Apoptose Flashcards
Terme inventé
John Kerr 1972
Inhibition apoptose
Cancer
Maladies auto imunes
Infections virales
Sur activation apoptose
Sida
Maladies neuro dégénérative (parkinson et Alzheimer)
Maladies auto immune
Apoptose+++
🔸Atrophie corp cell
🔸Condensation chromatine
🔸Fragmentation adn noyau
🔸Rupture enveloppe nucléaire
🔸Densification éléments INTRACELLULAIRE
🔸Rétractation cyto
🔸PS phosphatidylserine flip flop feuillet EXTERNE
🔸Pas libération contenu cellulaire
🔸Pas réaction inflammatoire
Forme inactive caspase
Pro caspase
Pro domaine
N term
Grande SU
Porte site catalytique par cystéine
Et penta peptide QACXG
Petite su
C term
Forme active=
Tetramere
Caspases initiatrices
Pro domaine LONG
🔸2
🔸8
🔸(9)
🔸10
🔸12
Caspases effectrices
Substrat un PT autre qu’une caspase mais avec résidu aspartate
Pro domaine COURT
🔸3
🔸6
🔸7
Voie intrinsèque régulé famille de protéine
Bcl2
Famille Bcl2
Anti apoptotique
🔸Bcl2
🔸Bcl xl
Famille Bcl2
Pro apoptotique
🔸Bid
🔸Bad
🔸Bax
🔸Bak
+++++
Activation voie intrinsèque
Abs facteurs trophiques
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Bad sequestre Bcl2, Bcl xl
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Plus role inhibiteurs
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Bax= homo oligomerise
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Canal laisse passer CYTOCHROME C
Voie intrinsèque CYTOCHROME C
CYTOCHROME C fixe Apaf1
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Domaine CARD Apaf1 recrute caspases
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CARD Apaf1+ CARD pro caspase 9
(+Cyto C +ATP = Apoptosome)
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Clivage caspases=ACTIF
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Clive pro caspase 3 en caspase 3
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Induit apoptose
Condensation ADN par
Protéine AIF
Fragmentation ADN par
Endonuclease G
(EDG)
Voie extrinsèque
Ligand
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Activation DD et DED
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Recrutement FAD TRADD
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Fixation procaspase 8/ competition avec FLICE
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DISC
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FLIP inhibiteur FLICE
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Libération caspase 8 active
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Pro caspase 3 en caspase 3/ Bid en tBid
Protéine intervenant lors d’un stress, trop erreurs
Pour corriger
Grp 78
Tente corriger repliement protéines accumulé
Dissociation Grp78
Dans l’ordre:
PERK
ATF 6
IRE 1
Stress apoptose
Libération Ca2+ active mCalpaïne
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Active procaspase 12 en caspase 12
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Active procaspase 9 en caspase 9
Stress PERK et ATF6
PERK/ATF1
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activent CHOP
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CHOP inhibe Bcl2
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active Bad/Bak
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apoptose
Stress IRE1
IRE1 + JIK
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Recrute TRAF 2
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Active pt ASK1
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ASK1+Jun kinases
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phospho Jun en PJun
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Activation MAPK
P53
🔸Bax- pro apoptotique
🔸lié Bcl xl puis enlevé par PUMA
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Mono ubiquitine= passe mito
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Se lie cyclofiline D
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Perturbe MPT= rupture compo mito ac lib compo pro apoptotique
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Sortie cytochrome C
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Fav AIF/ endoG et libére Smac/Diablo
↗️Stimule apoptose intrinsèque
Quelle voie active quelle voie?
EXTRINSÈQUE peut activer la INTRINSÈQUE+++
Marquage nucléaire
Voir comment est noyau
🔸Hoechst ou DAPI (excité UV, fluorescent en 💙)
🔸TUNEL, si apoptose, lib extrémité 3OH, transferase DUTP +Brome 💚
🔸Iodure propidium ❤️qd cell NECROTIQUE
Marquage PS
PS, affinité avec annexine V
Annexine V passe pas mb
FITC annexine V 💚
ACTIVATION CASPASES 🔴🔴🔴🔴🔴🔴🔴🔴🔴
Western Blot
Si caspases activés
Pro caspase < caspase
Et des fragments liés au clivage pro caspases
ACTIVITÉ CASPASES 🔴🔴🔴🔴🔴🔴🔴🔴🔴
Apporte substrat spécifique de la caspase étudié
Agit substrat et on verra produits obtenus par colorimétrie ou fluorescence