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biocel se pasa si o si > Técnicas > Flashcards

Técnicas Flashcards

1
Q

clasificación de microscopios y diferencias

A
  • ópticos: tienen su fuente luminosa de luz blanca

- electrónico: fuente de iluminación un haz de electrones

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2
Q

que es aumento y que tipos hay

A

es la magnificación que logran los equipos

40x, 100x, 400x

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3
Q

que es nitidez

A

esta relacionada con la resolución

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4
Q

que es la resolución

A

la distancia mínima a la cual debe estar un equipo para identificar dos puntos independientes

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5
Q

cual es el rango del tamño entre las celulas

A

micrómetros

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6
Q

cuanto mas juntos esten 2 puntos independientes, la resolución será:

A

mayor

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7
Q

partes del microscopio optico

A

lente ocular, lente objetivo, condensador, diafragma, platina, tornillos macro y micrometro, revolver, foco, tubo y base inferior

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8
Q

que hace el lente ocular y el objetivo

A
  • lente ocular: capta y amplifica imagenes dadas por el lente objetivo,
  • lente objetivo: amplifica las imagenes, pueden haber secos y de inmersión
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9
Q

que hace el condensador

A

concentra los haces luminosos sobre la preparación

-permite aumentar o disminuir la cantidad de luz que va a incidir

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10
Q

diafragma

A

regula la cantidad de luz que entra en el condensador

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11
Q

los responsables de mejorar el aumento de nuestras muestras son:

A

el lente ocular y el objetivo

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12
Q

que tipo de imagen obtenemos con el microscopio

A

imagen real, invertida y aumentada

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13
Q

lente ocular

A

donde posamos la vista, “x” es el aumento que presenta el lente

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14
Q

lente objetivo estan insertos en

A

un revolver, lo que permite elegir el objetivo donde queremos mirar nuestras muestras

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15
Q

sistema de amortiguación

A

es un sistema de protección del lente objetivo

-esta parte se hundirá cuando acerquemos mucho platina al objetivo

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16
Q

tipos de lentes objetivo

A
  • secos, que no utilizan ninguna ayuda para conducir los haces de luz
  • inmersión, el aceite de inmersión capta el 100% de los haces de luz, dando una mejor resolución y máximo aumento
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17
Q

poder de resolución

A

capacidad para distinguir separadamente 2 puntos muy cercanos entre sí

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18
Q

límite de resolución

A

distancia mínima que existe entre 2 puntos para verlos independientes

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19
Q

la resolución y el límite de resolución son

A

inversamente proporcionales

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20
Q

el poder de resolución del microscopio electronico de transmisión

A

2 Armstrong, esta aumentado en 1.000.000 la resolución del ojo humano

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21
Q

relación de longitud de onda con el poder de resolución

A

mientras menor sea la longitud de onda, mejor será la resolución

22
Q

la longitud de onda esta relacionada directamente

A

con la fuente de iluminación

23
Q

la apertura numérica es

A

la capacidad que tiene para captar los haces de luz o de electrones
-es el indice de refracción multiplicado por el seno del ángulo (N x sen a)

24
Q

la relación entre apertura numérica y resolución es

A

directamente proporcional

25
Q

con el aceite de inmersión

A

tenemos nuestra mejor resolución

26
Q

microscopio electrónico de transmisión (MEC)

A
  • mayor resolución
  • utiliza imanes qu permiten conducir los hacees de electrones
  • se detectan los electrones transmitidos
27
Q

en MET se obtienen

A

regiones electrodensas y electroclaras, relacionada directamente con la cantidad de electrones que va a incidir

28
Q

en electroclaras

A

hay transmisión de electrones

29
Q

en electrodensas

A

se genera sombra porque no hay transmisión de electrones

30
Q

microscopio electrónico de barrido (SEM)

A

da imagenes de 3 dimensiones

  • haz luminosos de electrones
  • tiene detectores de electrones
31
Q

diferencia microscopio optico y electronico

A
  • optico: muestras vivas

- electronico: muestras muertas

32
Q

en SEM

A

se detectan electrones secundarios

  • zonas mas planas van a tener menor cantidad de electrones
  • zonas más 3D más electrones
33
Q

procesamiento histológico para lograr la tinción

A

1) Obtención de la muestra
2) Fijación: en formalina para detener procesos (evita proteólisis o degradaciones)
3) Deshidratación y aclaramiento: remover el exceso de formalina
4) Impregnación en parafina fundida
5) Inclusión de parafina, cuando la parafina se solidifica

34
Q

diferencia entre deshidratación y aclaramiento

A
  • deshidratación: sacarle todo el agua y reemplazarla por formalina
  • aclaramiento: se sacan excesos, es como un lavado previo para que la muestra no rechaza el paso siguiente de parafina
35
Q

tinción hematoxilina/eosina

A

celulas incoloras se les da tipo de contraste, para visualizar el nucleo y el citoplasma

36
Q

hematoxilina

A

es un colorante, que se prepara en presencia de metales

37
Q

con hematoxilina y metales se forma un complejo llamado

A

“hemalumbre”, que es catiónico con características básicas

38
Q

hematoxilina tiñe

A

los grupos fosfatos del ADN, quedando purpura o morado el núcleo
-debido a que los grupos fosfatos tienen carga negativa, el complejo hemalumbre va a precipitar en estos lugares

39
Q

eosina se utiliza

A

como contraste para distinguir el citoplasma del nucleo

40
Q

eosina tiene

A

grupos carboxilicos, que dan caracteristicas acidas

41
Q

eosina es afin

A

a grupos aminos de las proteinas citoplasmaticas

42
Q

blastocistos son

A

celulas pluripotenciales: con la capacidad de diferenciarse en 3 líneas germinales

43
Q

celulas reprogramadas IPS cells

A

celulas pluripotenciales inducidas, que despues pueden diferenciarse

44
Q

como se hizo el experimento de IPS cells

A

a partir de fibroblastos adultos de la piel humana, los reprogramo para expresar factores de transcripciones que estan presentes solo en celulas embrionarias

45
Q

imnunohistoquímica e inmunofluorescencia

A
  • identificar un tipo de especifico de proteina
  • basada en la utilización de anticuerpos
  • anticuerpo va a tener una porción variable que es la que va a reconocer nuestro antigeno y una porcion constante
46
Q

Inmunohistoquímica

A
  • es indirecta
  • utilización de anticuerpo primario para unirse a proteina de interes
  • este anticuerpo es reconocido por un anticuerpo secundario con enzima marcadora (peroxidasa o fosfatasa alcalina)
  • en presencia de sustratos adecuados producen precipitados colorados qu permiten identificar el complejo anticuerpo-anticuerpo
  • podremos ver el lugar especifico de presencia de proteina
47
Q

Inmunofluorescencia

A
  • es directo

- utilización de anticuerpo marcado con colorante fluorescente para que se una a proteina de interes

48
Q

mecanismo de inmunofluorescencia

A

el fluorofosforo que esta unido al anticuerpo, se excita y emite fluorescencia que sera captado por microscopio de fluorescencia

49
Q

inmunofluorescencia vemos de color

A
  • verdes: las neuronas
  • rojo: celulas de Schwann
  • azul: fluoroforo, que se intercala en el DNA (tinción DAPI)
50
Q

proteina fluorescente verde (GFP) se encuenta naturalmente en

A

medusa que sufre modificaciones postraduccionales que le otorgan fluorescencia

51
Q

GFP es codificada

A

de forma normal por uin solo gen que puede clonar e introducir en otras especies mediante ingeniería genética

biocel se pasa si o si (5 decks)

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