Tema 1: Concepto y tecnicas Flashcards
En q consiste, q conclusiones podemos sacar y que tecnicas se usan en la estrategia de:
CORTAR
Se usan tecnicas geneticas o moleculares.
Podemos concluir si el elemento eliminado es NECESARIO para la funcion estudiada, pero no informa de si es SUFICIENTE
Funcion de pepe en el grupo, cuando esta pepe el amigo se anima, luego pepe es NECESARio pero no SUFICIENTE
Si no esta no hay funcion, luego es necesario, pero no podemos decir q la produzca.
En q consiste, q conclusiones podemos sacar y que tecnicas se usan en la estrategia de:
PEGAR
Consiste en estimular mediante tecnicas neuroanatomicas, reproduciendo la act. neural (estim. magnetica, electrica, quimica, transgenesis…)
Podemos concluir sobre la SUFICIENCIA del elemento, pero no sobre su NECESIDAD en la funcion estudiada
En q consiste, q conclusiones podemos sacar y que tecnicas se usan en la estrategia de:
PINTAR
Consiste en visualizar o registrar mediante tecnicas de neuroimagen (NEUROFISIOLOGICAS).
Permite obtener correlaciones y no relaciones causales.
Registro electrico, metabolico, de expresion genetica..
Si pepe no se mueve ye sta callado, no debe ser el el q genera el buen rollo
TECNICAS GENETICAS/MOLECULARES
- Southern blot
- Northern blot
- PCR
- Enzimas de restriccion
- Electroforesis
TECNICAS GENETICAS/MOLECULARES
Southern blot, northern blot y western blot
Southern blot: identificar/marcar las secuencias de ADN que forman los genes
Northern blot: igual, pero para ARN
Western blot: identificar cadenas de Aa
TECNICAS GENETICAS/MOLECULARES
Enzimas de restriccion
Enzimas que cortan para conseguir fragmentos
TECNICAS GENETICAS/MOLECULARES
Electroforesis
Separar distintas moleculas de ADN. Generamos campo eléctrico, el ADN se desplaza xq tiene carga.
TECNICAS GENETICAS/MOLECULARES
Oligonucleoticos antisentido
*Corta - knock out
Bloquear la sintesis de una proteina mediante cadenas modificadas de ADN o ARN que se unen a moleculas de ARN que son destruidas por enzimas.
Sirve para aplicar el corta, se usa una sec. de nucleotidos q se unen al adn/arn, y destruye esa zona, impiden q ese gen se exprese, la proteina no se sintetiza, el gen no se activa.
TECNICAS GENETICAS/MOLECULARES
PCR
Permite ciclos repetidos de desnaturalizacion y reasociacion para amplificar el numero de copias de sec. de ADN gracias a las polimerasas.
Desn + reasociacion.
Se usan enzimas de bacterias termales q aguantan altas temp.
Como se hace un animal transgenico
- Insertar trozo de ADN modificado
Lo podemos insertar en el ovulo (cabras, ovejas) o con unv ector viral (ratones). - Las celulas con ese ADN las inyectamos en la blastula. Tenemos q buscar cepas buenas reproductores q tengan esperanza d vida larga
- Las quimeras son animales con celulas modificadas y otras qno.
Ahora nos interesan las quimeras q tienen modificados los gametos (ovulos y esperm.) - Cm la modificacion esta en un alelo, los cruzamos con un “wild type”, quimera + salvaje, hetero * hetero acabara dandonos homocigoticos.
Asi obtenemos camadas transgenicas.
ANIMALES TRANSGENICOS
KNOCK OUT
Es de hacer corta. Indecible (farmacologico, resversible) o especifico de zona (hipocampo)
Se usan los oligonucleotidos antisentido de antes
ANIMALES TRANSGENICOS
KNOCK IN
La sobreexpresion.
Inducibles o esp. zona
ANIMALES TRANSGENICOS
PINTA
Usando la medusa, PARA IDENTIFICAR GENOTIPO.
Expresion genica mediante hibridacion in situ (ARN), se jutna y no s dice dnde esta un gen xq brilla, fluorescencia.
Knock in marcador: GFP, medusa.
Técnicas neuroanatomicas, que podemos hacer
CORTA
A) Lesion permanente
B) Inactivacion reversible
C) Estimulacion - pega
D) Visualizacion /registro (pinta)
Tecn. Neuroanatomicas
Corta - Lesion permanente
Mecanicas (ablacion/aspiracion)
Electroliticas (radiofrecuencia)
Cauterizacion
Criogenicas
Químicas (excitotoxicas)- cuando no sabemos si la neurona es la causante o sirve para pasar info. Daña selectivamente los somas.
