Pruebas bioquímicas Flashcards
¿Qué buscas observar en la prueba de Catalasa?
Presencia de la enzima Catalasa en bacterias con Citocromo Oxidasa
Reacción de la prueba catalasa
Descomposición del peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua
Catalasa +
Formación inmediata de burbujas
Staphylococcus, Lysteria, Bacillus, Micrococcus
Catalasa -
No formación de busrbujas
Streptococcus, Clostridium
Prueba de Citrato
Determinar si un organismo es capaz de utilizar citrato como única fuente de carbono y compuestos amoniacales como única fuente de nitrógeno
Reacción Citrato
Alcalinización del medio Citrato de Simmons
+ Citrato
Azul
Enterobacterias (Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Citrobacter y algunas especies de Salmonella. Sin embargo, Escherichia,
Shigella, Salmonella typhi y Salmonella paratyphi )
- Citrato
No cambio color = Verde
Agar citrato de Simmons
Citrato de sodio y fosfato de amonio como fuentes de carbono y de nitrógeno
Azul de bromotimol como indicador de pH
Reacción Citrato
Las bacterias capaces de metabolizar el citrato podrán crecer en este medio y liberarán iones amonio lo que, junto con la eliminación del citrato (ácido), generará una fuerte alcalinización del medio que será aparente por un cambio de color del indicador de pH
Indol
Presencia de enzima triptofanasa
Reacción indol
Enzima triptofanasa en la bacteria provoca la hidrólisis del triptófano y su desaminación, produciendo indol, ácido pirúvico y amoníaco.
+ Indol
Al añadir al medio las gotas del reactivo de
Kovacs, se producirá un anillo de color rojo cereza en la superficie del caldo
Escherichia coli
- Indol
Klebsiella
Medio SIM
Indol, motilidad y producción de sulfuro
A partir del tiosulfato de sodio los microorganismos pueden generar ácido sulfhídrico que reacciona con el hierro presente formándose un compuesto de color negro
Oxidasa
Presencia de enzimas citocromo oxidasa
Reacción Oxidasa
Enzima reduce el oxígeno a agua
+ Oxidasa
Color morado intenso
Aerobias y algunas anaerobias facultativas
Neisseria
- Oxidasa
Algunas Pseudomonas
Rojo de metilo
Fermentación acido mixta
Reacción Rojo Metilo
Productos finales son ácidos orgánicos (ácidos fórmico, acético, láctico y succínico) que
provocan un fuerte descenso del pH
+ Rojo de metilo
Rojo pH < 4.4
E coli
- Rojo de metilo
Amarillo pH > 5.5
Serratia
Voges Proskauer
Fermentación butanodiólica
Reacción Voges Proskauer
Producción de ácidos butanodiol y etanol. se detecta la presencia de un precursor del butanodiol (acetilmetilcarbinol o acetoína). La acetoina en presencia de oxígeno se oxida a diacetilo. El diacetilo oriigina una coloración roja al reaccionar con los reactivos A y B
Reactivo A VP
α-naftol aumenta sensibilidad
Reactivo B VP
KOH provee el oxígeno y potasio que al entrar en contacto con la acetoína forma el diacetilo
+ Voges Proskauer
Rojo
Serratia
- Voges Proakauer
No cambio color
E coli
Ureasa
Presencia de enzima ureasa
Reacción Ureasa
Desdoblar la urea formando una molécula de
dióxido de carbono y dos moléculas de amoniaco por acción de la enzima ureasa.
+ Ureasa
Rosa intenso
Proteus
- Ureasa
No cambio color
DNAsa
Presencia de DNAsas
Reacción DNAsa
El ácido desoxirribonucleico permite la detección de la DNasa que hidroliza el ADN
+ HCL hidrolizado presenta transparencia, polimerizado, precipita y torna opacidad al medio de cultivo.
+ indicador color
+ DNAsa
Hidrolisis
Streptococcus, aguas
