Utilisation des microorganismes Flashcards
Fermentation alcoolique effectuée par
Levures
Espèces importantes pour la fermentation alcoolique
Saccharomyces cerevisiae
Principe de la fermentation alcoolique
Transformation glucides en éthanol et CO2 en absence d’oxygène
Fermentation alcoolique utilisée pour
Pain, bière, vin, etc
Étapes de la fermentation des fruits
1ère étape : fermentation alcoolique pour la production d’éthanol
2e étape : fermentation malolactique
Fermentation malolactique
Transformation de l’acide malique en acide lactique par la flore indigène (Règle générale : Fermentation malolactique accélère l’évolution d’un vin)
Types de fermentation lactique
- Fermentation homolactique
- Fermentation hétérolactique
Principes de la fermentation lactique
Transformation glucides en acide lactique par bactéries lactiques
Bactéries lactiques à savoir
- Streptococcus thermophillus
- Lactobacillus bulgaricus
Différence entre fermentation homolactique et hétérolactique
Homolactique : Génère de l’acide lactique
Hétérolactique : Production d’acide acétique, éthanol, CO2, acide lactique
Fonction - Streptococcus thermophilos pour la production du yogourt
Acidification du lait
Fonction du Lactobacillus bulgaricus pour la production du yogourt
Production de composés organoleptiques (bon pour le gout)
Croissance des bactéries lactiques inhibée par…
par l’acidité que la bactérie génère
Principe de la production du fromage
- La caséine (protéines du lait) forment des agrégats hétérogènes solubles
- La coagulation du lait correspond à une déstabilisation de cet agrégat de protéines qui deviennent insolubles :
La coagulation du lait correspond à une déstabilisation de l’agrégat de protéines qui deviennent insolubles : Peut se faire par…
a) Par voie fermentaire à l’aide de bactéries lactiques dans le lait
b) Par voie enzymatique à l’aide d’enzymes coagulantes, en particulier la présure (enzyme digestive nommée Chymosine extraite de l’estomac du veau).
c) Par augmentation de l’acidité
Principe du clonage
- Transférer du matériel génétique d’un organisme à un autre
- Possible car le code génétique est universel
- Consiste à réaliser des copies identiques d’un gène en plusieurs exemplaires
- Permet l’insertion d’un fragment d’ADN : ADN recombiné dans un vecteur permettant ainsi d’en obtenir plusieurs copies
Outils nécessaires pour le clonage
a) Un vecteur de clonage (plasmide, phage, virus, levure)
b) Enzymes de restriction (endonucléases)
c) ADN ligase
d) Cellule hôte
Vecteur de clonage pour clonage
- Molécule d’ADN dans laquelle on introduit le gène étranger d’intérêt.
- Capable d’accepter ADN étranger
- Réplication autonome
- Possède marqueurs de section
- Possède gènes de sélection
- Possède un polylinker → site multiple de clonage
Enzyme de restriction pour clonage
- Enzymes bactériennes qui reconnaissent des séquences spécifiques sur l’ADN
- Ils coupent l’ADN sur les deux brins au niveau de sites spécifiques
ADN ligase pour clonage
- Capable de lier de façon covalente deux molécules
- Relie le gène étranger (ADN recombiné) et le vecteur
Une cellule hôte pour le clonage
- Cellule dans laquelle on insère le plasmide recombiné afin qu’il se réplique → clone
- Souvent E.coli
Électroporation (nécessaire pour le clonage)
- Phase exponentielle de croissance
- Courant traverse membrane formant des pores sur les membranes → Fragilisation de la paroi
- Les vecteurs pénètrent par les pores des bactéries → Transformation
Types de sélection des clones intéressants
- Sur la base de la résistance aux antibiotiques du plasmide
- L’expression du gène de la B-galactosidase
Principe de l’expression du gène de la B-galactosidase
- IPTG : sucre induisant la transcription du gène LacZ
- Le gène LazZ code pour la B-galactosidase
- B-galactosidase clive le substrat X-Gal
- Le substrat X-Gal produit une substance bleue insoluble (colonies bleues)
- Si on introduit un ADN étranger au milieu du gène de la B-galactosidase, le cadre de lecture est décalé → B-galactosidase non active (colonies blanches).
- Ainsi, bactérie avec plasmide :
o Couleur blanche : Plasmide l’incorpore
o Couleur bleue : Plasmide n’incorpore pas l’ADN recombinant
Organisme transgénique
- Organisme qui contient de l’ADN recombinant intégré de manière stable (plante, animal ou microorganisme).
Acronyme OGM
- Organismes génétiquement modifiés
Différence organisme transgénique et OGM
Organisme transgénique : pour les animaux
OGM : pour les plantes ou microoganisme
ARN anti-sens
L’ARN anti-sens du vecteur recombinant bloque l’ARN d’une protéine pathogène.
Les applications de transfert de gènes
1) Médecine et pharmaceutique
2) Agriculture
3) l’industrie :
4) Environnement
5) Biopharmaceutique:
Est-ce que seul les plasmides peuvent être des vecteurs (clonage)?
Non, possible de l’utiliser avec plasmide, phage, virus, levure
