Tecnica histologica

Question 1

¿Que es la técnica histologica?

Answer 1

Es un conjunto de pasos a seguir para la obtencion de preparados histólogicos aptos para su estudio mediante el microscopio óptico

Question 2

Mencione los pasos en orden.

Answer 2

1. Obtención del material
2. Fijación
3. Deshidratación
4. Aclaración
5. Inclusión en parafina
6. Preparación del tejido
7. Corte
8. Colocación sobre portaobjeto
9. Desparafinización
10. Hidratación
11. Coloración
12. Deshidratación
13. Aclaración
14. Coloración de cubreobjetos

Question 3

Biopsia

Answer 3

Tomar un tejido de un ser vivo.

Question 4

Necropsia

Answer 4

Se extrae tejido de un cadaver.

Question 5

Autopsia

Answer 5

Estudio analitico y sistematico completo, macroscópico y microscópico de los órganos, aparatos y sistemas de un cadáver. Se realiza para establecer causas de muerte.

Question 6

¿Como se obtiene el material?

Answer 6

Mediante biopsia, necropsia o autopsia.

Question 7

¿Qué es la fijación?

Answer 7

Es un proceso físico químico complejo mediante el cual se mantiene a las estructuras orgánicas en el estado más parecido al que poseían en vida, este evita la destrucción o lisos celular.

Question 8

¿Cuáles son los objetivos de la fijación?

Answer 8

1. Mantener las estructuras en el estado mas parecido al que poseían in vivo.
2. Evitar la lisis celular y la proliferación bacteriana.
3. Dar cierta solidez o dureza al tejido o material.

Question 9

Diga los tipos de fijadores.

Answer 9

1. Físicos
2. Químicos
3. Mezclas fijadoras

Question 10

Fijadores físicos:

Answer 10

• Por ebullición.

- Por congelación: bajas temperaturas de -190Cº a -70Cº . (Nitrógeno liquido, dióxido de carbono)

Question 11

Fijadores químicos:

Answer 11

• Soluciones simples como alcoholes. (etanol o metanol)
• Formol al 10%: Es una solución de aldehido fórmico al 40% en agua destilada.
  De esta solución se toman 10 ml y se le agregan 10 ml de agua destilada. MAS USADA.

Se puede agregar a esta acetato de calcio, el que evita la oxidación del aldehido fórmico o ácido fórmico, el que perjudica la fijación.

El formol se puede disolver al 10% en buffer de fosfato en lugar de agua destilada para mantener el PH a 7.4.

Question 12

Mezclas fijadoras:

Answer 12

Se usan diferentes fijadores en una mezcla para facilitar la fijación de ciertas estructuras. Ej. liquidos de Boutin, Zenker etc.

Question 13

Relación del volumen del tejido al fijarse con el volumen del fijador:

Answer 13

• Trozos deben ser de un espesor no mayor de 0.5 mm.

- Para buena fijación la relación volumen del tejido - volumen del fijador sea 1/40.

Question 14

Tiempos de fijación:

Answer 14

• Dependen del tejido, volumen y el fijador usado.
• Cuando se usa formol las piezas pequeñas requieren algunas horas y ya a las 24 horas se fijan bien.
• Una buena fijación se aprecia en el corte ya preparado.

Question 15

Lavado:

Answer 15

Después de la fijación el tejido debe ser lavado con agua u otra sustancia que eliminen restos de fijadores especiales.

Question 16

¿Qué es la deshidratación?

Answer 16

Se coloca la muestra en alcoholes de concentración creciente eliminar el agua que contenga ya que la parafina no es miscible con agua.
- Se utiliza etanol 70%, 80%, 96% y 100%.

Question 17

¿Qué es la aclaración?

Answer 17

Son solventes que producen transparencia en los tejidos ademas de solubilizar la parafina.
- XILOL, toluol, acetona, benceno.

Question 18

Inclusión en parafina:

Answer 18

• La parafina es una mezcla de hidrocarburos saturados.

- Se incluye la muestra en parafina a 60 Cº y luego se enfría bruscamente.

Question 19

Preparación del taco:

Answer 19

Se corta un trozo de parafina que contiene la muestra en forma de pirámide truncada de manera que la misma quede sobre la base menor.
Se pega la base mayo un taquito de madera que servirá para sostenerlo en el micrótomo.

Question 20

Corte:

Answer 20

Se realiza mediante el uso del micrótomo, este permite cortar el tejido después de fijarlo frío (dióxido de carbono).
- Cortes deben de tener un espesor de 4 a 100 um o mas

Question 21

Colocacion sobre portaobjeto:

Answer 21

Los cortes se colocan en agua tibia para que se extiendan y luego se recogen con un picel y se los extienden en el portaobjeto y se dejan secar.

Question 22

Desparafinización:

Answer 22

Se debe extraer toda la parafina del tejido y aclararlo nuevamente.
- XILOL

Question 23

Hidratación:

Answer 23

Se debe hidratar el tejido ya que la mayoría de los colorantes son de base acuosa.
Para ello se coloca el portaobjeto en soluciones de etanol decrecientes.
- Etanol 100%, 96%, 80%, 70% y agua destilada.

Question 24

Coloración:

Answer 24

• Tienen un grupo que les confiere el color: cromoforo y otro que lo fija: auxocromo.

Question 25

Los colorantes se los clasifica en:

Answer 25

• Básicos ( molécula de sal que colorea es la base, Ej: hematoxilina, azul de metileno.)
• Ácidos (molécula de sal que colorea es el acido, Ej: eosina)
• Neutros (ambas partes de solución salina proporcionan color, Ej: eosinato de azul de metileno.)

Question 26

Colocación de cubreobjeto

Answer 26

se adhiere con resina