שיעור 4 Flashcards
הרפדת דנא על ידי אלקטרופורזה פלסמידים
נכון או לא נכון
בדנא מעגלי השכפול מתבצע לשני הכיוונים
נכון
השכפול מתחיל מנקודה מסוימת ומתקדם ימינה ושמאלה בו זמנית
types of DNA manipulations
חיתוך של דנא
ליגציה של דנא
שיבוט דנא
איך מבודדים גן מתוך מולקולת דנא
אניזמי רסטריקציה
אניזמים אלו אשר מבודדים מחיידקים חותכים את הגדיל הכפול של הדנא ברצפים ספציפיים
זנים שונים של חיידקים מייצרים אנזימי רסטריקציה שונים
כל אחד חותך ברצף אחר
הם יכולים לחתוך בצורה חדה או מדורגת-
sticky ends / blunt ends
הגילוי של אנזימים אלו שינו מאוד את המדע
ג׳ל אלקטרופורזיס
מקטעי דנא מנוחים על מצא של גל עם אלקטרודות בכל צד
מקטעים קטנים ינועו מהר יותר
DNA labeling
פסי דנא בג׳ל לא נראים אלא אם הדנא מסומן בדרך כלשהי
שיטה אחת
השריית הגל באתידיום ברומיד זורח תחת אור אולטרה סגול כשהוא קשור לדנא
שיטות אחרות משלבות רדיואטיפ או סמן כימי
פלסמיד
פלסמידים הם מולקולות קטנות ועגולות של דנ״א
דו גדילי במופיעים באופן טבעי בתאי חיידקים
בטבע הם מספקים יתרונות פונקציונליים כמו עמידות לאנטיביוטיקה ועוד
וקטור
מונח כללי המתאר דרך בה מכניסים דנא מסויים לתא מארח
פלסמיד הוא סוג של וקטור
אם גודל הדנא גדול מידי פלסמיד משתמשים ב
BACs
וירוס הוא גם וקטור
סוגי פלסמידים
פלסמידי שיבוט
פלסמידי ביטוי
פלסמידים משתיקי גנים
פלסמידים מדווחים על ביטוי גנים
פלסמידים נגיפיים
פלסמידים משמים להנדסת הגנום
שימושי הפלסמידים
דימות פללורסנטי
יצירת דנא רקומביננטי
ייצור חלבון בכמויות גדולים
מודלים של מחלות
גילוי תרופות
עריכות גנום
שלושת החלקים במרכזיים של הפלסמיד
origin of replication
antibiotic resistance gene
multiple cloning site-
קטע קצר המכיל מספר אתרי רסטריקציה ומאפשר הכנסה קלה של מקטעי דנא לפלסמיד