Test 2 Flashcards
A quoi sert l’examen de la moelle osseuse
- Pour diagnostiquer - Établir un pronostic - Évaluer la réponse thérapeutique pour une variété de problème hématologique et non hématologique
Nommée les 2 compartiments principaux de la moelle osseuse
- Hématopoiétique 2. Vasculaire
Composition du compartiment hématopoiétique
- Comprend les cellules hématopoiétique et cellules stromales - moelle rouge hématopoiétiquement active - Moelle jaune hématopoiétiquement inactive
Composition du compartiment vasculaire
- artère nutritive - veine - artérioles - sinus
Plateau stérile devrait contenir :
- Différentes seringues et aiguilles - anesthésie locale (lidocaine ou xylocaine) - antiseptique (providione, alcool) - compresse de gaz stérile, pansement stériles, champs stériles troués - Trocart ( Jamshidi)
Chariot de laboratoire devrait contenir:
- Lames et lamelles - Tubes a essai avec anticoagulants -Boîtes de pétries et pipettes pasteur -Gants - Nécessaires pour culture - Crayon
Pourquoi une technologiste doit être présente lors de la procédure:
- S’assure d’un bon prélèvement, richesse du spécimen. (présence granule) -S’assure que le spécimen est placé dans les bons tubes de prélèvement. - Prépare les frottis
Cellularité de la moelle osseuse rouge a la naissance et chez l’âge adulte
- 90% a la naissance - 50% chez les adultes
Quelle sont les endroits de prélèvements des spécimens de moelle osseuse
- Crête iliaque postérieure supérieure après l’adolescence - Parfois chez l’adulte, le sternum et la crête iliaque antérieur - enfants moins de 2 ans la surface antéromédiale du tibua - Parfois corps vertébraux lombaire L1 et L2 chez enfants
A quoi sert une ponction de moelle osseuse ?
Retirer le liquide la moelle et les cellules de la cavité médullaire
Résultats d’une biopsie de la moelle osseuse
- bouchon (carotte) de tissu contenant de l’os et de la moelle, en préservant l’architecture tridimensionnelle du tissus
Combien de liquide est aspirer lors d’un prélèvement
Minimum de 2 ml avec une aiguille de calibre 18
Complication de la biopsie et de l’aspiration de la moelle osseuse
- douleur 2. saignement localisés 3. infection de la plaie
Après la procédure de biopsie de la moelle osseuse, que doit faire le patient
- se couche sur le site - le site devrait être réévalué dans 15-30 mins pour tout saignement
Après la procédure de biopsie de la moelle osseuse, que doit faire patient avec thrompobénique
- application d’une pression sur site biopsie - couchés sur le dos pendant 20 a 30 min
Combien d’échantillon est nécessaire pour évaluer la morphologie de la moelle osseuse
1,0 a 1,5 ml
Comment fait-ton pour déterminer si la moelle osseuse est présent dans l’échantillon
- 0,5 ml est placée sur une lame de verre et examinée - présence e particule de graisse, granule, morceau d’os
Pourquoi l’organisation des approvisionnements et la rapidité de réalisation des frottis de la moelle osseuse sont essentielle lors de l’aspiration ?
l’aspiration coagule rapidement
Comment sont fait les empreintes de la biopsie de la moelle
- en touchant doucement ou en roulant le tissus plusieurs fois sur 2-4 lames
Après avoir réaliser les empreinte de la biopsie de la moelle, dans quoi est immergé l’échantillon ?
fixateur de formol tamponné a 10%
Que fesont-nous avec une biopsie de la moelle fixé
soumise a un traitement histologique
le but de la biopsie de la moelle sont :
- diagnostic primaire - les étapes de la maladie
Lorsque la biopsie de la moelle est réaliser pour connaitre étape de la maladie, quelle type de biopsie est recommandées
- Biopsies bilatérales
Différentiel de la moelle osseuse
500-1000 cellules
Quand l’empreinte de la moelle est une source utilise
- moelle est très hypocellulaire - aspiration ne peut être obtenu (dry tap) - la morpho est moin bonne par exemple
Qu’est-ce qu’est le rapport M:E
Rapport myéloide/érythroide
A quoi sert le M:E
indiquer des changements significatifs dans la cellularité des cellules myéloides et érythroide
Une faible rapport M:E indique quoi ?
une hyperplasie érythroide ou une hypoplasie myéloide
Si la cellularité de la moelle est augmenté, une faible rapport M:E indique quoi ?
hyperplasie érythroide ou une érythropoièse inefficace
Si la cellularité de la moelle est diminuer, une faible rapport M:E indique quoi?
hypoplasie myéloide
Valeur de référence pour rapport M:E
2 a 4:1
Quand une empreinte est effectuer ?
- lorsque l’aspiration de la moelle ne peut être obtenu (dry tap) - lorsque l’aspiration médullaire est dépourvue de granule et hémodiluée
Expliquer la condition dry tap
condition secondaire a une fibrose sous-jacente (myélofibrose, leucémie a tricholeucocytes)
Les empreintes de la biopsie médullaire sont la seul source de quoi ?
- étude des détails cellulaires et la séquence de maturation
Les réserves de fer de la moelle osseuse sont sous quelle formes ?
- ferritine - hémosidérine dans les histiocytes - érythroblaste
Sous quelle forme le fer de réserve peut être visualisé sans colorant de fer spécifique
- sous la forme d’hémosidérine
Quelle coloration est utilisé pour le fer
coloration au Bleu de prusse
A quoi sert l’évaluation des réserves de fer de la moelle
- diagnostic de certaines anémies - tels que les anémies réfractaires et dysérythropoiétique
Nommez les études auxilaires les plus couramment utilisées pour la moelle osseuse
- cytométrie de flux - cytogénétique conventionnelle - hybridation fluorescente in situ (FISH) - études génétique moléculaire - colorations cytochimiques
Utilité de la cytométrie de flux
- établir la présence de clonalité - diagnostiquer et classifier les lymphomes malins et les leucémies - détecter une maladie résiduelle minime après chimiothérapie
Utilité de la cytogénétique
Analyse des chromosome, dans l’étude des anomalies hématopoiétique - effectuer sur échantillon frais
Utilité de la génétique moléculaire
- Pour anomalie hématopoiétique
Que veut dire PCR
polymerase chain reaction - ACP(fr) =réaction en chaîne par polymérase
Utilité de la méthode PCR de la génétique moléculaire
- démontrer la clonalité et lignée cellulaire - identifier des réarrangements génétiques spécifique - détecter maladie résiduelle minimale
Qu’elle types d’échantillons sont préférable pour le PCR
- échantillon frais et congeler - échantillon fixés au formol ou incorporés dans la paraffine sont acceptables
Étude supplémentaire de la moelle avec leurs anticoagulant utilisé
- Cytoflurimétrie (EDTA) 2. Cytogénétique (héparine sodique) 3. Biologie moléculaire (EDTA) 4. Culture (milieu de culture)
Que veut dire FISH
Fluorescence in situ hybridization
Sur quelle types d’échantillon peut être faire la méthode de FISH
- sur lames d’aspiration 2.les empreintes de carotte 3. Sections de biopsie
Pourquoi les colorations spéciales sont utilisées en laboratoire d’hématologie
- fournir une classification précises et évaluation de l’étendue de la maladie. 2. pour aider au diagnostic
4 étapes des colorations spéciales:
- Fixation (fixe élément sur lame); doivent être délicate pour ne pas détruite élément 2. Réaction (par réaction cytochimique ou enzymatique) 3. Contre coloration (faible densité pour pas masquer réaction principale) 4. interprétation des résultats (fait par pathologiste)
Défini les estérases leucocytaires :
Groupe d’ezymes qui catalysent l’hydrolyse des esthers
2 types d’estérase leucocytaires
- Estérases spécifiques (chloroacétate estérase) 2. Estérases non spécifiques (alpha- naphtyl estérase)
Ou retrouve-ont les estérases spécifiques
granulocytes neutrophiles
Ou retrouve-ont les Estérases non spécifique
- monocytes 2. mégacaryocytes 3. plasmocyte
Substrat des estérases spécifique et non spécifiques
- Estérase spécifique: Naphtol-AS-D-chloroacétate 2. Estérase non-spécifique: alpha-naphtyl acétate ou alpha-naphtyl butyrate
TdT
Déoxynucléotidyl transférase terminal
L’activité des déoxynucléotidyl transférase terminal est augmenté dans 90% des leucémies lymphoblastiques aigues. Vrai ou faux
Vrai
Dans la leucémie myéloide chronique, cette réaction est négative
Phosphatase Alcaline Leucocytaire
La réactions obtenues avec les estérases non spécifiques pour les monocytes
Réaction négative (inhibé par NaF)
Les corps d’Auer sont présent dans qu’elle type de leucémie
Leucémie myéloblastique
Les corps d’Auer sont coloré par quelle coloration
Noir soudan B
Nommée les types de colorations
- Myéloperoxydase
- Noir soudan B
- Estérase chloroacétate et alpha naphtyle estérase (non spécifique)
- Acide periodique de Schiff
- Phosphatase alcaline leucocytaire
- Phosphatase acide et phosphatase acide résistante au tartrate (TRAP)
- Déoxynucléotidyl transférase temrinal (TdT)
- Bleu de toluidine
Lequelle des colorations est faite au laboratoire
Phosphatase alcaline leucocytaire
TRAP
Phosphatase acide et phosphatase acide résistante au tartrate
Utilité de la cytofluorimétrie
La cytofluorimétrie permet la détection et mesure les propriétés des cellules et permet leur identification et classification
Avantage de la cytofluorimétrie
- permet de remplacé l’immunohématologie faite à un microscrope fluorescent en mesurant un grand nombre de cellule en suspension. Le résultat obtenu est donc quantitatif. - une sensibilité de détection très efficace
Types de spécimens analyser par la cytoflurimétrie
- Sang • 5 mL prélevé d’un tube EDTA ou d’héparine • Le spécimen doit être à la température de la pièce et analysé avant 24H 2. Moelle osseuse • 1 mL prélevé d’un tube EDTA ou d’héparine • Le spécimen doit être à la température de la pièce et analysé avant 24H 3. Liquide corporels • On utilise le plsu grand colume possible • Le spécimen doit être à 4⁰C et analysé avant 24H 4. Tissus/biopsies/ganglions • Préférablement un morceau plus petit que 0,5cm3 • Le spécimen doit être 4⁰C et analysé avant 24H
Forward et Side Scatter
Lorsque le alser interragit avec une particule/cellule, la lumière se fait diffracté et cela permet d’identifier et de classifier la cellule car la diffraction est en lien directe avec les propriétés cellulaires
Forward light scatter
La lumière diffracté vers le devant est relié à la grosseur des particules(volume, taille). Les grosses cellules produisent plus de forward scatter que les petites.
Side light scatter
- La lumière diffracté à un angle de 90⁰ nous informe sur la complexité et granularité interne de la cellule. - Les cellules avec beaucoup de granules dans leurs cytoplasme produisent donc plus de side scatter
Utilité pour le VIH et anomalies malignes
. Les anomalies obsérvés lors d’une infection au VIH sont principalement vu par un déficit quantitatif et qualitatif des lymphocytes T portant le marqueur CD4, qui est la cible principale du virus. - On pourrait donc dire qu’un suivi du rapport T4/T8 donne une indication sur l’évolution de la maladie
Les estérase non spécifiques sont inhibés par
le fluorure de sodium (NaF) dans les monocytes
Résultats de la coloration phosphatase alcaline leucocytaire
0: négative pas de précipité ou coloration
1: quelques granulations positives, coloration diffuse
2: nombre modéré de granulations, coloration diffuse
3. nombreuses granulations agglutinées, coloration très fortement positive
