TEMA 4: Aplicación De Técnicas De Corte Flashcards
¿De qué factores depende la elección de un microtomo?
- Preparación del tejido (fresco/fijado, incluido/no incluido).
- Método de tinción a emplear.
- Idoneidad del resultado (balance de tiempo, presupuesto y resolución).
- Instrumento disponible en el laboratorio (depende del grupo de investigación).
Problemas y resolución: Cuchillas.
Limpiarlas siempre antes de usar con xileno o alcohol absoluto.
Las cuchillas de un solo uso presentan irregularidades.
Problemas y resolución: Baño de flotación.
Usar agua destilada porque el agua corriente presenta depósitos cristalinos que pueden dañar la muestra.
Problemas y resolución: Burbujas.
Introducir el portaobjetos lentamente en el baño de flotación y de manera perpendicular.
Problemas y resolución: Desprendimiento de secciones.
Lavar con jabón y agua destilada el portaobjetos.
Problemas y resolución: Sellado de bloques.
Sellar la superficie con parafina líquida impide que los tejidos se sequen y se puedan utilizar tiempo más tarde.
Problemas y resolución: Cortes en las secciones.
Cortar las muestras de manera uniforme y lentamente y se emplea la manivela.
Adherentes para los portaobjetos:
- Gelatina 1% —> Secciones gruesas y trabajos con parafina.
- Poli-L-lisina 0,1% —> Secciones delgadas.
- Pegante de caseína 10% —> Secciones parafina.
- Portaobjetos superfrost —> Secciones finas congeladas de tejido fijado o fresco.
¿Para qué sirve: Gelatina 1%?
(Adherentes para los portaobjetos) Para secciones gruesas y trabajos con parafina.
¿Qué adherente se utilizará para secciones gruesas y trabajos con parafina?
Gelatina 1%
¿Para qué se usará: Poli-L-lisina 0,1%?
(Adherente para los portaobjetos) Secciones delgadas.
¿Qué adherente se utilizará para secciones delgadas?
Poli-L-lisina 0,1%
¿Para qué sirve: Pegante de caseína 10%?
(Adherente para los portaobjetos) Secciones parafina.
¿Qué adherente se utilizará para secciones en parafina?
Pegante de caseína 10%
¿Para qué servirá: Portaobjetos superfrost?
(Adherente para los portaobjetos) Secciones finas congeladas de tejido fijado o fresco.