Versuch 1 Flashcards
Wann wird Induktion gestartet?
Ende der log-Phase
Tags zur Aufreinigung
His-Tag
MBP
GST-Tag
Flag-Tag
Vorteil großer Tags?
Stabilisierung
Verbessern d. Löslichkeit
Tag zum Ak-Nachweis wenn kein spezifischer primärer Ak existiert?
myc-Tag
Polyklonales vs. monoklonales Serum: Senstitivität/Spezifität?
Polyklonal: höhere Sensitivität
Monoklonal: höhere Spezifität
Was sind Hybridome? Wozu genutzt?
B-Zellen fusioniert mit Krebszellinie
Herstellung cDNA für monoklonale Ak
Wie wird Expression in Abwesenheit von Induktion verhindert?
IPTG inhibiert T7-Pol
Was kann Proteinfaltung beeinflussen? In welchen Organellen?
Glycosylierung
Disulfidbrücken
in Golgi/ER
Was führt zum Transport zu ER? Welches Protein erkennt?
n-terminale Signalsequenz
SRP
Wie kann Glykosylierungsmuster nachgewiesen werden?
Mutationsansatz
Lectine (binden Zucker)
Glycosidase (verdauen Zucker)
Was ist in Elutionspuffer enthalten?
Imidazol
Wie können unlösliche Proteine löslich gemacht werden?
Chaotrope
Harnstoff
Bei welchem Startcodon beginnt prokariontische Ribosom?
Am ersten erreichbaren