Zaliczmy Flashcards
Przeciwciała monoklonalne
- jeden klon fuzjatow komórkowych limfocytów B i komórek szpiczaka
- identyczne pod względem
a) biochemicznym: ta sama klasa i typ
b) funkcjonalnym: to samo powinowactwo - wiążą się swoiście z jedną konkretną determinanta antygenowa
Powstawanie PM
-1) fuzja komórek szpiczakowych z limfocytami B o żądanej swoistości: powstaje hybrydom
2) zamysł: polaczenie “nieśmiertelnej” komórki nowotworowej z kom.B o znanej swoistosci
3) lim.B pozyskane że śledziony myszy po wcześniejszym zaszczepieni antygenem, przeciwko któremu chce się otrzymać przeciwciala
4) fuzja wspomagana przez substancje ułatwiające zlepianie błon komorkowych: glikol polietylenowy i lizolecytyna
5) hybrydowy hodowane w medium selektywnym. Niesfuzjowane kom.szpiczaka giną z powodu defektu metabolicznego, a limfocyty B nie mają w środowisku czynników wzrostowych więc też giną
Hybrydomy dzięki połączeniu mogą funkcjonować.
6) rozcieńczenie zawiesiny, poszczególne hybrydomy w oddzielnych naczynkach
7) proliferacja- powstanie przeciwciał monoklonalnych
Rodzaje PM
- poch. mysie - obcogatunkowe, są immunogenne dla człowiecza (szczególnie fragment Fc)
Utworzone przeciwciała korzystne dla człowieka:
- Chimeryczne- cz. zmienna pochodzi od myszy a cz.stała jest ludzka
- Humanizowane- części nazdzmienne pochodzą od myszy, cz.stala ludzka
Immunokoniugaty
- uzbrojone PM prowadzi do wzmocnienia funkcji efektorowych
- zastosowanie w klinice
- wyróżniamy:
a) radioizotopy: emitujące promieniowanie gamma- diagnostyka nowotworów
b) toksyny
c) leki
d) cytokiny
e) enzymy
Zastosowanie PM
Diagnostyka i terapia nowotworowa
Transplantologia
Terapia schorzeń autoimmunologicznych
Neutralizacja toksyn z użyciem PM np w leczeniu tężca
Badanie diagnostyczne laboratorium analitycznym testy ELISA I RIA większą powtarzalność wyników
Oczyszczenie różnych substancji z użyciem kolumn wypełnionych substancja oplaszczenje przeciwialami monoklanymi
Układ dopełniacza
Zespół kilkudziesięciu białek obecnych w osoczu, a także w innych płynach ustrojowych wraz z powiązanymi z nimi funkjonalnie licznymi receptorami i białkami regulatorowymi
Stanowi system białek osocza aktywowanych kaskadowo podlegających aktywacji C1-C4-C2-C3-C5…C9
W jego skład wchodzą bialkta aktywne enzymatycznie z których podstawowym jest KONWRRTAZA C3
Funkcje dopełniacza
Ważna rola w eliminacji drobnoustrojów w mechanizmach odporności wrodzonej i nabytej. Dopełnia antybakteryjne działa przeciwciał
- Opsonizacji i fagocytoza drobnoustrojów
- Cytoliza drobnoustrojów
- Stymulacja reackji zapalnych
- Stymulacja lim.B poprzez receptor CR2
Układ dopełniacza - produkcja i regulacja
Produkcja: hepatocyty oraz miejscowo makrofagi, limfocyty, kom. nabłonkowe przewodu pokarmowego, moczowoplciowego, płuc i mózgu
Regulacja: hormony płciowe i cytokiny: IFN gamma, IL-1 i IL-6
Układ dopełniacza aktywacja- droga klasyczna
- fragment Fc przeciwciała tworzy kompleks z antygenem i uzyskuje zdolność wiązania komponentu C1, co prawdziwi do sekwencyjnego włączania się dalszych składników
Układ dopełniacza aktywacja- droga lektynowo-mannozowa
Zaczyna się związaniem z powierzchnią patogenu czynnika MBL zastępuje on czynnik C1 drogi klasycznej Do innych aktywatorów tej drogi należą: 1. Białka surfaktantu A i D 2. Białko C reaktywne 3. Heparyna 4.DNA
Układ dopełniacza aktywacja- droga alternatywna
Zaczyna się spontaniczna aktywacja czynnika C3 na powierzchni patogenu. Drogę aktywują endotoksyny bakteryjne, różne struktury ściany komórkowej drobnoustroju oraz agregowane Ig (wszystko IgG, IgA, IgE ale poprzez Fab nie Fc!!)
Układ dopelniacza- końcowy etap
Końcowym etapem działania kaskady dopełniacza jest liza patogenu lub nośnika kompleksu immunologicznego
Może działa też na zasadzie detergentu usuwając fosfolipidy z powierzchni komórki np bakterii czy wirusów (otoczki lipidowe)
Towrzenie kompleksu atakującego błonę
- Wyłącznie reakcje niewymagajace aktywności enzymatycznych
- Powstanie kanałów powoduje wyyw z komórki jonow, ATP, substancji odżywczych i wielu innych związków
- Z drugiej strony natomiast do kolorki napływa woda, mogą się dostawać różne czynniki bakteriobójcze i bakteriostatyczne np lizozym oraz różne leki np antybiotyki
Składowe kaskady dopełniacza- funkcje
- Wiązanie patogenu
- Aktywacja enzymatyczna
- Opsonizacji
- Anafilaksja
- Liza patogenu
- Regulacja odpowiedzi
Aktywność biologiczną składników dopełniacza
C2a: rozszerzanie naczyń krwionośnych i zwiększenie ich przepuszczalności
C3a: anafilatoksyna i chemotkasja
C3b: adherencja immunologiczna- opladzczenie bakterii które będą fagocytowanir przez C3R-slava fagocytoza
C4a: anafilatoksyna
C5: anafilatoksyna i chemotkasja, agregacja granulocytów i zamknięcie światła naczyn
C5b, C6, C7: chemotkasja neutrofili
C5,C6,C7,C8,C9: tworzenie tuneli
Regulacja dopelniacza
Wymaga regulacja o czym świadczą przykłady patologii wywołane jego nadmierna aktywacja. W tym celu w osoczu i na powierzchni błon komórkowych znajduje się system białek regulujących działanie dopełniacza. czynniki te mają charakter drazktywunacy, a ich działanie polega zwykle na skróceniu rozpadu konwertazy C3, C5
Kontrola dopelniacza
- C1-INH- inhibitor C1r i C1s blokuje ich działanie proteolityczne
- DAF czynnik przyspieszający katabolizm. Występuje w formie zwiazanej z blona komorkowa. Kontroluje C4b2b
- H-czynnik kontrolujący drogę alternatywna przez C3b
- I-czynnik kontrolujący C4b
- MCP- błonowy kofaktor białkowy bierze udział w regulacji C3b i C4b
- CD59- bialko obecne na powierzchni większości komórek. Wiąże C8 i C9 hamując inkorporację do błony co zapobiega lizie komórki
Niedobory dopelniaca
Mogą prowadzić o nawracających chorob, ciężkich zakażeń bakteryjnych - brak KONWERTAZY C3
Powstawaniw chorób autoimmunologicznych jako efekt przewlekłych zakażeń
Układ dopelniacza a inne mechanizmy
- Wraz z aktywacja kaskady dopełniacza często aktyowaowana jest kaskada krzepnięcia krwi
- Aktywacja składowych dopelniacza nasila mechanizmy nieswoistej odpowiedzi immunologicznej: - chemotkasja granulocytów
- degranulacja bazofii i mastocytów
