Skriptum Flashcards
Händedesinfektion
- Wirkstoff Alkohol: Ethanol, Propanol, Isopropanol
- Wirkspektrum: bakterizid, (begrenzt) viruzid (plus), fungizid
- denaturieren Keimoberflächen-Proteine, lösen Membranlipide
- rückfettende Substanzen zur Hautschonung
Gram-Färbung
- Gram-I (Gentianviolett)
- Gram-II (Lugol’sche Lösung, KI)
- 96% Ethanol
- Safranin
- Lufttrocknen
Färbung kommt durch unterschiedliches Murein zustande
Mikroskopieren mit Immersionsöl
Beurteilung Erreger-Größe, -Form, -Farbe
Gram-Präparat: Keimmischung CES
Candida albicans:
gram-positiv große Hefe (blau)
Escherichia coli:
gram-negativ Stäbchen (rot)
Staphylokokkus epidermidis:
gram-positiv Haufenkokken
Problem bei Gram-Färbung mit Kulturen >1-2Tage alt
Gram Labilität von Gram-Positiven Keimen
gram-positive Keime auf nährstoffarmen Untergrund Nährplatte abgestorben od. bilden Murein nicht mehr vollständig aus
Erscheinung “rötlich” statt blau
Einzeller vs Pilze vs Bakterien
- Einzeller: einzige Zelle, pro/eukaryotisch, echter Zellkern mit Membran & Organellen, (a)sexuell
- Pilze: eukrayotisch, echter Zellkern + Membran, Organellen, (a)sexuell
- Bakterien: prokaryotisch, kein echter Zellkern, keine Organellen, asxuell
Nativpräparat
- Form, Größe, Beweglichkeit Bakterien
- Flüssige Proben, zugezogene Blende
Biggy, McKonkey-Nährplatten
- Biggy: Candida spp.
- Mckonkey: Enterobacteriaceae (Laktoseabbau rosa)
Sterilitätsprüfung
Test auf aerobe & anaerobe Bakterien
- Proben-/Testampulle
- Sterilkontrolle
- Wachstumskontrolle
Test auf aerobe & anaerobe Bakterien
Proben-/Testampulle
aerob/ anaerob
Test, ob Ampulle mit aerob/ anaeroben Keimen kontaminiert
Sterilitätsprüfung-Auswertung
Sterilkontrolle
aerob/ anaerob
Kontrolle, ob Aerobier/ Anaerobier-Medium steril
Sterilitätsprüfung-Auswertung
Wachstumskontrolle
aerob/ anaerob
Kontrolle, obn Aerob/ Anaerobier-Keime im Aerob/ Anaerobier-Medium wachsen können
Sterilitätsprüfung: Ampullen-Auswertung
- Steril- od. Wachstumskontrollen nicht valide: Testwiederholung
- Proben-Ampullen Ae/Anaerobier kontaminiert: Charge verwerfen
- Steril- u. Wachstumskontrollen valide, Testampullen Ae/An nicht kontaminiert: Freigabe der Charge
Sterlikontrollen (Negativkontrollen)
unbeimpftes Aerobier-/Anaerobiermedium zur Kontrolle, ob Medien steril hergestellt wurden
müssen klar bleiben
Wachstumskontrollen (Positivkontrollen)
Durchführung
Aerobier-/Anaerobiermedium mit aerob-/anaeroben Kontrollstamm beimpfen und bei 37°C inkubueren
Zur Kontrolle, ob verwendeten Medien korrekt hergestellt wurden u. Wachstum von Keimen erlauben
Verpackungsarten
damit es nicht sofort wieder unsteril wird
- flexible Verpackungen: Alu/Kombifolie
- starre Verpackungen: Glasschalen, Metalkassetten
Flexible Verpackungen: Vor/Nachteile
Vorteile
leicht, günstig, verformbar
Nachteile
* nicht recyclebar (laufende Kosten)
* kurze Sterilität des Sterilität-Guts
* hohe Perforationsgefahr
Starre Verpackungen
Vorteile
- keine Perforationsgefahr
- längere Sterilität des S-Guts
- recyclebar (kein Müll)
Nachteile
Gewicht, teuer
Heißluftsterilisator
Hitzeschrank Bedingungen
180°C 30min
160°C 120min
Normaldruck 1bar
Hitzeschrank Verwendung
- hitzebeständige Materialien (Glas, Keramik, hitzebeständige Öle) aber KEIN Plastik/ Flüssigkeiten
- gleichmäßige Verteilung S-Gut
Warum muss länger sterilisiert werden mit trockener Hitze?
Wasser leitet Hitze viel besser als Luft
Luft ist schlechter Wärmeleiter
Hitzeschrank Kontrollen
- Min/Max-Thermometer
- Indikatorband für HS
- Thermoindikatoren für Heißluftsterilisation (Chemostrips)
- Bioindikatoren: thermoresistenten Bakteriensporen -> wenn funktionstüchtig, dann sind diese abgetötet
Nachteil: Zeitspanne fehlt, wie lange S-Temp. erreicht worden ist
Dampfsterilisation
Autoklavieren Bedingungen
121°C / 2bar / 20min
134°C / 3bar / 5min
Wasserdampf besserer Wärmeleiter -> alle Luft durch H2O ersetzt
Dampfsterilisation
Autoklavieren
- gesättigter, gespannter Wasserdampf
- hitze- u. feuchtigkeits-stabile Gute aber KEINE Öle/ Pulver
- Keime platzen, Oberflächenproteine koagulieren
erst wenn Druck dem Umgebungsdruck entspricht, kann aufgemacht werden
Dampfsterilisation
Autoklaven-Kontrolle
Bowie-Dick-Dampfdurchdringungstest, Thermoband, physikalisch, Vakuumtest
Bowie-Dick-Test
Tägliche Überprüfung Funktionsfähigkeit vom Autoklaven - Dampfdurchdringungstest:
“Luft im Autoklaven & S-Gut entfernen und mit Dampf ersetzen”
Leerer Sterilisator: (un-)vollständiges verfärben des chemischen Farbindikators im Testpaket je nach Funktionsfähigkeit
HEPA-Filter
High Efficiency Particulate Air Filter (Papierfilter, entfernt 99.97% aller Partikel)
Aufbau: durchgehender Papierfilter zwischen dünnen Metall-Lamellen
Laminar Flow
Horizontal Flow
Herstellung normaler Zubereitungen
Laminar Flow
Vertical Flow
- Herstellung normaler Zubereitungen
- Zytostatika
Autoklaviervorgang Phasen
- Anheiz- und Entlüftungszeit
- Ausgleichszeit
- Abtötungszeit, Sicherheitszuschlag
- Druckentlastungszeit, Trocknungszeit, Kühlzeit, Belüftungszeit
Warum muss auf dem Sterilisiergut das Datum der Sterilitätä vermerken?
essentiell: damit man weiß, wann die Sterilisation stattgefunden hat
Aufbau Pilz
Pilzsporen - Sporenträger - Pilzfäden (Hyphen)
Womit werden Gram-negative Erreger angefärbt?
Safranin
Ein Heißluftindikator wird für den Autoklaven verwendet, was passiert?
Heißluftindikatoren für Trockenhitze-Sterilisationsverfahren ausgelegt (160°C-180°C)
Indikatoren verändern Farbe, wenn sie trockenen Hitze dieser Temperatur ausgesetzt
Heißluftindikator keinen oder falschen Farbumschlag anzeigen, da Temperatur u. Feuchtigkeit nicht Bedingungen entsprechen, für die Indikator konzipiert
Vergleich Membranfiltermethode vs Direkbeschickungsmethode
- Membranfiltermethode bietet höhere Empfindlichkeit, ideal für größere Volumina
- Direktbeschickungsmethode einfacher und schneller, für kleinere Volumina besser geeignet
