Técnicas histológicas Flashcards
Etapas de la preparación del tejido
1ª Obtención de la muestra
2ª Fijación
3ª Inclusión
4ª Corte
5ª Coloración, montage y observación en lámina de vidrio
1ª Obtención de la mTuestra
Sacamos una muestra del paciente, que puede estar vivo o no.
Biopsia: tejido vivo
Autopsia: tejido muerto
Necropsia: tejido necrosado/podrido
2ª Fijación
La fijación depende de que desea estudiar en la muestra y depende del microscopio
(la sustancia química puede reaccionar con el tejido)
Función: Conservar las estructuras de la muestra, evitar la autólisis, abolir el metabolismo celular e impedir la degradación enzimática.
Fijación química:
M.O: Formaldehído 10%
M.E: Glutaraldehído 2-2,5% para proteínas
Tetroxido de Osmio 1% para lípidos
Metales pesados para membranas
Fijación física:
Calor y frio
3ª Inclusión
La etapa de inclusión es incluir en la muestra algo que permita hacer un corte delgado (5 a 15um).
Sustancia utilizada: Parafina
Pero no es posible utilizar parafinas para estudiar lipidos porque es una sustancia apolar como los lipidos y semejante disuelve semejante, puede ser por congelación.
desidratación??
4ª Corte
La muestra se coloca en una maquina llamada micrótomo.
Se utiliza una cuchilla de acero (lamina de aço).5
5ª Coloración
Depende de la estructura que va a ser estudiada.
Más utilizado: H y E
H y E
Hematoxilina: morada - básica - tiñe estructuras basófilas
Eosina: rosa- ácida - tiñe estructuras acidófilas
Ejemplo: Nucleo: acido - basofilo - hematoxilina
Otros basicos y acidos
ejemplos de colorantes ácidos y básicos usados en histología, excepto hematoxilina y eosina:
Colorantes Ácidos:
Anaranjado G: Se une a proteínas básicas, utilizado en tinciones tricrómicas.
Ácido pícrico: Se usa en la tinción de Van Gieson para fibras de colágeno (amarillo).
Fucsina Ácida: Para fibras musculares y citoplasma. Parte de la tinción tricrómica de Masson.
Colorantes Básicos:
Azul de Toluidina: Tiñe estructuras ácidas (como ácidos nucleicos) de azul y puede mostrar metacromasia.
Azul de metileno: Se une a ácidos nucleicos, utilizado en tinciones rápidas y de rutina.
Verde de metilo: Usado en tinciones tricrómicas para teñir el núcleo de verde.
Tecnica PAS
Acido Peryodico-Reactivo de Schiff
Para sustancias neutras.
Tiñe Hidratos de Carbono
Rosa Fucsia
Tiñe membranas plasmaticas
Sudan
Lipidos.
Rojo: Triglicerides
Negro: lipoproteínas (vaina de mielina)
Impregnación argénica
Fibras reticulares
Se utiliza metais pesados (argenio)c
