Tradução E Replicacao Celular Flashcards
Onde ocorre a tradução?
Ocorre no citoplasma pelos ribossomos livres e por ribossomos associados a superfície do RER.
Start códon
AUG - metionina
Fatores envolvidos na ligação do a.a do RNAt correspondente
aminoacil RNAt sintase especifica e ATP..
O que a aminoacil RNAt sinta-se faz?
Essa enzima tem que reconhecer o anticódon e o códon do determinado aminoácido.
Sítios do ribossomo
A – Entrada do aminoácido
P – Ligação peptídica
E – Saída do RNAt
Etapa de INICAÇÃO da tradução
Inicialmente, na subunidade menor do ribossomo irá se ligar o RNAt ligado a metionina, esse conjunto se liga na região do CAP do RNAm e se desloca até parear com o códon de início da tradução (AUG).
Só então vem a subunidade maior e disponibiliza o sitio A para a entrada do próximo RNAt-aminoácido.
Etapa de ELONGAÇÃO
Após a iniciação, corre a entrada dos diversos RNAt-
aminoácido correspondentes àquela fita de RNAm.
Isso acontece até chegar no Stop Códon
Término da tradução
Após a chegada do Stop códon, há a ligação do fator de liberação ao códon de terminação que
ativam a hidrólise do polipeptídeo do peptidil- RNA
Proteínas que corrigem a estrutura de proteínas terciárias mal enoveladas:
Chaperonas
Polirribossomos
Vários ribossomo traduzindo simultaneamente um mesmo rna
Fatores de início da tradução, qual a função?
Deixa o RNA circular para aumentar a produção de proteínas quando necessário
Proteassomo
Degradam proteínas (danificadas, erroneamente dobradas)
Mais específico que lisossomo
Ubiquitina: marcam proteínas que precisam ser degradadas (ubiquitina ligase)
Corpos de Lewy
Acúmulo de ubiquitina formam agregados que se prendem na parede de neurônios-> degradação por proteossomos -> demência
Quais são os elementos necessários e as etapas da PCR (reação em cadeia da polimerase)?
Elementos necessários:
DNA alvo: é a sequência de DNA que se deseja amplificar.
Primers: são pequenos oligonucleotídeos sintéticos que são complementares às regiões flanqueadoras do DNA alvo e servem como iniciadores para a amplificação.
Taq DNA polimerase: é uma enzima termoestável que é capaz de sintetizar novas fitas de DNA a partir dos primers.
Desoxinucleotídeos trifosfato (dNTPs): são os blocos de construção para a síntese de novas fitas de DNA.
Solução tampão: é uma solução que contém sais que ajudam a manter a estabilidade da Taq DNA polimerase e otimizam a eficiência da reação.
Etapas da PCR:
Desnaturação: o DNA alvo é desnaturado, ou seja, as duas fitas do DNA são separadas por aquecimento a uma temperatura de cerca de 94°C por alguns segundos a minutos, dependendo da região alvo.
Anelamento: a temperatura é reduzida para cerca de 50-60°C, permitindo que os primers se liguem (anelamento) às regiões flanqueadoras complementares do DNA alvo.
Extensão: a temperatura é elevada para cerca de 72°C, a temperatura ideal para a Taq DNA polimerase, que inicia a síntese de uma nova fita de DNA, utilizando os dNTPs como blocos de construção, a partir dos primers.
Repetição: as etapas de desnaturação, anelamento e extensão são repetidas várias vezes (geralmente de 25 a 35 ciclos), amplificando exponencialmente a quantidade de DNA.
PCR x Rt PCR
A principal diferença entre PCR (reação em cadeia da polimerase) e RT-PCR (PCR com transcrição reversa) é que a PCR amplifica diretamente o DNA, enquanto a RT-PCR amplifica o RNA por meio da transcrição reversa em cDNA (DNA complementar).
Na PCR, a amplificação é feita a partir de um template de DNA, utilizando primers que hibridizam (ligam-se) às sequências de interesse, permitindo a amplificação específica da sequência de DNA desejada.
Já na RT-PCR, o RNA é convertido em cDNA utilizando a enzima transcriptase reversa, que produz uma cópia complementar de DNA (cDNA) do RNA alvo. Em seguida, a amplificação é realizada como na PCR convencional, usando primers específicos que se ligam ao cDNA produzido.