Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Flashcards
¿Que es la reaccion en cadena de la polimerasa?
Una tecnica de edicion genetica donde ocurre la amplificación de una muestra de ADN in vitro (solo en laboratorio ocurre), mediante varios ciclos de reacciones
Sus procesos se relacionan con la replicación de ADN.
¿Cuantos ciclos de repiticion suelen ocurrir en el proceso de PCR?
25 a 35 ciclos de reacciones
¿Que permite el PCR?
Permite identificar genes a partir de pequeñas muestras biológicas, como células epiteliales, espermatozoides, principalmente.
Analizar agentes infecciosos: virus, diagnósticos médicos y análisis forense
Luego de la replicacion de ADN permite la secuenciación del ADN (De la muestra) y la clonación en un plásmido para modificación
¿Que necesita esta tecnica para poder trabajar?
Requiere una enzima polimerasa y un cebador para comenzar la síntesis de nuevas cadenas de ADN, en dirección 5’ a 3’
¿Cuales son las etapas de los ciclos del PCR?
- Desnaturalización
- Templado/Hibridaccion
- Extensión
¿Que ocurre en la etapa de desnaturalizacion?
Separación de las hebras de ADN por calentamiento
¿A que temperatura ocurre la etapa desnaturalizacion?
94°C
¿Por que la etapa de desnaturalización ocurre a una mayor temperatura?
Debido a que no tenemos la enzima natural que realizaría esta desnaturalizacion
¿Cuanto tiempo dura la etapa de desnaturalizacion?
1 minuto
¿Que ocurre en la etapa de templado/hibridaccion?
Enfriamiento y unión de los cebadores a las cadenas simples
¿A que temperatura ocurre la etapa de templado/hibridaccion?
54°C
¿Por que la etapa de templado/hibridaccion ocurre a una menor temperatura?
Para que se puedan unir los cebadores
¿Cuanto tiempo dura la etapa de templado/hibridaccion?
45 segundos
¿En la etapa de templado/hibridaccion tiene cebadores en ambos sentidos?
Si
¿Que ocurre en la etapa de extension?
Elongación de la cadena por replicación de una secuencia complementaria
