Adénovirus

Question 1

Vrai ou faux : les adénovirus (Ads) provoquent uniquement des maladies bénignes

Answer 1

Faux, à l’exception des cas chez les patients immunodéficients

Question 2

Quelle est la structure d’un adénovirus ?

Answer 2

Virus non enveloppé à ADN double brin

Question 3

Comment est composée la capside ?

Answer 3

Icosaédrique (20 facettes et 12 sommets), sur chaque sommet la base du penton interagit par liaison non covalente avec une fibre (tête + tige + queue)

Question 4

Combien y a t-il de capsomères ?

Answer 4

252 : 240 hexons qui constituent les 20 facettes et 12 pentons par virus (1 par sommet)

Question 5

Combien existe t-il de sous-groupe d’adénovirus ?

Answer 5

7 (A-F) divisés en 60 sérotypes

Question 6

Vrai ou faux : les Ads sont le vecteur le plus utilisé en thérapie génique

Answer 6

Vrai

Question 7

Par quelle méthode peut-on déterminer la structure des Ads ?

Answer 7

Cryomicroscopie (+ simple que la cristallographie)

Question 8

Quels sont les 3 capsomères structuraux majeurs ?

Answer 8

L’hexon, la base du penton et la fibre

Question 9

Comment est structuré l’hexon ?

Answer 9

Homotrimère (capsomère trimérique de 3 monomères identiques) de 315 kDa (3x105)

Question 10

Quelle est la protéine la plus immunogène sur un adénovirus ?

Answer 10

Hexon

Question 11

Comment est structuré le penton ?

Answer 11

Homopentamère (capsomère pentamérique de 5 monomères identiques) de 300 kDa (5x60)

Question 12

Comment est déclenchée l’internalisation du virus ?

Answer 12

La boucle RGD du penton déclenche l’internalisation du virus entier par interaction avec l’intégrine (=récepteur secondaire)

Question 13

Comment est structuré la fibre ?

Answer 13

Homotrimère (capsomère trimérique de 3 monomères identiques) de 105 kDa (3x35) pour l’Ad3

Question 14

Vrai ou faux : la tête de la fibre réagit avec les récepteurs primaires lors du cycle viral

Answer 14

Vrai

Question 15

Comment est composé le génome ?

Answer 15

• ADN db
• 2 séquences inversées répétées (ITR = Inversed Terminal Repeat) qui déclenchent la circularisation de l’ADN
• Séquence ATAATA sur l’extrémité 5’ = origine de réplication

Question 16

Quels sont les 3 types de cycles viraux ?

Answer 16

• Cycle lytique : production d’une nouvelle particule virale et lyse de la cellule
• Cycle abortif : le virus rentre dans une cellule sans produire de particule
• Cycle de transformation : début des tumeurs cancéreuses (intégrines déclenchent l’internalisation)

Question 17

Qu’est ce qu’une cellule permissive ?

Answer 17

Cellule infectée dans laquelle le virus se multiplie

Question 18

Quel est le cycle viral ?

Answer 18

1. Phase précoce : reconnaissance, fixation et internalisation du virus
2. Phase de réplication de l’ADN viral et de production des protéines virales
3. Phase tardive : assemblage et libération des virions

Question 19

Vrai ou faux : le virus peut se camoufler du système immunitaire lors de la phase précoce

Answer 19

Vrai

Question 20

En quoi peuvent s’auto-assembler certains sérotypes (Ad3) durant la réplication virale ?

Answer 20

Penton dodécaèdre (PtDd)

Question 21

Quels sont les 3 vecteurs les plus utilisés en thérapie génique ?

Answer 21

1. Adénovirus
2. Rétrovirus
3. Plasmide d’ADN

Question 22

Quel est le but de la thérapie génique ?

Answer 22

Apporter un gène d’intérêt grâce à un génome viral et bloquer la réplication virale afin de lyser les cellules

Question 23

Comment utiliser les Ads dans la thérapie génique ?

Answer 23

Modifier le génome des Ads sans qu’il perde ses capacités de fabriquer des virus et qu’il produise la protéine d’intérêt

Question 24

Quel est le problème de l’utilisation des Ads pour la thérapie génique ?

Answer 24

La cassette E1 déclenche l’expression de tous les gènes qui contrôlent la réplication virale –> une amplification du virus est nécessaire avant injection

Question 25

Qu’est ce que l’ADDomer (ADD) ?

Answer 25

PtDd conçu pour exprimer tout type d’épitopes linéaires

Question 26

Quel système est utilisé dans les cellules d’insectes ?

Answer 26

Baculovirus préparé dans des cellules SF21

Question 27

Vrai ou faux : les capacités d’internalisation sont conservées malgré le clivage

Answer 27

Vrai

Question 28

Combien peut-on insérer d’AA dans la boucle RGD entre Sacl et Xbal ?

Answer 28

200

Question 29

Comment insérer des épitopes repliés dans la boucle RGD ?

Answer 29

Essayer d’agrafer l’extrémité N-ter des fibres avec des liaisons disulfures sur l’ADD

Question 30

Que permet un peptide agrafé à l’ADD par les

ponts disulfures ?

Answer 30

Ouverture de la voie à l’extension du peptide avec des protéines plissées

Question 31

Combien d’épitopes peuvent être insérés dans des ADD ?

Answer 31

60 ou 120 repliés ou relâchés