preparazione campione Flashcards
potere di risoluzione definizione e da cosa dipende?
minimo grado di distanza possibile tra due punti distinguibili, dipende dalla lunghezza d’onda della luce e dall’indice di rifrazione del mezzo
contrasto da cosa dipende?
dalla differenza di assorbimento della luce delle varie strutture cellulari o tissutali
come si calcola il limite di risoluzione del microscopio?
Con la formula di ABBE R= lambda/ n sen alfa
n= indice di rifrazione del mezzo di solito aria
alfa= angolo max di raccolta della luce
potere risoluzione max del microscopio ottico?
0,25 micrometri
tecniche di microscopia ottica (6)
microscopio ottico:
- a contrasto di fase
- a interferenza
- in campo scuro
- a luce polarizzata
- a fluorescenza
- confocale
microscopio ottico a contrasto di fase
sfrutta le differenze negli indici di rifrazione e trasformandole in differenze di intensità (si ha aumento di contrasto non risoluzione)
m.o. a interferenza
sfrutta due differenti lunghezze d’onda che incontrandosi creano un’interferenza e restituisce immagini 3D (a rilievo)
m.o. in campo scuro
il condensatore che illumina il campione è posto obliquamente e restituisce immagini chiare in campo scuro
m.o. luce polarizzata
sfruttan luce polarizzata che una volta che ha attraversato le strutture evidenzia l’organizzazione delle proteine fibrose del preparato
m.o. a fluorescenza
sfrutta la luce ultravioletta per ottenere l’immagine, è usato per sostanze che emettono luce visibile
m.o. confocale
sfrutta la luce laser permette di fare scansioni del preparato che possono essere sovrapposte e dare un immagine 3D
potere di risoluzione max microscopio elettronico?
0,4 nanometri
tipi di m.e.?
- a trasmissione (TEM)
- a scansione (SEM)
come funzione il m.e.?
Fascio di elettroni emessi da un catodo e accellerati nel vuoto attraversa il preparato al posto delle lenti ci sono campi elettrostatici e magnetici
TEM
immagini a grande risoluzione, gli elettroni attraversano le strutture biologiche come nel m.o.
