ריצוף דנא (7) Flashcards
1
Q
מהי שיטת Sanger?
A
שיטת סנגר (Sanger sequencing) היא טכניקת רצף DNA שנועדה לקבוע את סדר הנוקלאוטידים במקטע DNA מסוים.
תהליך השיטה כולל את השלבים הבאים:
1. הכנה: מקטע ה-DNA המעניין מנותק ומושכפל.
2. הוספת פריימרים: פריימרים (קצרי DNA) משמשים כתחילת הסינתזה של גדיל חדש.
3. שכפול עם חומרים פלורסנטיים: DNA פולימראז מוסיף נוקלאוטידים לגדיל החדש. השיטה משתמשת בנוקלאוטידים חסרי-חמצן (dideoxynucleotides) אשר מסיימים את התהליך בכל פעם שנוספים אליהם.
4. הפרדה: תוצרי השכפול מופרדים לפי אורך בעזרת אלקטרופורזה (מולקולה אחת, הקטנות ביותר מגיעות ראשונות על ידי משיכה חשמלית) מה שמאפשר זיהוי של כל נוקלאוטיד לפי צבעו בלייזר רגיש
