2. slayt Flashcards
PCR’da neden Thermus aquaticus’dan izole edilen Taq pol kullanılır?
PCR reaksiyonunda çok yüksek sıcaklıklara çıkıldığı için kaplıcalarda yaşayan enzimleri ısıya dayanıklı bir türün polimeraz enzimi seçilmiştir.
Çift aktiviteli enzime bir örnek söyle.
Genellikle E.Coli’Den alınan DNA Pol I hem polimeraz hem de 5’–>3’ aktivitesiyle örnek verilebilir.
Alkalin fosfatazın görevi nedir?
DNA’nın 5’ ucundan fosfat grubu uzaklaştırır.
Polinükleotit kinaz?
Alkalin fosfatazın aksine 5’ ucuna fosfat grubu ekler.
Terminal deoksinükleotidil transferaz?
DNA molekülünün 3’ ucuna bir veya daha fazla deoksinükleotit ekler.
Kaç tip restriksiyon endonükleaz vardır?
3 tip restriksiyon endonükleaz vardır ve tip I ve III oldukça karmaşık ve genetik mühendisliğinde oldukça sınırlı rollere sahiptir.
Gen klonlamada hangi rest. endonükleaz kullanılmaktadır?
tip III
EcoRI resti. endonükleazının adlandırılmasını açıkla.
E=Escherichia (cins) co=Coli (tür) R=RY13 (suş veya varyant) I=first identified (keşif sırası)
Tip II restiriksiyon endonükleazların ana özelliği nedir?
Her bir enzimin DNA molekülünü kestiği spesifik bir tanıma dizisine sahip olmasıdır.
Enzim bu tanıma dizisi içinden DNA’nın iki ipliğini özgül bir kesim kalıbı oluşturacak şekilde keser.
DNA’nın iki zincirinden de 5’–>3’ yönünde okunduğunda aynı diziyi veren nükleotit dizilerine ne denir?
Palindromik tekrarlar.
Tanıma dizilerinin çoğu palindromiktir.
Doğru/yanlış?
Doğru
Küt uçlara örnek ver.
PvuII, AluI, EcoV.
Yapışkan uçlara örnek ver.
EcoRI, BamHI, HindIII, Sau3A.
Restriksiyon parçalarının büyüklüğü nasıl hesaplanır? Örneğin 3 bazdan oluşan bir tanıma dizisi olan bir nükleotit dizisinde restriksiyon parçalarının büyüklüğü nedir?
Enzimin DNA’yı ne kadar sıklıkta kestiğine göre hesaplanır. 4 üzeri 3=64’den 64 baz çiftinde bir kesim olduğunu söyleyebiliriz.
DNA molekülünün büyüklüğünün hesaplanması için kullanılan formül nedir?
D=a-b(logM)
D: hareket edilen mesafe
a ve b:elektroforeze göre değişen sbtler
M: moleküler kütle