Activation des lymphocytes T et mise en branle de leur réponse

Question 1

Phase de la réponse immunitaire

Answer 1

Tnaïf—Expansion (+Ag)—-Teffecteurs—-Contraction (apoptose)—– Tmémoires

Question 2

Évènements centraux de la réponse T

Answer 2

Activation et expansion clonale

Question 3

Que permet L’activation des lymphocytes T suite à la reconnaissance antigénique

Answer 3

permet la reprogrammation transcriptionnelle (via l’action de facteurs de transcription) de la cellule afin de mettre en branle la réponse T (prolifération et différenciation).

Question 4

Par quoi commencent toutes les voies de transduction de signaux?

Answer 4

Récepteurs qui détectent l’Arrivée du signal.

Question 5

L’interaction du récepteur et du ligand produit …

Answer 5

des changements qui mettent en mouvement une chaîne ordonnée d’évènements qui finalement modifie le processus visé.

Question 6

Évènement clé pour l’activation

Answer 6

la reconnaissance de l’antigène par le RCT et le co-engagement du co-récepteur CD4 ou CD8 avec le CMH. Ceci amène lck à proximité des chaînes CD3 du RCT. Lck phosphoryle les résidus tyrosines des ITAM

Question 7

Évènements précoces de l’activation des lymphocytes T

Answer 7

• Gain d’activité par Lck
• Phosphorylation des ITAM du RCT/CD3 (recrute Zap-70 via domaine SH2
• ZAP-70 se lie via son domaine SH2 aux ITAM
• phosphorylés de z
• Proximité de Lck permet de phosphoryler ZAP-70
• ZAP-70 est actif et enclenche la cascade de signalisation

Question 8

Voies de signalisation enclencher par ZAP-70

Answer 8

1. Flux calcique
2. Protéine kinase C
3. Ras-Map kinase

Question 9

Propagation du signal vers les voies de signalisation

Answer 9

La phospholipase C (PLC) gamma se lie à la molécule adaptatrice LAT phosphorylée. Ceci permet à PLCgamma d’être phosphorylée et donc activée. Ceci localise aussi PLCgamma à la membrane où est son substrat PIP2. . Ceci permet l’ hydrolyse du PIP2 (phospholipide membranaire) en IP3 (inositol tri-phosphate)et DAG (diacylglycérol). Ces seconds messagers initient 2 voies de signalisation

Question 10

Flux calcique

Answer 10

IP3 permet l’augmentation du calcium intracellulaire qui mène à l’activation d’une calmoduline phosphatase dépendante, la calcineurine qui déphosphoryle le facteur de transcription (FT) NFAT (permet à NFAT de migrer au noyau)

Question 11

Protéines Kinase C

Answer 11

Activation de DAG reste au niveau de la membrane et active PKC (protéine kinase C; sérine/thréonine kinase) qui phosphoryle différents substrats qui libère le FT NFkB afin qu’il puisse aller au noyau.

Question 12

Ras- MAP kinase

Answer 12

La phosphorylation de LAT permet l’activation de la petite protéine G ras via le recrutement de Grb2/SOS; SOS (GEF dans schéma) active Ra . Ras inactif échange son GDP contre GTD, devient actif. Ceci active la voie des MAP kinases (succession de phosphorylation de résidus sérine et thréonine par une cascade de protéine kinase). En résulte la phosphorylation des facteurs de transcription Fos et Jun qui forment l’hétérodimère AP1 qui permet la transcription de gènes nécessaires à la prolifération cellulaire et à la production d’IL-2

Question 13

L’action des trois FT NFAT, AP-1 et NFKB permet quoi?

Answer 13

d’induire le programme requis pour la prolifération et la différenciation des cellules T (dont le gène clé IL-2)

Question 14

Cyclosporine

Answer 14

inhibe la déphosphorylation de NFAT ce qui bloque l’activation des T; puissant immunosuppresseur utilisé en clinique pour la survie des greffons

Question 15

Est-ce que la reconnaissance antigénique est suffisante?

Answer 15

Non car risque d’activer des cellules T auto-réactives qui auraient échapper à la sélection négative

Question 16

Costimulation permet…

Answer 16

de s’assurer que la cellule T répond dans un contexte de danger. Les cellules présentatrices d’antigène (CPA) vont fournir la co-stimulation seulement dans un contexte infectieux ou de danger

Question 17

Signaux requis pour l’activation des cellules T

Answer 17

1. RCT-CMH/peptide
2. CD28-B7 (co-stimulation)

Question 18

Co-stimulation: CD28

Answer 18

Signal positif
- constitutive sur les lymphocytes T

Question 19

Co-stimulation:CTLA4

Answer 19

Signal négatif
- induite suite à l’engagement du RCT

Question 21

Signal de costimulation entre en synergie avec signaux couplés du RCT pour…

Answer 21

augmenter la production d’IL-2 et la prolifération des T. Absence= pas de réponse T

Question 22

Niveau moléculaire

Answer 22

: amplifie et aide à la cascade de signalisation du RCT

Question 23

James Allison

Answer 23

• CTLA-4
• Ac bloquant l’interaction CTLA-4 avec ligands (CD80/CD86)= augmente réponse cellule T
• Modèle souris= bloquer l’interaction controle la croissance tumorale en augmentant la réponse des lympho T
• Utiliser pour traiter le mélanome

Question 24

Tasuku Honjo

Answer 24

-PD-1
- Molécule expression induite par activation des lympho T= inhibition fonction des cellules T suite à interaction avec ligands (PDL-1 et PDL-2)

Question 25

Nom des thérapies développer par Tasuku Honjo et James Allison

Answer 25

Inhibiteur de point de contrôle

Question 26

Anergie

Answer 26

: état d’inactivation marqué par l’incapacité des cellules T à proliférer en réponse à un Ag.
Le choix entre l’expansion clonale ou l’anergie est déterminé par la présence ou absence de costimulation.
Démontré en culture avec des cellules présentatrices d’Ag (CPA) fixés au glutaraldéhyde, perte de l’expression de B7

Question 27

Pas d’interaction CD28-B7 lorsque les CPA sont fixées au glutaraldéhyde

Answer 27

pas de prolifération ni de sécrétion d’il-2 par les cellules T

Question 28

. blocage de l’interaction CD28-B7 à l’aide d’un Ac monovalent (Fab) anti-CD28

Answer 28

pas de prolifération et sécrétion d’IL-2 par les T

Question 29

Restimulation des cellules obtenues en a ou b en présence de costimulation

Answer 29

les cellules ne répondent pas, il y a eu induction d’anergie.

Question 30

la costimulation peut être fournie en trans. Stimulation comme en a mais ajoute des CPA ne présentant pas l’Ag mais fournissant la costimulation car expriment B7

Answer 30

Il y a maintenant prolifération et sécrétion d’Il-2 par les T

Question 31

On peut fournir la costimulation en oligomérisant (cross-linkant) CD28 à l’aide d’un Ac

Answer 31

Démontre bien que la CPA fixée est bien capable de fournir le signal 1

Question 32

vrai ou faux,
La co-stimulation régule positivement l’expression de l’IL-2 et de son récepteur

Answer 32

Vrai

Question 33

Qu’est-ce qui arrivent aux cellules T après co-stimulation?

Answer 33

Les cellules T deviennent blastiques (grosses, augmentation du cytoplasme) et entrent en prolifération
Font plusieurs cycles de division environ 48h après la reconnaissance ag
Transcription de l’IL-2 et son récepteur
Il y aura aussi différenciation en effecteurs (acquisition de fonctions effectrices afin d’éliminer l’agent infectieux) sous l’action de cytokines polarisantes ainsi que des changements dans l’expression de molécules de surface (entres autres pour permettre l’entrés dans le tissu infecté)

Question 34

Vrai ou faix,
La costimulation diminue la demi-vie de l’ARNm de l’IL-2

Answer 34

Faux, augmente

Question 35

Vrai ou faux,
IL-2 provoque la prolifération et diférenciation des T

Answer 35

Vrai

Question 36

Quelles sont les meilleures cellules présentatrices d’antigènes et sont les seules capables d’Activer les lympho T naïfs

Answer 36

Cellules dendritiques

Question 37

Activité de costimulation des CPA augmente suite à…

Answer 37

l’activation

Question 38

Entrée des lymphocytes T par diapédèse dans les ganglions lymphatiques

Answer 38

Cette entrée est indépendante de l’Ag. Les lymphocytes T expriment CD62L (L-sélectine), ceci guide leur sortie du sang vers les organes lymphoïdes périphériques. CD62L ou L-sel fait partie de la famille des sélectines. Chaque type de sélectine se lie à un type de carbohydrate de la surface cellulaire. CD62L ou L-sel se lie aux sucres des adressines vasculaires CD34 et Glycam-1 (exprimées par les HEV; les HEV («high endothelial veinule») sont des vaisseaux sanguins dans les ganglions lymphatiques qui permettent l’entrée des lymphocytes circulants). L’interaction L-sel avec les adressines vasculaires est responsable de la migration spécifique des cellules T naïves aux organes lymphoïdes secondaires (rolling:roulement) mais ne permet pas en soi de franchir la barrière endothéliale. Ceci requiert des intégrines et chémokines. La migration des lymphocytes T naïfs dans les ganglions est médiée par la chémokine CCL21 (lié par le récepteur au chémokine CCR7). CCL21 est exprimé par les HEV, les cellules stromales des ganglions et les DC. Le récepteur CCR7 est exprimé par les lymphocytes T naïfs. CCL21 se lie à la matrice extracellulaire des HEV. L’interaction CCL21/CCR7 va activer l’intégrine LFA-1(augmentation de l’affinité pour son ligand ICAM-1). Ceci permet d’arrêter la progression dans le sang (adhésion) et l’entrée par diapédèse dans les organes lymphoïdes secondaires.

Question 39

Réponses de l’organisme à l’infection

Answer 39

1. Adhérence à l’épithélium. Établissement de l’infection
2. Infection locale et entrée dans l’épithélium. La réponse innée locale induite par les processus de réparation tissulaire: production de protéines/peptides anti-microbiens, phagocytes et compléments détruisent les microorganismes.
   Étapes 1 et 2. La majorité des microorganismes sont controlés à ce stade. Sinon ils sont au moins restreints par le système inné pendant que la réponse adaptative se développe.
3. Infection locale du tissu. Les cellules dendritiques (DC), spécialisées dans la présentation de l’Ag, migrent au ganglion lymphatique (LN) drainant le site d’infection.
4. Dissémination lymphatique. La lymphe amène aussi les pathogènes et les antigènes au LN.
   ACTIVATION DE LA RÉPONSE ADAPTATIVE
5. Immunité adaptative (ou spécifique). Les cellules ou molécules effectrices éliminent le pathogène au site d’infection

Question 40

DC immature (Dans les tissus)

Answer 40

-faible expression du CMH I et II et des molécules
de co-stimulation
-n’exprime pas CCR7
-forte activité phagocytaire et micropinocytaire

Question 41

DC matures (migrer dans organes lymphoïdes)

Answer 41

-augmentation de l’expression:
CMHI, CMHII, B7 (co-stimulation)
-gain de l’expression:
molécules d’adhésion (interaction avec T), CCR7 (entrée dans ganglions lymphatiques)
-augmentation de la présentation antigénique
-diminution de la phagocytose
-sécrétion de chémokine (CCL18) qui attire les lymphocytes T
naïfs

Question 42

Dynamique de la réponse des cellules T

Answer 42

1. Les lymphocytes Tnaïfs circulants entrent dans les ganglions lymphatiques
2. L’Ag est amené du site d’infection au ganglion par les cellules présentatrices d’Ag (CPA) (cellules dendritiques qui patrouillent les tissus)
3. Les lymphocytes T y recherchent leur Ag à la surface des CPA
   (cellules dendritiques)
4. Si l’Ag est absent le lymphocyte T retourne dans la circulation
5. Si l’Ag est présent, le lymphocyte T prolifère et se différencie en effecteur.
   Les lymphocytes T effecteurs peuvent maintenant migrer au site d’infection
   et éliminer l’agent infectieux

Question 43

Migration lympho T activés au site de l’infection

Answer 43

modifient l’expression de molécules
de surface afin de pouvoir migrer
Arrêt de l’expression de CD62L par les lymphocytes T activés bloquent leur entrée dans les organes lymphoides secondaires. Les lymphocytes T activées par la reconnaissance antigénique expriment une nouvelle intégrine, VLA-4. Cette nouvelle intégrine permet l’adhésion des cellules T aux endothéliums activés par l’infection, ces vaisseaux expriment le ligand de VLA-4, VCAM-1. Ceci permet la migration spécifique des cellules T activées au site de l’infection