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Histología > 1) Técnicas (Ross) > Flashcards

1) Técnicas (Ross) Flashcards

1
Q

Estudio científico de las estructuras microscópicas de los tejidos y órganos del cuerpo

A

Histología o anatomía microscópica

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2
Q

Técnicas auxiliares

A
  • Varios métodos de tinción
  • histoquímica y citoqúmica
  • técnicas de inmunocitoquímica y de hibridación
  • autorradiografía
  • cultivo de tejido y órganos
  • separación células y organulos por centrifugación diferencial
  • preparación titular especializada
  • técnicas microscópicas especializadas
  • sistemas ópticos especializados
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3
Q

Tinción utilizada con mayor frecuencia

A

H&e

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4
Q

Primer paso en la preparación de muestra de un tejido

A

Fijación, conserva de forma permanente la estructura del tejido

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5
Q

La fijación sirve para

A
  • Detener metabolismo celular
  • no degradación enzimática de células y tejidos por autólisis
  • destruir microorganismos patógenos (bacterias, hongos o virus)
  • endurecer tejido como resultado de la formación de enlaces cruzados o desnaturalización de proteínas
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6
Q

Fijador más habitual y composición

A

Formalina, formaldehído al 37%

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7
Q

Cosas que conserva el formaldehído

A

Estructura general de la célula y componentes extracelulares por reacción con grupo amino

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8
Q

Mal fijador de membranas celulares porque no reacciona con lípidos

A

Formaldehído

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9
Q

Segundo paso para preparar la muestra

A

Muestra es preparada para inclusión en parafina
- se corta en 5-15 micrón
- Se lava y deshidrata con alcohol al 100%
- se aclara con solventes orgánicos (xileno o tolueno)

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10
Q

El micromoto es

A

Maquina cortadora especial

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11
Q

Medio de montaje es

A

Una solución que se endurece en un montaje permanente y mantiene la muestra unida al vidrio

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12
Q

Medios de montaje más usados

A

-Resinas sintéticas basadas en tolueno (permout)
- bálsamo de Canadá (trementina hecha de resina del abeto balsámico)
- otros

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13
Q

Tercer paso para preparar la muestra

A

Se tiñe
- antes disolvemos y extraemos parafina con xileno o tolueno
- rehidratamos con alcohol(concentración decreciente)
- teñimos con hematoxilina en agua
- volvemos a deshidratar con alcohol para agregar eosina

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14
Q

Son diluidos por alcoholes y solventes orgánicos que se utilizan usualmente en preparados

A

Lípidos neutros

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15
Q

Otros fijadores

A
  • Lípidos neutros (adiposo):cortes por congelación de tejido fijado con formalina y colorantes que disuelvan grasa
  • estructura de membrana: fijadores especiales + metales pesados ( permanganato y osmio) que se unen a fosolípidos
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16
Q

Uso rutinario de este fijador es la razón principal de excelente estado de conservación de las membranas

A

Tetroxido de osmio

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17
Q

Facts: biopsia por congelación

A

Se solicita cuando no hay diagnostico preparatorio o para identificar hallazgos inesperados
- saber si se extirpo toda masa patológica

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18
Q

Pasos biopsia por congelación

A

1) congelación tejido; por CO2 o isopentano
2) corte de tejido: criostato (micromoto refrigeración) 5 nm- 10 nm
3) tinción cortes: h&e, azul de metileno y PAS

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19
Q

Características de componentes que perduran después de la fijación y como forman macromoléculas

A

No se disuelven con facilidad
Reaccionar con otras moléculas semejantes, así conservándose en el corte
- nucleoproteinas (ac Nucleicos + proteínas)
- proteínas intracelulares de citoesqueleto (en complejo con proteínas asociadas)
- proteínas extracelulares (grandes aglomeraciones, + moléculas similares por enlaces cruzados con vecinas)
- complejo de fosfolípidos y proteínas en membrana

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20
Q

Moléculas que se pierden durante la fijación de rutina con fijadores acuosos

A
  • Glucógeno
  • proteoglucanos y glucosaminoglucanos
21
Q

Moléculas pequeñas que se pierden durante la preparación de muestras de parafina

A
  • Metabólicos intermedios
  • glucosa
  • sodio
  • cloro
    Su conservación aporta información impórtente del metabolismo celular, transporte activo y otros procesos vitales
22
Q

Componentes estructurales que no se ven bien con tinción por h&e y tinción que utilizan

A
  • Elastina (orceína y fuscina-resorcina)
  • fibras reticulares (impregnación argénica)
  • membranas basales (impregnación argénica)
  • lípidos
23
Q

Colorantes basicos

A
  • verde de metileno (verde)
  • azul de metileno (azul)
  • pironina G (rojo)
  • azul de toluidina (azul)
24
Q

Colorantes acidos

A
  • fucsia ácida (rojo)
  • anilina azul (azul)
  • eosina (rojo)
  • naranja G (naranja)
25
Q

No es un colorante basico pero tine propiedades may semejantes

A

Hematoxilina

26
Q

Estos colorantes reaccionan con los componentes anionicos de células y tejidos

A

Básicos

27
Q

Componentes anionicos

A
  • Grupos fosfato de ac. Nucleicos
  • grupos sulfato de glucosaminoglucanos
  • grupos carboxilo de proteínas
28
Q

Reacción basofílica dependiendo de ph

A
  • Alto (10): 3 gpos ionizados y disponibles para reacción (unión electrostática)
  • medio (5 - 7): gpos fosfato y sulfatos ionizados (unión electrostática)
  • bajo (<4): gpo sulfato ionizado
29
Q

Tinción mallory

A

3 colorantes ácidos
- anilina azul (colágeno)
- fucsina-ácida (citoplasma y núcleos )
- naranja G (eritrocitos)

30
Q

Sustancias dentro de células y en la matriz extracelular que presentan basofilia

A
  • Heterocromatina y nucleolos (gpos fostatos)
  • componentes citoplasmáticos (gpos fosfatos en ARNr)
  • material extracelular, hidratos de carbono de matriz de cartílago (gpos sulfato ionizados)
31
Q

Sustancias dentro de la célula y en matriz extracelular acidofilicas

A
  • Mayoría de filamentos citoplasmáticos (músculo)
  • mayoría de componentes membranosos
  • mayoría de fibras extracelulares (gpo amino ionizado)
32
Q

Ciertos colorantes básicos reaccionas con componentes tisulares que cambian su color normal de azul a rojo o purpura, debido a la presencia de polianiones

A

Metacromasia

33
Q

Tiñe hidratos de carbono y macromoléculas con abundancia de estos. Se usa para mostrar glucógeno de células, moco en diversas células y membrana basal subyacente en epitelios y fibras reticulares en tejido conjuntivo

A

Acido periódico de schiff (pas)

34
Q

El PAS se utiliza en esta reacción, basada en hidrolisis débil con ácido clorhídrico para teñir ADN

A

Reacción de Feulgen

35
Q

Alternativa de impregnación argénica

A

Reacción PAS
- tinción de membrana basal y fibras reticulares por asociación de proteoglucanos

36
Q

Técnica creada para estudiar los aumentos de ADN en las células en desarrollo y para analizarla ploidia

A

Microespectrofotometría de Feulgen

37
Q

Glucoproteínas producidas por células específicas del sistema inmunitario como respuesta a una proteína extraña o antígeno

A

Anticuerpos o inmunoglobulinas

38
Q

Colorante más utilizado, absorbe la luz ultravioleta y emite luz verde

A

Fluoresceína

39
Q

Tipo de anticuerpo producido por animales inmunizados

A

Policlonales

40
Q

Tipo de anticuerpo sintetizado por líneas celulares inmortalizadas que se duplican continuamente

A

Monoclonales

41
Q

Técnica más antigua utilizada para identificar distribución de un antígeno dentro de células y tejidos; emplea un anticuerpo primario (fluorocromo) que reacciona con el antígeno, involucra solo un anticuerpo marcado

A

Inmunofluorescencia directa

42
Q

Técnica que en vez de conjugar un fluorocromo con un anticuerpo específico, se conjuga con un anticuerpo secundario dirigido contra el anticuerpo primario

A

Inmunofluorescencia indirecta

43
Q

Describe la capacidad de las moléculas monocatenarias de ARN o ADN para interactuar con secuencias complementarias

A

Hibridación

44
Q

La unión de la sonda de nucleótidos a la secuencia de ADN o ARN se realiza dentro de células o tejido; permite identificar secuencias de nucleotidos de 10 o 20 copias de ARNm o ADN por célula

A

Hibridación in situ

45
Q

Utilizada como una emulsión fotográfica que se coloca sobre un corte histológico para localizar material radioactivo en los tejidos

A

Autorradiografía

46
Q

Método para mejorar la resolución de la microscopia óptica mediante la implementación de una preparación específica que expande físicamente la muestra

A

Microscopio de expansión

47
Q

Tipo de polímeros expansibles

A

Hidrogeles
Materiales muy absorbentes que se encuentran en pañales de bebés

48
Q

Pasos para preparar la muestra Méx

A

1) fijación
2) anclaje: marcar con sonda de interés e incubación con reactivo de anclaje expresando sitios de unión
3) gelificación: conversión de son en gel
4)homogeneización mecánica: romper células
5) expansión: agregar solvente, expansión 3D

49
Q

Expansión lineal de 4.5 veces, aumento de rango de resolución 60 - 70 nm

A

Microscopio de expansión iterativa (mexi)

Histología (32 decks)

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