6-Mesure de l'activité enzymatique

Question 1

Quel est l’objectif principal d’une enzyme?

Answer 1

Baisser l’énergie d’activation de la reaction

Question 2

Définis la cinétique enzymatique

Answer 2

l’étude des paramètres cinétiques d’une
enzyme par le suivi de la réaction
enzymatique

Question 3

Par quels paramètre peut-on définir une enzyme?

Answer 3

-vitesse maximale de réaction (Vmax)
-la constante de Michaelis (Km)
-température optimale
-pH optimal

Question 4

Les paramètres spécifiques d’une enzyme permettent de quantifier quoi?

Answer 4

l’efficacité d’une réaction

Question 5

l’activité enzymatique est influencé par des propriétés spécifiques à l’enzyme, donne des exemple

Answer 5

concentrations des substrats, activateurs, et inhibiteurs

Question 6

l’activité enzymatique est influencé par des effet non spécifiques, donne des exemple

Answer 6

des sels et tampons, pH, force ionique, température

Question 7

Comment peut-on définir la constante catalytique?

Answer 7

constante de vitesse qui est égale au nombre de molécules de substrat transformées
par chaque molécule d’enzyme par seconde

Question 8

V ou F : Vmax d’une enzyme est une constante

Answer 8

Faux, Vmax dépend de la quantité d’enzyme

Question 9

Défini Km et ce qu’il représente.

Answer 9

-concentrations de substrat qu’il faut pour arriver à vmax / 2
-valeur approximative de l’affinité
du substrat pour l’enzyme
(concentration en substrat nécessaire pour saturer la moitié des sites catalytiques de l’enzyme).

Question 10

Que représente Vmax d’une réaction?

Answer 10

Cette vitesse illustre la saturation
des sites catalytiques de l’enzyme par le
substrat.(une augmentation de la concentration du substrat n’aura aucun effet sur la vitesse de la réaction)

Question 11

Affinité si km est élevé…?

Answer 11

Faible, pcq forte [C] pour atteindre Vmax/2

Question 12

Afinité si km est faible…?

Answer 12

forte, pcq faible [C] pour atteindre Vmax/2

Question 13

Il est important que la vitesse soit linéaire pendant la période d’incubation utilisée, pourquoi?

Answer 13

pour détecter convenablement la formation du produit de la réaction

Question 14

Que fait un inhibiteur ?

Answer 14

permettent d’inactiver de manière réversible l’enzyme

Question 15

Quels sont les 3 type d’inhibiteurs

Answer 15

compétitifs, non-compétitifs, incompétitifs,

Question 16

Comment fonctionne l’inhibiteur compétitif?

Answer 16

l’inhibiteur est en compétition avec le substrat pour se lier au site actif de l’enzyme.Lorsque qu’il se lie à l’enzyme il l’inactive

Question 17

Comment fonctionne l’inhibiteur non-compétitif?

Answer 17

L’inhibiteur se lie au substrat et au complexe ES

Question 18

Comment fonctionne l’inhibiteur incompétitif?

Answer 18

l’inhibiteur se lie au complexe ES (enzyme substrat) et empeche la transformation en Produit

Question 19

Quel est l’effet d’un inhibiteur compétitif sur Km et Vmax?

Answer 19

Km augmente et Vmax ne change pas

Question 20

Quel est l’effet d’un inhibiteur non-compétitif sur Km et Vmax?

Answer 20

Le Km ne change pas et Vmax diminue

Question 21

Quel est l’effet d’un inhibiteur incompétitif sur Km et Vmax?

Answer 21

Vmax est diminué et Km est diminué

Question 22

Comment réagis une réaction s’il y a une accumulation de produit ?

Answer 22

Ca entraine une réaction de retour (rétro-inhibition)

Question 23

Donne au moins 3 facons d’empecher l’accumulation de produits.

Answer 23

-utiliser des hautes concentration de substrat
-utiliser des ph non-physiologique
-réaction enzymatique de courte durée
-

Question 24

Qu’est-ce qui influence les valeurs de Km et Vmax?

Answer 24

pH, force ionique, température

Question 25

Est-il possible qu’un tampon joue le role d’un inhibiteur?

Answer 25

Oui

Question 26

De quelle façon est-ce que le tampon peut jouer un rôle d’inhibiteur?

Answer 26

-S’il y a moins de force ionique dans le tampon
-s’il y a des molecule avec des charge negative comme le substrat il peut y avoir competition pour le site actif
-concentration élevé du tampon donc association possible=inhibition

Question 27

comment évolue la vitesse de reaction lorsqu’on augmente la T de 10 degrés

Answer 27

Elle se multiplie par deux

Question 28

Comment est-ce qu’on peut faire pour que la température apparente lors de l’activité maximale soit plus élevé?

Answer 28

Réduire la période d’incubation pour qu’il y ai moins de temps pour que la protéine se dénature

Question 29

Comment peut-on mesurer l’activité d’une enzyme ?

Answer 29

déterminer la quantité de produit généré

Question 30

Expliquez la méthode discontinue pour déterminer l’activité d’une enzyme

Answer 30

L’enzyme est incubé avec ses substrats pendant une certaine période de temps et la réaction est ensuite arrêtée. S’applique a tout les systèmes enzymatiques

Question 31

Lors des mesure d’activité enzymatique, comment arrête-t-on les réactions?

Answer 31

Méthode qui provoque la denaturation ou inactive l’enzyme par précipitation (acide trichloroacetique et acide perchlorique)

Question 32

Donne deux méthodes pour dénaturer instantanément les enzymes.

Answer 32

-dénaturation thermique
-précipitation par acide trichloracétique

Question 33

Quelle sont les façons de détecter le produit créé par une réaction enzymatique?

Answer 33

-convertir le produit (direct ou indirectement) en un autre plus facile à détecter
-par spectrophotométrie/fluorométrie

Question 34

Expliquez la détection directe et indirecte des produit d’une réaction enzymatique mesuré par spectro

Answer 34

-Dans la directe le produit absorbe la lumière
-Dans indirecte, ajoute une enzyme qui utilise le produit de la réaction pour former du NADH par couplage avec une autre réaction.

Question 35

Qu’implique la mesure de l’activité enzymatique par méthodes continue?

Answer 35

que le progrès de la réaction soit observé
pendant toute la réaction et généralement de façon instantanée