Selektion durch Markergene

Question 1

Aufgabe

Answer 1

Nötig zur Erkennung rekombinanter Bakterien

Question 2

Ablauf

Answer 2

1. Transformation (Übertragung genetischer Informationen)
2. Selektion

Question 3

Transformation

Answer 3

Plasmid pHH233 mit Resistenzgen gegen AB Tetracyclin und Resistenzgen gegen AB Ampicillin werden Fremd-DNA & Restriktionsenzyme, die „Ampicillin-Gen“ schneiden, zugefügt
- entstandene Plasmide (Plasmid ohne & Plasmid mit Fremd-DNA) gelangen in E.coli-Bakterien

Question 4

Selektion

Answer 4

1. Kultivierung der Plasmide (3 Varianten) auf Nährboden mit AB Tetracyclin ->E.coli ohne Plasmid geht kaputt
2. weitere Selektion durch Stempeltechnik

Question 5

Stempeltechnik

Answer 5

1. Bakterienkulturen auf Nährboden mit AB Tetracyclin
2. Samtstempel
3. Abdruck auf Nährboden mit AB Ampicillin -> Bakterien mit Fremd-DNA gehen kaputt

-> Durch Vergleich mit 1. Nährboden können Bakterien, die Fremd-DNA aufgenommen haben, erkannt werden