4-Ultra-centrifugation

Question 1

Quelle condition de densité (liquide et molécule) est nécessaire pour permettre la sédimentation?

Answer 1

d (densité molécule) > do (densité liquide)

Question 2

En quoi consiste la centrifugation?

Answer 2

Exposer les échantillons à de forte accélération (Force) pour permettre la séparation des constituants–>culot et surnageant

Question 3

Nommer les 3 type des centrifugeuse.

Answer 3

-centrifugeuse de table –>tube Eppendorf 1,5ml
-Centrifugeuse haute vitesse –>jusqu’à 40 000g pour volume jusqu’à 50/100ml
-ultracentrifugeuse –> jusqu’à 100 000 g

Question 4

V ou F : les macromolécules en solution soumises à la force gravitationnelle montre des évidence de sédimentation

Answer 4

Faux, il faut qu’elles subissent une accélérations énorme

Question 5

Nomme une façon de garder dispersées de façon homogène les macromolécules en solution.

Answer 5

par agitation thermique

Question 6

De quoi dépend la vitesse avec laquelle une particule sédimente dans une ultracentrifugeuse?

Answer 6

de sa masse

Question 7

Décrit la relation de la force de sédimentation

Answer 7

F sédimentation = F centrifuge - F flottaison(due au déplacement de la solution)

Question 8

Quelle sont les deux éléments concerné dans la force de friction?

Answer 8

la particule et la solution

Question 9

Décrit la phase stationnaire lors d’une centrifugation.

Answer 9

moment après l’accélération où toutes les forces sont contrebalancé

Question 10

Donnez une autre utilité la technique de sédimentation.

Answer 10

à mesurer la masse des macromolécules

Question 11

Qu’est ce que le volume partiel spécifique et qu’est ce qu’il permet de calculer?

Answer 11

c’est le changement en volume lorsque 1g sec de particules est dissous dans une solution à
volume infini et ça sert à calculer le volume d’une particule

Question 12

Comment est exprimé la valeur du coefficient de sédimentation?

Answer 12

sa valeur est exprimée en unités de 10E-13 sec qui sont connues sous forme de Svedbergs (S)

Question 13

À quoi peut-on comparer le coefficient de sédimentation?

Answer 13

coefficient de mobilité électrophorètique

Question 14

V ou F : on peut obtenir la masse à partir du coefficient de sédimentation et de friction

Answer 14

Faux

Question 15

V ou F : l’analyse des complexes de macromolécules utilise TOUJOURS l’ultracentrifugation

Answer 15

Vrai

Question 16

Sous quelle unité est souvent exprimé la masse des constituants des complexes?

Answer 16

Svedberg (S)

Question 17

De quoi dépend la centrifugation différentielle ?

Answer 17

de la taille des particules

Question 18

Pour quoi est-ce que la centrifugation différentielle est généralement utilisé?

Answer 18

-Récupération de culot
-Obtention de préparation partiellement pures d’organelle sub-cellulaire et macromolécule

Question 19

Pour quoi les centrifugeuses préparatives sont-elles conçu?

Answer 19

Pour les échantillons à grand volume

Question 20

Qu’est-ce qui arrive à la [C] et densité d’une solution inerte lors d’une sédimentation?

Answer 20

Elle varie du haut vers le bas du rotor (augmente le pouvoir de la résolution de la centrifugeuse)

Question 21

Donnez les deux application de la centrifugation préparative

Answer 21

-Ultracentrifugation en zones
-Ultracentrifugation en gradient de densité à l’équilibre

Question 22

l’ultracentrifugation en zone sépare les particule selon quel paramètre…

Answer 22

leur coefficients de sédimentation

Question 23

Expliquez le montage d’une ultracentrifugation en zone

Answer 23

solution de macromolécules est déposée sous forme de couche en haut d’un gradient de densité préparé au préalable

Question 24

Quel composé est utilisé pour former le gradient utilisé en ultracentrifugation de zone?

Answer 24

le saccharose

Question 25

Comment l’ultracentrifugation de zone sépare les macromolécules

Answer 25

Celles de forme similaire selon leur masse

Question 26

Comment est récolté les parties séparé d’une centrifugation en zone

Answer 26

avec une aiguille en bas du tube qui récupère les différentes zones

Question 27

L’ultracentrifugation par densité d’équilibre sépare les macromolécules selon…

Answer 27

leur densité

Question 28

Dans l’ultracentrifugation par densité d’équilibre, jusqu’a quand les particule sont entrainé vers le fond

Answer 28

Jusqu’au point où la densité de la
solution environnante est identique à celle de la particule (temps aucun impact après)–>point isopycnique

Question 29

Dans quoi est dissout l’échantillon dans une ultracentrifugation par densité d’équilibre?

Answer 29

Dans une substance dense qui diffuse relativement vite (ex:CsCl et Cs2SO4)

Question 30

Quelle doit être la densité de la particule comparé au gradient dans L’ultracentrifugation par densité
d’équilibre?

Answer 30

doit se trouver dans les limites des densités de gradient.

Question 31

Quelle sont les différent type de rotor?

Answer 31

-godet oscillants (swing out)
-à angle fixe
-verticaux

Question 31

L’ultracentrifugation par densité
d’équilibre est idéale (préféré) pour quoi?

Answer 31

séparer des macromolécules qui possèdent une gamme de densités (ex : acides nucléiques, ribosome, virus, organites subcellulaires)

Question 32

À quoi sert le vacuum fait dans les ultracentrifugeuse?

Answer 32

Enlever la friction avec l’air pour aller vite et ne pas faire chauffer les échantillons

Question 33

V ou F : On ne peut pas réfrigérer les ultracentrifugeuse?

Answer 33

Faux

Question 34

Quels deux points sont important de s’assurer lors de l’utilisation d’une ultracentrifugeuse?

Answer 34

-utiliser le bon rotor
-bien balancer le rotor

Question 35

Quelles sont les deux manière d’exprimer la force centrifuge appliqué sur un échantillon?

Answer 35

RPM et RCF