Proteína no soro Flashcards
Quais os métodos de quantificação de proteína no soro?
Kieldahl, biureto, refratometria, bradford, lowry e absorção de luz uv.
Quais as vantagens e desvantagens do método de kieldahl?
vantagens: bem definido e reprodutível;
desvantagens: consome muito tempo e não é prático para uso rotineiro.
Em que consiste o método do biureto?
os iões de cobre formam um composto corado quando reagem com o oxigénio do grupo carbonilo e com os azotos da amida da ligação peptídica.
Em que consiste o método de Kieldahl?
transformação do N em NH4+ . O ácido bórico avalia a concentração de N na amostra.
Quais as vantagens do biureto?
suficientemente preciso, fácil e automatizado.
Quais as desvantagens da refratometria?
existem erros significativos
resultados imprecisos com resultados abaixo de 3,5 g/dl
Qual o princípio do método de bradford?
é baseado no desvio da absorvância máxima do corante quando ligado às proteínas.
Quais os corantes usados no método de bradford?
azul brilhante de comassie e molibdato vermelho de pirogalol
Em que se baseia o método de Lowry?
baseia-se na reação entre o reagente Folin-Ciocalteu e os resíduos de tirosina e de triptofano. origina uma cor azul.
Qual a desvantagem do método de lowry?
as reações com compostos não-proteicos podem originar um erro positivo.
Em que comprimentos de onde se utiliza o método por absorção de luz uv?
280 nm 2 220-225 nm
Quais as desvantagens a 280 nm na absorção por uv?
exatidao e especificidade prejudicadas pela distribuição desigual dos aneis de tirosina e triptofano.
presença de liquidos corporais, ácido urico e bilirrubina.
Quais as desvantagens a 220-225 nm na absorção por uv?
interferência da tirosina e triptofano livres uma vez que tmbm absorvem luz no comprimento das ondas gama.
