Biotechnologies Flashcards
Qu’est-ce qu’une mutation?
C’est une modification aléatoire de l’information génétique
Qu’est-ce qu’une mutation chromosomique?
C’est une modification de la structure d’u chromosome. Elle peut être due à la disparition (deletion), au dédoublement (duplication), à la coupure et à l’échange (inversion) d’une partie d’un chromosome
Qu’est-ce qu’un mutation génomique?
C’est un changement du nombre de chromosomes, voire la multiplication du jeu complet de chromosomes (ex. trisomie 21), troisième copie du chromosome 21)
Qu’est-ce que l’ADN?
Acide Desoxyribonucléique, support chimique de l’information génétique
Quelle est la structure de l’ADN?
La macromolécule est composé d’un long squelette de désoxyribose et de phosphate alternés. Des bases organiques azotées sont attachés aux glucides. Tout ceci forme un nucléotide. Il est composé d’un double brin
Quelles sont les base azotées?
Bases pyrimidiques: cytosine (C) et thymine (T)
Bases purines: adénosine (A) et guanine (G)
Expliquer l’orientation des brins.
Il y a une orientation du polynucléotide considéré. L’extrémité 3’ se réfère au troisième atome de carbone (C3) appartenant au glucide libre d’un bout. L’extrémité 5’ représente le C5 du glucide attaché à un phosphate à l’autre bout du brin de polynucléotide.
Qu’est-ce que l’ARN?
C’est le second type d’acide nucléique: l’acide ribonucléique. Il est monobrin et son glucide est le ribose. De plus, la thymine de l’ADN est remplacée par un uracile (U).
Qu’est-ce que l’hélicase?
C’est une enzyme qui se fixe à l’origine de réplication et commence à séparer les deux brins d’ADN ouvrant un oeil de réplication. A chaque extrémité de cet oeil se trouve la fourche de réplication, qui permet l’avancement de la réplication.
Que fait l’ADN primase?
Elle catalyse la synthèse d’un court morceau d’ARN en face de chaque brin de la fourche de réplication (amorce)
Qu’est-ce qu’une amorce?
C’est un petit morceau d’ARN servant de point de départ à l’ADN polymérase pour la synthèse d’un nouveau brin complémentaire
Quelle est la direction de synthèse?
L’ajout des nucléotides se fait de 5’ à 3’ et à partir d’une amorce
Pourquoi d’un cote a-t-on un brin directeur et de l’autre un brin discontinu?
L’ADN polymérase n’est capable d’apparier les nucléotides que dans la direction 5’ –> 3’ et donc elle ne peut que rallonger les extrémités 3’. Comme les deux brins sont antiparallèles, la synthèse du nouveau brin ne peut que se faire de façon continue que dans le brin 3’–> 5’ et à partir d’une amorce. C’est le brin directeur. La réplication simultanée pose problème. Elle doit travailler dans le sens contraire au déplacement de la fourche de réplication. Ici l’ADN primate synthétise des amorces d’ARN à plusieurs endroits.
Que sont des fragments d’Okazaki?
C’est des amorces qui sont prolongées par de courtes sequences d’ADN par l’ADN polymérase dans la direction 5’–>3’
Que fait la ligase?
Elle relie les fragments d’Okazaki.
Quelles sont les trois étapes de la PCR
- La dénaturation
- L’hybridation
- L’élongation
Qu’est-ce que la PCR?
C’est la Polymérase Chain Reaction. Un processus de copie de segments d’ADN spécifiques par une méthode d’amplification en chaîne. Fondée sur le principe de la réplication de l’ADN, elle permet l’amplification à volonté de fragments d’ADN in vitro.
Quel est le matériel nécessaire pour la PCR?
Il faut le fragment d’ADN à copier, une ADN polymérase thermostable, un mélange de quatre nucléotides (A, T, C, G) et des amorces (séquences d’ADN monocaténaires)
Décrire la dénaturation
Séparation des deux brins de l’ADN bicaténaire (95°C)
Décrire l’hybridation
Refroidissement à 40-60°C, les amorces se lient aux séquences complémentaires de l’ADN initial ou aux brins sythétisés par la PCR.
Décrire l’élongation
(72°C) La température optimale pour la synthèse de l’ADN par la Taqpolymérase, qu sythétise des brins complémentaires aux brins d’ADN monocaténaires à partir des amorces.
Dans quels cas peut servir la PCR?
Recherche de gènes défectueux, recherche de prédispositions génétiques à des cancers, analyses en criminologie ou recherche de gènes ancestraux sur des fossiles.
Qu’est-ce que l’électrophorèse sur gel ?
C’est un processus qui vérifie les produits de la PCR. Elle permet de séparer les fragments d’ADN en fonction de leur longueur. Elle est fondée sur la différence de vitesse de migration des molécules d’ADN chargées dans un champ électrique
Décrire le processus
La migration est effectuée dans une cuve, entre deux électrodes à courant continu. Les fragments d’ADN migrent en direction de l’anode positive (vu que les nucléotides sont négatives grace au PO4-). Le gel d’agarose est poreux ce qui a pour conséquence que les acides nucléiques se séparent en fonction de leur taille: les plus petits fragments migrent plus vite à travers les pores que les grands.