvimento de Teratomas.

A

V.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Quais as fontes de obtenção de hCTEs?

A
  1. Adipócitos (CTAs)

2. Medula Óssea (CTMs)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Qual a composição celular do tecido adiposo? (4)

A
  1. Adipócitos
  2. Células endoteliais microvasculares
  3. Células musculares lisas
  4. CTAs
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Quais as possíveis diferenciações das CTAs? (4)

A

Diferenciação:

  1. Osteogênica
  2. Condrogênica
  3. Miogênica
  4. Adipogênica
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Como é feita a coleta de hCTAs?

A
  1. Lipoaspiração (Vantagem: não ha necessidade de picar o tecido)
  2. Lipectomia
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

V ou F?

CTAs mantém capacidade de diferenciação osteogênica mesmo após lipoaspiracao com ultrassom

A

Verdadeiro

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

V ou F.
Quando coletado de múltiplos sítios, devem ser guardados separadamente por possuirem capacidades de diferenciação distintas

A

Verdadeiro.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

V ou F?
Após a lipoaspiração, o tecido deve ser processado o mais rapidamente possível, sob condições ambientais de cultura celular estéril

A

Verdadeiro

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Como é o processo de coleta e processamento das CTAs? (10 etapas)

A

1º Lavagem do tecido adiposo em Betadine diluído
2º Lavagem 2x em Tampão Fosfato (PBS) na proporção 1:1
3º Digestão 1:1 com solução salina de Hank balanceada contendo 0,075% (p/v) de colagenase tipo II, a 37ºC, em banho-maria com agitação (140 rpm), durante 60 min
4º Agitação e Aeração 15/15 min
5º Inativação com PBP contendo Soro Fetal Bovino (SFB) e 1% de penicilina/estreptomicina na proporção de 1:1
6º Centrifugação a 1000 rpm, por 6 min. Sobrenadante é descartado. Precipitado é a fração vascular estromal
7º Suspensão e Filtração em filtro de 100µm para remoção dos fragmentos teciduais não digeridos
8º Precipitação e Ressuspenção das células em placa de cultura em meio de crescimento
9º Incubação a 37ºC em atmosfera contendo 5% de CO2
10º Contagem de células (10ml de tecido adiposo = 1 milhão de hCTAs)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

A que se deve a Heterogenicidade das CTAs?

A

CTAs apresentam subpopulaações com vários marcadores de superfície celular:
Positivas para CD105, STRO-1, CD29, CD144 e CD166
Negativas para CD3, CD4, CD11c, CD14, CD15, CD16, CD19, CD31, CD33, CD38, CD56, CD62p, CD104 e CD144

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Quais as possíveis diferenciações das CTMs? (4)

A
  1. Adipócitos
  2. Osteócito
  3. Miócitos
  4. Cardiomiócitos
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Quais às características das Células Tronco Tecido Específicas ou Adultas (4)? E onde são encontradas?

A
  1. Autorrenovação
  2. Indiferenciadas
  3. Capacidade de diferenciação nos tipos celulares especializados do tecido em que se encontram
  4. Transdiferenciacao ou capacidade das CT Linhagem Direcionadas se diferenciarem em tecidos de outra linhagem

Encontradas em quase todos os tecidos após o desenvolvimento embrionário.

17
Q

Quais as subpopulacoes das Células Tronco Tecido Específicas ou Adultas (2) baseadas na sua atividade? Qual a provável função de cada uma delas?

A

Duas subpopulacoes progenitoras coexistentes:

  1. Quiescentes: mantem a longevidade das CT Adultas
  2. Ativas: reparo tecidual
18
Q

Quais as vantagens do uso de Arcabouços de biomateriais para distribuição das células tronco? (4)

A
  1. Ambiente controlado
  2. Proteção das células implantadas
  3. Distribuição do material genético e/ou sinais bioquímicos indutores
  4. Suporte estrutural para construção dos novos tecidos
    A. Rígidos (engenharia ossea)
    B. Flexíveis (uso cutâneo)

Ex. Matriz dérmica

19
Q

Quais as vantagens das Células Tronco Pluripotentes Induzidas (iTPs)? (3)

A
  1. Não envolvido em questões éticas de tecidos fetais
  2. Autoenxerto (sem imunorreação)
  3. Varias opções sítio doador
20
Q

Sobre iTPs, quais são os 4 fatores de Yamanaka para reprogramação?

A
  1. Oct4
  2. Sox2
  3. Klf4
  4. c-Myc
21
Q

Quais as possíveis origens das células ITPs?

A
  1. Fibroblastos
  2. Queratinócitos
  3. Melanócitos
  4. Cordão umbilical
  5. Adipócitos (hCTAs)
22
Q

Quais os agentes da integração genômica dos transgenes nas células hospedeiras? (2)

A
  1. Lentivírus

2. Retrovírus

23
Q

Quais as vantagens do uso das HCTAs para produção de iTPs? (4)

A
  1. Procedimento de obtenção (lipoaspiração) simples, rápido e seguro.
  2. Fácil obter grande quantidade de hCTAs
  3. Rápida reprogramação podendo ser realizada imediatamente.
  4. Derivação livre de alimentador (fibroblastos murinhos que poderiam contaminar as células humanas e desencadear resposta imunológica)
24
Q

Quais as limitações do uso das iTPs? (3)

A
  1. Camada alimentadora de fibroblastos murinos
    Solução: Camada livre de alimentador ou Matrigel sem componetes animais
  2. Vírus utilizado na reprogramação pode se incorporar ao genoma humano
    Solução: Plasmídio minicírculo
  3. Risco de teratoma
    Solução: pré-diferenciação antes de colocá-la in vivo.