Block 1 - Kapitel 2

Question 1

Neues Verfahren entwickeln

Answer 1

1. Gesamtspektrum erstellen
2. Entsprechende Wellenlängen wählen (am Maximum)

Question 1

UV-Vis-Spektroskopie

Answer 1

Anregung mit Polychromatischem Licht

Aufspaltung des Lichts (Prisma)

Monochromatisches Licht auf Küvette mit Probe

-> Reingesteckte Intensität
-> Austretende Intensität, wovon Teil absorbiert wird

Question 2

Warum eher bei 650 nm messen als bei 400 nm?

Answer 2

-> Es wird weniger Energie benötigt

Warum ist höherer Energieaufwand schlecht?
-> Proben sind evtl. keine reine Lösung. Es ist wahrscheinlicher, dass die Verunreinigungen darin auch angeregt werden können

Question 3

Quantitative Messung mittels UV/Vis-Spektroskopie

Answer 3

1. Verdünnungsreihe herstellen (Kalibrieren) mittels Analysestandard
2. Ausmessung der Verdünnungsstufen und “Blank” bei der Wellenlänge eines geeigneten Absorptionsmaximums
3. Generierung einer Kalibrierkurve
4. Messung der Analysenproben

Question 4

! Derivatisierung !

Answer 4

Derivatisierung: Vorgang zur Bildung eines Derivates -> chem. Veränderung einer Substanz, um ihre chem.-phys. Eigenschaften zu ändern

• chem. Reaktion einer Substanz zu einem Derivat (Abkömmling)
• Voraussetzung: Stöchiometrisch eindeutig verlaufende Reaktion (KEINE NEBENPRODUKTE!)
• Die chem. / phys. Eigenschaften des Derivats ermöglichen empfindlicheren oder selektiven Nachweis
• Häufig: Probe wird in Farbstoff umgewandelt

-> colorimetrische Bestimmung: Nachweis durch Absorption im Vis-Bereich möglich

Question 5

Anwendungsbeispiele UV/Vis-Spektroskopie

Answer 5

Colorimetrischer Nachweis (Vis-Bereich) von org. Substanzen z.B. Sulfanilamid nach Derivatisierung

Colorimetrischer Nachweis (Vis-Bereich) von Kationen z.B. Schwermetalle nach Derivatisierung

Enzymatische Umsetzung von Pyruvat zu Lactat durch Lactatdehydrogenase

Question 6

Absorptionsspektrum von NAD+ und NADH

Answer 6

NADH: starkes Absorptionsmaximum bei 340 nm

Bei Umsetzung von Pyruvat zu Laktat nimmt (durch gleichzeitige Reaktion von NADH zu NAD+) die Absorption bei 340 nm ab

Question 7

UV-Vis Spektroskopie

Answer 7

Absorption von Strahlung aus dem UV-Bereich 200-380 nm
Absorption von Strahlung aus dem Bereich des sichtbaren Lichtes 370-700 nm

Pi-Bindungen sind besser sichtbar als Sigma-Bindungen