Weefselkweek

Question 1

Geef de definitie van cel en weefselkweek.

Answer 1

Een techniek om cellen buiten het organisme in leven te houden met het behoud van celfunctie en vermogen tot differentiatie

Question 2

Geef een aantal voordelen van cellijnen.

Answer 2

• Milieu is te standariseren en manipuleren (pH,
  temp., osmotische waarden, etc)
• Reproduceerbaarheid neemt toe
• Direct effect van stoffen op cellen bestuderen
• Kunt levende cellen op elk moment bestuderen
• Homogenen celpopulatie bestaannde uit veel
  cellen
• Minder proefdieren

Question 3

Geef een aantal nadelen van cellijnen.

Answer 3

• Cellen in kunstmatig milieu
• Cellen gedragen zich anders in vitro dan in vivo
• Cellen van continue cellijn zijn getransformeerd
• Specifieke apparatuur nodig
• Steriel werken
• Hoge kosten

Question 4

Welke typen kweek zijn er?

Answer 4

weefselkweek, celkweek, orgaankweek

Question 5

Wat doe je bij weefselkweek?

Answer 5

Je kweekt meerdere type cellen, maar er zit geen 3D structuur in

Question 6

Wat doe je bij orgaankweek?

Answer 6

Hierbij houd je de 3D structuur van het orgaan intact en blijven de
histologische kenmerken ook behouden.

Question 7

Wat doe je bij celkweek?

Answer 7

Hierbij kweek je één type cellen en zie je dus geen verband met de cellen tot het
oorspronkelijke weefsel. Je hebt dus ook geen 3D structuur.

Question 8

Wat zijn de stappen om een primaire cellijn te maken?

Answer 8

Cellen in weefselverband -> desaggregatie -> losse cellen -> primaire weefselkweek -> monolaag -> splitsen -> primaire cellijn

Question 9

Welke 3 fasen heb je in kweek?

Answer 9

Lag, log en plateau

Question 10

Wat gebeurt er in de lagfase?

Answer 10

de cellen moeten nog even leren dat ze wel mogen
groeien

Question 11

Wat gebeurt er in de logfase?

Answer 11

In de log fase groeien de cellen exponentieel

Question 12

Wat gebeurt er in de plateaufase?

Answer 12

Er is te weinig ruimte, dus is er contact-inhibitie.

Question 13

Wat is contact-inhibitie?

Answer 13

Cellen scheiden signalen uit dat er geen ruimte meer is om te delen, hierdoor stopt de deling.

Question 14

Hoe ontstaat een continue cellijn?

Answer 14

Een primaire cellijn gaat naar een continue cellijn wanneer er cellen ontsnappen die mutaties hebben gekregen,
waardoor ze onsterfelijk zijn geworden.

Question 15

Welke soorten contaminaties heb je?

Answer 15

bacterieel, schimmel, gisten, mycoplasma

Question 16

Wat is een kenmerk van een bacteriële contaminatie?

Answer 16

een verandering in pH

Question 17

Wat is een kenmerk van een schimmel contaminatie?

Answer 17

draadvormige structuren en een troebel medium.

Question 18

Wat doet antibiotica in het medium?

Answer 18

dit voorkomt verspreiding van een contaminatie.

Question 19

Hoe sla je cellijnen op voor langere tijd?

Answer 19

In een vriezer met vloeibaar stikstof, ook crytoprotectant om waterkristallen te voorkomen

Question 20

Wat zijn de 4 kweekfactoren die je nodig hebt voor het milieu van de cellen?

Answer 20

substraat, temperatuur, medium + supplementen en pH en gasfase

Question 21

Wat is een substraat?

Answer 21

Dat waar de cellen op/in groeien

Question 22

Welke soorten cellijnen heb je?

Answer 22

Anchorage-dependent en suspensie cellen

Question 23

Wat hebben anchorage-dependent cellen nodig om te groeien?

Answer 23

Serum, zodat ze aan de bodem kunnen hechten.

Question 24

Wat is de ideale temperatuur voor je kweek?

Answer 24

lichaamstemperatuur = 37

Question 25

Wat is belangrijk voor het medium?

Answer 25

Dat het de natuurlijke situatie nabootst en dat de exacte samenstelling bekend is (ook al zit er toch serum in).

Question 26

Hoe vindt er gaswisseling plaats in vitro?

Answer 26

Tussen de lucht en de vloeistof (van het medium)

Question 27

Is de [CO2] juist hoger of lager bij je kweek?

Answer 27

Hoger, want de [CO2] in diepere weefsels is hoger dan gemiddeld

Question 28

Hoe wordt de pH gereguleerd bij kweek?

Answer 28

Door buffers toe te voegen.

Question 29

Wat doet EDTA?

Answer 29

Dit bindt calcium en andere divalente kationen.

Question 30

Wat doet trypsine?

Answer 30

Dit is een protease die celadhesie eiwitten verbreekt.

Question 31

Wat doet HRP?

Answer 31

Dit is een enzym dat een substraat om kan zetten tot een andere kleur, waardoor met blote oog te zien is of een cel wel of niet de receptor heeft.

Question 32

Hoe herken je gist in je kweek?

Answer 32

Deze cellen hebben verschillende groottes

Question 33

Hoe zorg je ervoor dat je cellen beter groeien na het splitten?

Answer 33

Splitten bij lagere confluentie of minder cellen per petrischaaltje.