Semana 10 Flashcards
Q es el enlace fosfodister?
Es la conexión química que une los nucleótidos en una cadena continua de ADN o ARN
¿DÓNDE SE ENCUENTRA EL ADN?
EUCARIOTAS: núcleo, mitocondrias y cloroplastos
PROCARIOTAS: citoplasma(Nucleoide)
EXTRACCIÓN DE ADN?
Es el aislamiento del ADN, mediante rupturas lipidicas de las membranas por metodos fisicos, quimicos y enzimaticos.
La extracción del ADN 4 etapas:
- Lisis de la membrana celular
- Protección del ADN, evitar su degradación
- Separación de los restos del ADN soluble
- Precipitación y purificación del ADN.
Pasos para la extracción de ADN ?
- Lisis celular, membrana
- Lisis de la membrana nuclear
- Desnaturacion de proteinas
- Remoción del ARN
- Precipitación
- Purificación
Con que se hace la lisis enzimatica?
Enzimas: lisozima, liticasa , proteasas
Con que se hace la lisis quimica?
Detergentes: sds, lauril sulfato
Con que se hace la lisis mecánica?
homogeneización, congelamiento, maceración
Solventes? (Desnaturalización)
- Solventes orgánicos: Fenol/ cloroformo
- Alcohol isoamílico
- Sales: Cloruro de sodio, acetato de sodio
- Enzimas proteolíticas
Con que se hace la precipitación?
- Sales como acetato de sodio, potasio o amonio, cloruro de litio
- Etanol absoluto.
RECUERDA QUIMICOSS
Buffers tris: Controla el PH
EDTA: Evita degradar al ADN
SDS: Detergente, rompe
NaCl: Neutraliza, protege el ADN
Fenol: Precipita impuresas
Etanol e Isopropanol: Elimina las sales q rodean al ADN haciendolo soluble?