T7, 8 i 9 Flashcards
Quines tincións tenim per la detecció específica de lípids?
- Negre Sudan
- Sudan IV
- Blau de Nil o Tècnica de Lillie
- Oil red
- Tetraòxid d’osmi (no és una tinció)
Quins tipus de lípids hi han i quines característiques tenen?
Lípids homofàsics i heterofàsics.
- Lípids homofàsics: són neutres i es troben a la cèl.lula en estat pur (com als apdipòcits)
- Lípids heterofàsics: es troben barrejats amb altres substàncies (com proteïnes (formant lipoproteïnes) o glúcids (formant polisacàrids). Aquests es detecten mitjançant tècniques de citoquímica.
Digues els passos del procés de l’hematoxilina/eosina.
1- Venim de l’aigua destil.lada.
2- Posem hematoxilina de 2-5’ fins a 20’
3- Aigua corrent de l’aixeta per fer el viratge metacromàtic . També es pot substituïr per carbonat de liti.
4- Alcohol clorhídric (HCl + alcohol) per fer la diferenciació, es tornarà àcid (vermell).
5- Rentat amb aigua destil.lada
6- Rentat amb aigua amoniacal (per tornar a un PH bàsic)
7- Rentat amb aigua destil.lada o amb etanol de 50 - 70 (segons la sol.lució que volguem fer per l’eosina)
8- Eosina (aq. o alcohòlica)
9- Rentat amb aigua destil.lada o alcohol 50 -70, depenent del pas que haguem fet abans.
10- Deshidratació: si venim d’una solució aquosa farem la deshidratació amb alchol de 50º - 70º - 96º - 100º - 100º, i si venim d’una solució alcohòlica farem només 96º - 100º - 100º.
11- Agent intermig (normalment amb xilè)
12- Muntatge
Quins errors ens podem trobar al procés de l’hematoxilina/eosina i a què són deguts?
Fonamentalment 2 errors:
- Que l’hematoxilina surti granat. Pot ser degut a 3 factors. No s’ha deixat madurar, no s’ha fet el viratge metacromàtic o no s’ha aplicat l’aigua amoniacal.
- Que la tinció surti fluixa. Això serà degut, bàsicament, al desgast dels colorants.
Quin tipus de tinció es l’hematoxilina /eosina segons l’aplicació dels colorants?
És una coloració successiva ja que primer es posa un (hematoxilina) i després l’altre (eosina).
Quan s’aplica la tècnica de la hematoxilina/eosina? Quina funció fa?
S’aplica sempre a totes les mostres que arriben al laboratori, independentment del processos específics que se li hagin de fer després a cada mostra.
Té una funció topogràfica, és a dir, una visió de conjunt, estructural o arquitectural. Si és un teixit sa, serà una visió arquitecturàl del teixit i si és patològic ens permetrà tindre una visió arquitectural de la lesió.
Quin és el patró de l’hematoxilina/eosina?
- Nuclis = Blau - Violeta
- Citoplasmes = Rosa - Ataronjat - Porpra
En relació al seu color, de quin tipus de colorant és l’hematoxilina?
És un colorant metacromàtic, és a dir, originàriament és d’un color (granat) i tenyeix d’un altre (blau - violeta)
De què parlem quan parlem de la maduració de l’hematoxilina? Com es pot fer?
La maduració de l’hematoxilina és la seva oxidació. És un procés de mínim 48 hores en el que la hematoxilina es converteix en el seu derivat oxidat, l’hemateïna.
Hi han 2 maneres, la natural i la química.
A la natural hi intervé l’oxígen de l’aire i a la química hi intervenen productes que poden ser: Permanganats i dicromats potàssics, òxid de mercuri, iodat sòdic.
Després de la maduració (i abans de cada ús) s’haurà de filtrar ja que cristalitza molt fàcilment (i interfereix amb la visió al M.O)
Quines son les característiques de l’hematoxilina de Harris?
- És l’única que pot ser rebaixada per fer una contratinció
- El seu oxidant és l’òxid de mercuri
- El mordent poden ser sals d’alumini o amoni.
Quines són les característiques de l’eosina?
- És un colorant àcid
- És artificial - derivada dels xantens
- Es soluble en solucions aquoses, alcohòliques o hisroalcohòliques. Aquestes últimes són les òptimes i encara més si s’acidifiquen amb àcid acètic, que ja farà de mordent.
A què ens referim quan parlem de “Diana”?
La diana és la substància o estructura a la que va dirigida la tècnica, el què ens interessa detectar o veure.
Què és el patró de coloració?
Ens diu la substància o estructura i del color que es tenyeix aquesta amb la tinció /tècnica de detecció de la que estiguem parlant.
Quins són els components i quin és el patró de coloració del Negre Sudan?
- Components: Negre sudan i roig neutre (contratinció).
- Patró de coloració:
- Lípids homofàsics = negre
- Lípids heterofàsics i resta del teixit = roig pàl.lid
Què es important recordar del Roig Escarlata?
- També es diu Sudan IV
- S’ha de filtrar abans de cada ús
- Requereix talls en congelació
Quins colorants porta el Roig Escarlata o Sudan IV i quin és el seu patró de coloració?
- Colorants: Roig escarlata i hematoxilina de Harris modificada (contratinció9
- Patró de coloració:
- Lípids homofàsics = Vermelló
- Lípids heterofàsics i resta = Blau - Violeta pàl.lid
Quines són les característiques del tetraòxid d’osmi i per què s’utilitza?
No és una tinció, ja que no és un colorant, però redueix els lípids i els deixa de color negre.
Quins són els components i quin és el patró de coloració del tetraòxid d’osmi?
Components:
- Tetraòxid d’osmi i Roig neutre (contratinció)
Patró:
- Lípids = negres
- Resta = roig pàl.lid
Quina característica té el Blau de Nil? Què tenyeix? Quin altre nom se li dóna a la tècnica?
Que té una impuresa del 5% vermella.
Tenyeix lípids.
També s’anoma Tècnica de Lillie
Quin es el patró de la Tècnica de Lillie? Quin altre nom rep?
També rep el nom de Blau de Nil.
Patró:
- Lípids àcids = blau
- Lípids neutres = vermell
Quins són els components de l’Oil Red? i el seu patró de coloració?
Components:
- Oil red, pot portar una hematoxilina de Harris modificada com a contratinció.
Patró:
- Lípids homofàsics = vermelló
- Lípìds heterofàsics i resta = blau / violat pàl.lid (amb Hematoxilina de Harris)
Com defineixes el glucògen? On es pot acumular?
Com un polímer de la glucosa.
es sol acumular a fetge, ovari i a teixit muscular esquelètic.
Com es pot tenyir el glucògen per detectar-lo? Quin és el patró de la tècnica i els seus components)
El glucògen es pot detectar amb citoquímica o tenyir amb Carmí de Best.
Els components de la tinció són el carmí (que prové de la cochinilla femella) i una hematoxilina de Harris com a possible contratinció.
Patró:
- Glucògen = vermell
- Altres glúcids i resta = Blau / Violat pàl.lid
Què entenem per mucines? Com es tenyeixen? Digues els components i el patró de la tècnica en qüestió.
Per mucines entenem als mucopolisacàrids. La tècnica específica per mucines és el Mucicarmí de Mayer.
Els seus components són el carmí i la hematoxilina de Harris modificada com a contratinció.
Patró:
- Mucines = Vermell
- Alternatives i resta = Blau / Violat pàl.lid