ARN recombinante Flashcards
Tipos de DNA de una bacteria
DNA cromosomico
DNA no cromosomico (plásmido)
que pasa si se le quita el DNA cromosómico a una bacteria
muere inmediatamente
que pasa si se le quita el DNA no cromosomico o plasmido a una bacteria
solo se le quita información extra pero no muere
RNA recombinante
resultado de unir diferentes DNA de orígene diferentes en un vector, permite la producción de proteínas específicas en células hospedadoras
Enzimas de restricción : funciones
cortan el DNA en sitios específicos para permitir su manipulación genética
Tipos de enzima de restricción
I, II, III, IV
enzimas de restricción de tipo I
corte lejos del reconocimiento
enzimas de restricción tipo II
palindrómicas, cortan donde reconocen
enzimas de restricción tipo III
corte asimetrico, cerca del sitio de reconocimiento
enzimas de restricción tipo IV
reconocen DNA metilado
Tipos de vectors
plásmidos, bacteriófagos, cósmidos y cromosomas artificiales (BAC y YAC)
Plásmido y su ventaja
molécula de DNA circular que se replica rápido y fácil de manipular
Vectores cósmidos
combinación de plásmido y fago, capaz de transportar grandes fragmentos de DNA
Pasos de la clonación
- corte del DNA con enzimas de restricción
- preparación del vector
- Unión de DNA con ligasa
- Introducción de células competentes
- transformación celular
- selección de colonias con vector recombinante
como se combina que una bacteria tiene el vector recombinante
se cultivan en un medio antibiótico, las que sobreviven contienen el vector con gen de resistencia
Tipos de hospedadores
Bacterias
Levaduras
Características de los hospedadores bacterias
crecimiento rápido
bajo costo
limitadas en modificaciones postraduccionales
hospedadores levaduras
mejor procesamiento de proteínas pero pueden afectar funcionalidad
Cromosomas artificiales
BAC: DNA bacteriano
YAC: sustituye DNA de levaduras por el deseado
Vectores
moleculas que transportan DNA foráneo a células hospedadoras
Como es el corte rombo
parejo
De que sirve cortar con las mismas enzimas de restrcción
Siempre se van a tener los mismos dos nucleótidos
que se requiere para la expresión de un gen
punto de origen
promotores
IRES (sitio de union ribosomal)
secuencias palindrómicas
cola poli A
marcaje de selección
de que sirve un marcaje de selección
para saber que bacteria tiene el plásmido que se requiere y cual no