Bioquímica clínica Flashcards
(76 cards)
1
Q
qual a utilidade da bioquimica clínica
A
- rastreio
- confirmar diagnósticos
- monitorização de doenças
- seleção de tratamentos
- monitorar tratamentos
- estudo das doenças
2
Q
quais são os passos de um processo de análises bioquímicas?
A
- questionário clinico
- requesição de formularios com a info clinica
- retirar a amostra do paciente
- transição para o lab
- pacient ID
3
Q
quais os tipos de testes que podem ser pedidos ao paciente?
A
- Testes de emergencia (feitos na sala e saiem em no max 24h)
- Point-of-care testing
- regular screening
- organ panel (inclui marcadores de funcionamento dos orgãos)
- molecular testing
4
Q
Uma punção lombar normal tem que aparencia normal?
A
transparente, sem cor
5
Q
que biospecimens se podem analisar?
A
- culturas de sangue
- urina
- fluido cerebro-espinhal
- saliva
- pleura
- liquido sinovial
- fezes
6
Q
que cor é o tubo para se fazer testes ao sangue de rotina?
A
verde
7
Q
que cor é o tubo para se fazer testes ao sangue de coagulação
A
azul
8
Q
que cor é o tubo para se fazer testes ao sangue de heograma?
A
roxo
9
Q
que cor é o tubo para se fazer testes ao sangue de DNA/ HIV
A
amarelo
10
Q
que cor é o tubo para se fazer testes ao sangue de glucose, lactase, alcool
A
cinzento
11
Q
que cor é o tubo para se fazer testes ao sangue de imuno e serologicos
A
vermelho
12
Q
o que é que importa no manuseamento da amostra?
A
- temperatura
- agitação
- recolha
- proteção à luz
- labelling
13
Q
o que se deve ter em atenção na transferência das amostras para o lab?
A
- request forms
- tube position
- temperature
- proteção à luz
14
Q
quais são os critérios para haver rejeição da amostra?
A
- questionários em falta ou incompletos
- missing labels
- especiemns em mas condições
- especiemns em temperaturas más
- amostras em pouca quantidade
15
Q
em que se baseiam tecnicas de espectroscopia?
A
na interação de feixe de luz com a amostra, avaliando a sua atenuação, absorção, dispersão, reflexão e transmissão
16
Q
a espectroscopia baseia-se em que lei?
A
lei de beer-lambert: a concentração de uma substância é diretamente proporcional à luz absorvida num certo c.d.o.
17
Q
o que se pode estudar com espetroscopia?
A
- concentrações
- estrutura do composto
- estudar a cinética
- detetar grupos funcionais
- obter o comprimento de moleculas ou substâncias
18
Q
o que permite a tecnica de espectroscopia UV? (c.d.o.: 190 - 900nm)
A
confirmar a presença de analitos medindo a sua concentração para um dado cdo, além disso tb dá info sobre a cinética da reação
19
Q
Antes de uma análise de espectroscopia UV é relevante…
A
- escolher a covete certa com base no cdo
- escolher o cdo
- calibrar
20
Q
em que se baseia o método da colorimetria?
A
deteção de mudanças de cor, pode ser quantitativo se combinado com espectroscopia
21
Q
o que é que permite a colorimetria?
A
- confirmar a presença de analitos
- medir a sua concentração
- ver mudanças conformacionais
22
Q
o que permite a transformada de fourier de espectroscopia infravermelha?
A
permite conhecer a estrutura molecular com base na deteção de ligações atómicas
23
Q
o que é a espectroscopia de Massa?
A
mede a razão massa/carga de um analito. A amostra é bombeada com um feixe de Eletrões, ionizando-se (cargas positivas).
Após a ionização as particulas são sujeitas a um campo elétrico e magnético, havendo diferenças de acordo coma tal razão
os iões são detetados exibindo um espectro de intensidades
24
Q
o que é a espectroscopia de ressonância magnetica nuclear?
A
estuda a interação entre uma radiação EM com os núcleos das moleculas, quando sujeitas a um campo magnético
dá info sobre a estrutura dinâmica e interação de moleculas biológicas
25
como funciona a citometria de fluxo?
a amostra atravessa um feixe laser, sendo a radiação dispersa é detetada e caracteristica de cada componente
Nota: requer coloração
26
o que é a Classificação de células ativadas por fluorescência (FACS)?
é um tipo particular de citometria de fluxo que permite a separação das celulas com base nas suas caracteristicas físicas
Usa anticorpos especificos com corantes fluorescentes
27
no que consistem em geral tecnicas de cromatografia?
separação da mistura nos seus vários componentes
28
em que consiste a cromatografia de papel?
o fator de distinção é a diferença de tempo de migração pele folha
29
a cromatografia de papel é usada para separar o quê?
aminoacidos, peptidos, hidratos de carbono, purinas, compostos organicos e iões
30
quais são as 2 principais vantagens da cromatografia em papel?
é barato e requer pouca quantidade de material
31
o que é cromatografia de camada fina (TLC)?
é igual à em papel, mas com vidro/plastico com uma camada fina de um absorvente
permite chegar ao fator de retenção (Rf-valeu= distance component/distance solvente))
32
na TLC se o Rf value é muito pequeno significa que...
o componente viaja pouco, ou seja é polar (e vice versa)
33
em TLC as amostras têm de ser soluveis?
sim
34
a TLC dá info quantitativa e qualitativa?
não, só dá quantitativa
35
em que consiste a cromatografia de size-exclusion (SEC)?
separação de proteínas de outros compostos atendendo ao seu tamanho relativo (coluna estacionária porosa) - os mais pequenos migram mais
36
em que consiste a cromatografia Ion-Excharge (IEC)?
separa iões baseado na afinidade iónica
há uma fase estacionária ionizada que interage com iões de carga oposta
as moleculas são retidas com base na sua carga, que que não interagem com a coluna são as primeiras a sairem
37
em que tipo de amostra é que a HPLC é usada?
em líquidos
38
em que se baseia a HPLC?
a fase móvel é bombeada numa coluna com pequenos poros (fase estacionária)
as diferenças de solubilidade dos componentes fazem com que estes tenham diferentes velocidades
Os componentes são detetados por espetroscopia de absorção
O tempo de retenção é característico de cada componente
39
na HPLC o que é importante garantir?
que não entrem bolhas na coluna
40
o HPLC é um método quantitativo?
sim, através da área de baixo do pico
41
em que consiste a Eletroforese?
Na migração das cargas num meio líquido sob um campo elétrico, que faz mover as partículas
42
onde é que se usa eletroforese
para separar DNA, RNA e proteínas, com base no tamanho e na carga
(as moléculas pequenas migram mais rapidamente, porque têm maior facilidade em atravessar os poros)
43
os testes bioquímicos podem ser de que tipo?
Moleculares e Serológicos
44
qual é a diferença entre testes moleculares e testes serologicos?
Moleculares: amplificam o material genético viral e o seu sinal. Detetam sequencias de ácidos nucleicos associados a agentes patogénicos ou marcadores
Serológicos: detetam anticorpos que se ligam a antigénios virais
45
qual é o outro nome para testes serológicos?
testes imunológicos
46
testes serológicos avaliam a resposta imonulógica após vacinação?
sim
47
que tipo de estes esão incluidos nos testes serológicos?
- testes rápidos
- ELISA
- FIA
- CLIA
- western blot
- testes de neutralização
- testes de aglutinação
48
testes moleculares identificam mutações genéticas?
sim
49
as moleculas alvo dos testes serológicos e moleculares são...
antigénios/anticorpos e ácidos nucleicos, respeticamente
50
qual é o principio de deteção dos testes serológicos e moleculares?
resposta imunitária e amplificação de DNA/RNA, respetivamente
51
entre os teste serológicos e moleculares, qual deles têm maior sensibilidade e especificidade?
testes moleculares
52
quais são os passos de testes serológicos?
1. seleção do antigénio/ anticorpo
2. imolubização dos antigénio/ anticorpo
3. inoculação da amostra na microplate
4. lavagem da microplate
5. deteção dos complexos - ELISA/ FIA/ CLIA
6. medição do sinal por quantidade de anticorpo
53
quais as 3 principais caracteristicas de testes rápidos?
- resultado em min
- usam tecnicas de fluxo
- usadas para diagnostico de doenças infecciosas
54
em que consiste o método de ELISA?
os anticorpos são ligados a enzimas para deteção de antigénio na amostra
este é um método com elevada sensibilidade e especificidade
55
quais são os passos da ELISA?
1. imobilização da molecula
2. inoculação da amostra
3. diluição dos anticorpos
4. adição de anticorpos marcados com enzimas
5. adição de um substrato para catalizar enzimas
6. análise com espectrometria
56
quantos métodos e quais existem de ELISA?
4 - direto, indireto, sandwich e competitivo
57
em que consiste o método direto de ELISA?
a molécula é diretamente imobilizada e os anticorpos marcados com enzimas podem logo ligar-se à molécula de interesse
simples e baixa sensibilidade
58
em que consiste o método indireto de ELISA?
usa-se um anticorpo secundário, não havendo lig direta do anticorpo com a enzima ao antigénio
isto amplifica o sinal e aumenta a sensibilidade
59
em que consiste o método sandwich de ELISA?
aqui não é a estrutura de interesse que se liga à superfície sólida, mas sim um anticorpo e depois é como se fosse o indireto
60
em que consiste o método competitivo de ELISA?
o anticorpo capturado é fixado na superfície sólida e incubado com a amostra e com um antigen competidor, havendo uma competição para ver quem se liga ao anticorpo
mais lig anticorpo-enzima = mais escura a cor
61
em que consiste o método CLIA?
os anticorpos têm marcação quimiluninescente para deteção de antigénios, a quanificação faz-se com base na luz emitida na sequência de reações químicas
análise quantitativa e com alta sensibilidade
62
quais são as diferenças entre ELISA e CLIA?
uma deteta a ligação entre a molecula imobilizada e a molecula ligada à enzima e a outra deteta luz
a CLIA tem maior sensibilidade ma é mais cara
63
para que é que é usado o método de Western blot?
para detetar a presença, o tamanho, e a quantidade de proteinas, tendo uma sensibilidade média
64
quais são os passos do metodo de Western blot?
1. separação de proteínas
2. transferência para membrana
3. staining
4. gera-se um sinal para deteção de filmes
65
o que são testes de neutralização?
avalia a capacidade de uma molécula (agente neutralizador) afetar a atividade biológica de uma molécula alvo
com base na viabilidade celular, replicação viral, atividade enzimática, ...
66
o que são testes de Aglutinação?
baseiam-se na aglutinação de células/ bactérias/... na presença de determinado anticorpo/ antigénio
quando o anticorpo de liga a multiplos antigénios formam se agregados fáceis de ver
é um estes rápido e simples, qualitativo ou semi-quantitativo
67
PCR é um teste molecular ou serológico?
molecular
68
no que consiste um PCR
a DNA polimerase sintetiza novas cadeias de DNA seguindo o primer
É usado para sequencias de DNA, análise de expressão genética
69
quantas fases e quais tem um PCR?
3 fases:
Denaturation: Separação das cadeias de DNA por aquecimento
Annealing: os primers ligam-se à cadeia
Elongation: ação da DNA polimerase
70
para que serve a reverse transcription polymerase chain reaction?
permite a amplificação de segmentos de RNA
a transcrição reversa pega em RNA e cria uma cadeia de DNA (util para detetar virus) e depois faz-se um PCR
71
o que faz a sequenciação de ácidos nucleicos?
permite determinar a ordem precisa das bases de nucleótidos
permite identificar doencas genéticas e compreender o risco de uma pessoa vir a desenvolver uma doença
72
o que é um teste de cultura?
cultivo e crescimento de microorganismos a partir de bioespécimes obtídos dos pacientes
73
que tipos de culturas há?
solidas, líquidas e celulares
74
em que é que se baseia o controlo de qualidade?
precisão
consistência
exatidão
->Fidelidade
75
em que consiste o controlo de qualidade interno?
- regulação regular
- amostras de controlo
- testes paralelos
76
em que consiste o controlo de qualidade externo?
- comparação inter-laboratorio
- participação em testes de eficiência!
