T2-Cinética de crescimento bacteriano Flashcards
Calcule o número de células viáveis?
Nº de Células Viáveis (NCV/μL) =(nº de colónias × fator diluição)/ inóculo (μL)
Realize a curva de calibração No de Células Viáveis em relação ao Tempo e Absorvência em função do Tempo. Calcule o tempo de geração.
Gráfico 1: Nº de Células Viáveis em relação ao Tempo
* Eixo do Y: No de Células Viáveis
* Eixo do X: Tempo
Gráfico 2: Absorvência em relação ao Tempo
* Eixo do Y: Absorvência
* Eixo do X: Tempo
O tempo de geração é calculado a partir do primeiro valor do eixo do Y que vai corresponder
a um determinado tempo e escolher outro valor do eixo Y que seja o dobro do primeiro. A
subtração do segundo valor com o primeiro vai corresponder ao tempo de geração.
Como se pode calcular o tempo de geração da 1a cultura bacteriana e qual o método mais rigoroso para esta determinação?
A determinação do tempo de geração, para que uma determinada população de células duplique pode ser calculado por 2 métodos diferentes:
* O 1º método é o método direto, que consiste em contar as células ao microscópio ou
por métodos eletrónicos.
* O 2º método, método indireto, envolve o traçado de 2 gráficos.
No 1º gráfico, deve ser construída uma curva de calibração da absorvência em função do
tempo. Assim, ao escolher uma absorvência inicial que corresponde a um determinado tempo
e escolher outra absorvência correspondente ao dobro da primeira que vai corresponder a outro tempo, através da subtração do tempo final pelo tempo inicial, obtém-se o tempo de geração.
No 2º gráfico, deve ser construída uma curva de calibração do número de células viáveis em função do tempo. O cálculo do tempo de geração é feito da mesma forma, mas utiliza-se tempo em que o número de células vivas se duplicou.
O método mais rigoroso para o calcular o tempo de geração é o método eletrónico, ou seja,
o método direto.
