1) Técnicas (Ross)

Question 1

Estudio científico de las estructuras microscópicas de los tejidos y órganos del cuerpo

Answer 1

Histología o anatomía microscópica

Question 2

Técnicas auxiliares

Answer 2

• Varios métodos de tinción
• histoquímica y citoqúmica
• técnicas de inmunocitoquímica y de hibridación
• autorradiografía
• cultivo de tejido y órganos
• separación células y organulos por centrifugación diferencial
• preparación titular especializada
• técnicas microscópicas especializadas
• sistemas ópticos especializados

Question 3

Tinción utilizada con mayor frecuencia

Answer 3

H&e

Question 4

Primer paso en la preparación de muestra de un tejido

Answer 4

Fijación, conserva de forma permanente la estructura del tejido

Question 5

La fijación sirve para

Answer 5

• Detener metabolismo celular
• no degradación enzimática de células y tejidos por autólisis
• destruir microorganismos patógenos (bacterias, hongos o virus)
• endurecer tejido como resultado de la formación de enlaces cruzados o desnaturalización de proteínas

Question 6

Fijador más habitual y composición

Answer 6

Formalina, formaldehído al 37%

Question 7

Cosas que conserva el formaldehído

Answer 7

Estructura general de la célula y componentes extracelulares por reacción con grupo amino

Question 8

Mal fijador de membranas celulares porque no reacciona con lípidos

Answer 8

Formaldehído

Question 9

Segundo paso para preparar la muestra

Answer 9

Muestra es preparada para inclusión en parafina
- se corta en 5-15 micrón
- Se lava y deshidrata con alcohol al 100%
- se aclara con solventes orgánicos (xileno o tolueno)

Question 10

El micromoto es

Answer 10

Maquina cortadora especial

Question 11

Medio de montaje es

Answer 11

Una solución que se endurece en un montaje permanente y mantiene la muestra unida al vidrio

Question 12

Medios de montaje más usados

Answer 12

-Resinas sintéticas basadas en tolueno (permout)
- bálsamo de Canadá (trementina hecha de resina del abeto balsámico)
- otros

Question 13

Tercer paso para preparar la muestra

Answer 13

Se tiñe
- antes disolvemos y extraemos parafina con xileno o tolueno
- rehidratamos con alcohol(concentración decreciente)
- teñimos con hematoxilina en agua
- volvemos a deshidratar con alcohol para agregar eosina

Question 14

Son diluidos por alcoholes y solventes orgánicos que se utilizan usualmente en preparados

Answer 14

Lípidos neutros

Question 15

Otros fijadores

Answer 15

• Lípidos neutros (adiposo):cortes por congelación de tejido fijado con formalina y colorantes que disuelvan grasa
• estructura de membrana: fijadores especiales + metales pesados ( permanganato y osmio) que se unen a fosolípidos

Question 16

Uso rutinario de este fijador es la razón principal de excelente estado de conservación de las membranas

Answer 16

Tetroxido de osmio

Question 17

Facts: biopsia por congelación

Answer 17

Se solicita cuando no hay diagnostico preparatorio o para identificar hallazgos inesperados
- saber si se extirpo toda masa patológica

Question 18

Pasos biopsia por congelación

Answer 18

1) congelación tejido; por CO2 o isopentano
2) corte de tejido: criostato (micromoto refrigeración) 5 nm- 10 nm
3) tinción cortes: h&e, azul de metileno y PAS

Question 19

Características de componentes que perduran después de la fijación y como forman macromoléculas

Answer 19

No se disuelven con facilidad
Reaccionar con otras moléculas semejantes, así conservándose en el corte
- nucleoproteinas (ac Nucleicos + proteínas)
- proteínas intracelulares de citoesqueleto (en complejo con proteínas asociadas)
- proteínas extracelulares (grandes aglomeraciones, + moléculas similares por enlaces cruzados con vecinas)
- complejo de fosfolípidos y proteínas en membrana

Question 20

Moléculas que se pierden durante la fijación de rutina con fijadores acuosos

Answer 20

• Glucógeno
• proteoglucanos y glucosaminoglucanos

Question 21

Moléculas pequeñas que se pierden durante la preparación de muestras de parafina

Answer 21

• Metabólicos intermedios
• glucosa
• sodio
• cloro
  Su conservación aporta información impórtente del metabolismo celular, transporte activo y otros procesos vitales

Question 22

Componentes estructurales que no se ven bien con tinción por h&e y tinción que utilizan

Answer 22

• Elastina (orceína y fuscina-resorcina)
• fibras reticulares (impregnación argénica)
• membranas basales (impregnación argénica)
• lípidos

Question 23

Colorantes basicos

Answer 23

• verde de metileno (verde)
• azul de metileno (azul)
• pironina G (rojo)
• azul de toluidina (azul)

Question 24

Colorantes acidos

Answer 24

• fucsia ácida (rojo)
• anilina azul (azul)
• eosina (rojo)
• naranja G (naranja)

Question 25

No es un colorante basico pero tine propiedades may semejantes

Answer 25

Hematoxilina

Question 26

Estos colorantes reaccionan con los componentes anionicos de células y tejidos

Answer 26

Básicos

Question 27

Componentes anionicos

Answer 27

- Grupos fosfato de ac. Nucleicos - grupos sulfato de glucosaminoglucanos - grupos carboxilo de proteínas

Question 28

Reacción basofílica dependiendo de ph

Answer 28

- Alto (10): 3 gpos ionizados y disponibles para reacción (unión electrostática) - medio (5 - 7): gpos fosfato y sulfatos ionizados (unión electrostática) - bajo (<4): gpo sulfato ionizado

Question 29

Tinción mallory

Answer 29

3 colorantes ácidos - anilina azul (colágeno) - fucsina-ácida (citoplasma y núcleos ) - naranja G (eritrocitos)

Question 30

Sustancias dentro de células y en la matriz extracelular que presentan basofilia

Answer 30

- Heterocromatina y nucleolos (gpos fostatos) - componentes citoplasmáticos (gpos fosfatos en ARNr) - material extracelular, hidratos de carbono de matriz de cartílago (gpos sulfato ionizados)

Question 31

Sustancias dentro de la célula y en matriz extracelular acidofilicas

Answer 31

- Mayoría de filamentos citoplasmáticos (músculo) - mayoría de componentes membranosos - mayoría de fibras extracelulares (gpo amino ionizado)

Question 32

Ciertos colorantes básicos reaccionas con componentes tisulares que cambian su color normal de azul a rojo o purpura, debido a la presencia de polianiones

Answer 32

Metacromasia

Question 33

Tiñe hidratos de carbono y macromoléculas con abundancia de estos. Se usa para mostrar glucógeno de células, moco en diversas células y membrana basal subyacente en epitelios y fibras reticulares en tejido conjuntivo

Answer 33

Acido periódico de schiff (pas)

Question 34

El PAS se utiliza en esta reacción, basada en hidrolisis débil con ácido clorhídrico para teñir ADN

Answer 34

Reacción de Feulgen

Question 35

Alternativa de impregnación argénica

Answer 35

Reacción PAS - tinción de membrana basal y fibras reticulares por asociación de proteoglucanos

Question 36

Técnica creada para estudiar los aumentos de ADN en las células en desarrollo y para analizarla ploidia

Answer 36

Microespectrofotometría de Feulgen

Question 37

Glucoproteínas producidas por células específicas del sistema inmunitario como respuesta a una proteína extraña o antígeno

Answer 37

Anticuerpos o inmunoglobulinas

Question 38

Colorante más utilizado, absorbe la luz ultravioleta y emite luz verde

Answer 38

Fluoresceína

Question 39

Tipo de anticuerpo producido por animales inmunizados

Answer 39

Policlonales

Question 40

Tipo de anticuerpo sintetizado por líneas celulares inmortalizadas que se duplican continuamente

Answer 40

Monoclonales

Question 41

Técnica más antigua utilizada para identificar distribución de un antígeno dentro de células y tejidos; emplea un anticuerpo primario (fluorocromo) que reacciona con el antígeno, involucra solo un anticuerpo marcado

Answer 41

Inmunofluorescencia directa

Question 42

Técnica que en vez de conjugar un fluorocromo con un anticuerpo específico, se conjuga con un anticuerpo secundario dirigido contra el anticuerpo primario

Answer 42

Inmunofluorescencia indirecta

Question 43

Describe la capacidad de las moléculas monocatenarias de ARN o ADN para interactuar con secuencias complementarias

Answer 43

Hibridación

Question 44

La unión de la sonda de nucleótidos a la secuencia de ADN o ARN se realiza dentro de células o tejido; permite identificar secuencias de nucleotidos de 10 o 20 copias de ARNm o ADN por célula

Answer 44

Hibridación in situ

Question 45

Utilizada como una emulsión fotográfica que se coloca sobre un corte histológico para localizar material radioactivo en los tejidos

Answer 45

Autorradiografía

Question 46

Método para mejorar la resolución de la microscopia óptica mediante la implementación de una preparación específica que expande físicamente la muestra

Answer 46

Microscopio de expansión

Question 47

Tipo de polímeros expansibles

Answer 47

Hidrogeles Materiales muy absorbentes que se encuentran en pañales de bebés

Question 48

Pasos para preparar la muestra Méx

Answer 48

1) fijación 2) anclaje: marcar con sonda de interés e incubación con reactivo de anclaje expresando sitios de unión 3) gelificación: conversión de son en gel 4)homogeneización mecánica: romper células 5) expansión: agregar solvente, expansión 3D

Question 49

Expansión lineal de 4.5 veces, aumento de rango de resolución 60 - 70 nm

Answer 49

Microscopio de expansión iterativa (mexi)