T 10 Flashcards
En què es basa la histoquímica? Quins noms més rep?
Es basa en que busquem una molècula específica, i la posem en evidència amb reaccións químiques.
Què podem detectar amb la histoquímica?
Glúcids, àcids nucleics, pigments i enzims.
Què són els glúcids, quins noms més reben?
Els glúcids són un dels 4 principis immediats.
També es diuen sucres, sacàrids o hidrats de carboni.
Quins tipus de glúcids hi ha? Com es classifquen?
Hi ha simples i complexos.
- Simples: Poden ser molècules soles o cadenes de la mateixa molècula (polímers), com el glucògen.
- Complexos: Glucoproteines (glúcid + proteïna), glucolípids o polímers de diferents glúcids.
Amb quines tècniques citoquímiques podem detectar glúcids? Per quin tipus serveixen?
- PAS (Periodic Acid of Schiff): per mucopolisacàrids neutres
- Blau alcià: Per mucopolisacàrids àcids
- Tècnica de Bauer i tècnica de Casella: Per mucopolisacàrids neutres.
Quina característica ténen el PAS i el blau alcià?
Que quan els mucopolisacàrids són PAS+, són també blau alcià-.
EXCEPTE les sialomucines que, tot i ser acides, són positives pels dos.
Què significa PAS?
Periodic Acid of Schiff
Per a què serveix específicament la tècnica del PAS?
Per detectar mucopolisacàrids neutres.
Quines són totes les estructures o substàncies que pot tenyir el PAS?
- Glucògen (PAS+ i PAS diastasa -)
- Mucopolisacàrids
- Mucoproteïnes
- Coloide tiroidi
- Cèl.lules endòcrines hipofisàries basòfiles (TSH, LAH, FSH)
- Reticulina
- Glucolípids gangliòsids i cerebròsids
- Lipofuchsina
- Fongs
- Helmints
- Amebes
- Lípids heterofàsics
- Fibrina
- Substància amiloide
Quin és el principi d’actuació del PAS?
Està basat en l’oxidació de mucopolisacàrids neutres per part de substàncies àcides, que provoca l’aparició de grups aldehids, que recoloren el reactiu de Schiff (passa d’incolor a magenta / fuchsia brillant).
És el PAS una tinció?
Nooooooo, és una reacció química que dóna color.
Quin és el procés del PAS?
- Es posa àcid periòdic a la mostra
- Es posa en contacte amb el reactiu de Schiff
- Si hi ha mucopolisacàrids neutres hi haurà una recoloració
Per què està format el reactiu de Schiff?
Per fuchsina bàsica en aigua sulfurosa.
Té alguna tècnica semblant el PAS?
Sí, la tècnica de Bauer i la tècnica de Casella.
- La de Bauer, com a oxidant, utilitza làcid cròmica.
La de Casella el permanganat potàssic.
Té alguna contratinicó el PAS? quin és el seu patró?
Si, porta Hematoxilina de Harris modificad.
Patró:
- Mucopolisacàrids neutres: Magenta / porpra brillant
- Mucopolisacàrids àcids i resta: Blau / violeta pàl.lid
Com podem detectar el glucògen? Quin és el procés?
Amb el PAS diastasa (la diastasa és una amilasa que hidrolitza el glucògen).
El procés és:
- Es fa un PAS normal
- Si surt posirtiu es passa per amilasa (o diastasa)
- Es torna a fer un pas normal.
Si el segon PAS surt negatiu és que hi havia glucògen, si surt positiu és un altre mucopolisacàrid neutre.
Què és el Blau alcià? De què deriva?
És un pigment que dóna nom a una tècnica de citoquímica per detectar mucopolisacàrids àcids (de PH molt baix).
Deriva de les ftalocianines.
Què passarà si fem un blau alcià sobre mucopolisacàrids que no ténen el PH molt àcid (0,5 - 1)?
Que és tenyiràn tots del mateix color, no podrem diferenciar els mucopolisacàrids i no haurà servit de res..
Quins són els components de la tècnica del blau alcià? quin és el seu patró?
Components:
- Blau alcià (0,5-1%) en àcid acètic (0,5-3% en solució aquosa.
Patró:
- Mucopolisacàrids àcids: Blau turquesa / mitg
- Mucopolisacàrids neutres: vermell pàlid
Porta contratinció la tècnica del blau alcià? Amb quins colorants?
Si, sol portar contratinció. S'utilitzen: - Roig brillant de clorantina - Roig neutre de Kernechtröt - Roig neutre - Nuclear fast red
Com podem detectar àcids nuclèics a citoquímica? És una tècnica utilitzada? Perque?
Els podem detectar amb la tècnica de Feulgen.
No és una tècnica molt utilitzada ja que amb els avanços tecnològics tenim tècniques més específiques (PCR…). Actualment s’utilitza com a base pels estudis de citometria per fer estudis de canvis de ploidia, que ténen relació amb mals (o pitjors pronòstics), con n, 3n, aneuploidia…
Quin producte destacable porta la tècnica de Feulgen? per què s’utilitza?
Porta reactiu de Schiff (com el PAS). S’utilitza per la detecció d’àcids nucleics.