préparation des échantillons Flashcards
Quelle sont les diff étapes nécessaires a l’observation ?
1 Prélèvement (liquide et solide)
2 Fixation (imp, preserve structure ccell et tissulair, conservation, prévention autolyse cell, immob in situ)
3 Inclusion ( inclure dans résine pour durcir pour solide avec paraffine souvent) attention pas pour liquide !!
4 coupes ( entre 3 et 5 microns pour MO) attention pas pour liquide !!
5 coloration ( MET = agent de contraste et MO = colorants
Comment peut on prélever quelque chose de solide ?
organes = autopsie ( accepté depuis 16 siecles) ou nécrospisie (animaux
Organe dans totalité = suffixe ectomie
fragment organe = biopsie = petit fragm pas d’attentinte de l organe ( anest local eou gé)( sous endoscopie possible )
Comment peut on prélever quelque chose de liquide ?
ici pas d’inclusion ni de coupes !!! proced + rapide
permet étude chimique ou cytologique ( récupérer cellule sur organe en gros)( obs celllule et de faire comptage)
ponction à l’aiguille = veineuse, kyste, cavité pleurale, cavité péritonéale, lombaire, articulaire
prélèvement urinaire = sans aiguille, liquide extériorisé
Donne moi d’autres techniques de prélèvement en études uniquement cytologiques ?
Frottis = (étalement cellules sur lame de verre puis fixées puis colorées)
-raclage organe creux ( CB, Vagin et col uter)
- avec écouvillon (bouche) spatule et brosse ( vagin et col
Brossage = (bronchique ss endosc)
-recup cellules bronches
- etaler lame et permet obs cellules seules sans tissus
Quelle sont les techniques de préparations cytologiques sur la lame de verre ?
1 étalement (frottis sanguin 45deg, 1/2 1/3 lame bien, couche unicellulaire)
2 empreinte ( tapoter fragment org sur lame,cellules)
3 centrifugation ( isoler cellule du liquide et recup, prélèvement liq biologique avec des cellules en suspension, puis etalement lame
4 cytocentrifugation ( possibilité de projeter direct sur lame de verre avec centri,LDV, entonnoir, 200 et 300 microlitres ( 3/4 gouttes liquides )analyse urine et LCR
( et ensuite fixation, coloration et obs)
Comment se passe la fixation ?
- faut avoir un rapport de 1 à 5 volumes ech/vol ( 5x + de fix)
- cellules = Qques min a 10 min, solide = 24h à 48h
-fixateur = mélange alcool éther, + en cytologie l’acétone et le paraformaldéhyde - frottis sanguin ( séchage air et colorant avec un peu de méthanol pour finaliser la fixation
Les méthodes manuelles sont de routines ?
non, c’est utilisé pour des rech spécifiques(frottis sanguin)
syst de bascule lame en verre
Qu’est ce que l’automate de coloration ?
Bas avce affichage digitale avce plsrs lavages, colorations, et temps, panier vace 15ene de lames
Coloration MGG frottis sanguins
et coloration Papanicolaou pour frottis gyneco (routine ici avec cyto en rose si acide, cyto en bleu si basique)
Donne moi un exemple de coloration de routine avec le résultat qu’elle donne.
May Grunwlad-Giemsa (MGG) ( 2 colorants ça -)
séchage à l’air avec méthanol dedans
Noyaux = Violet
Cytoplasme = bleu ou rose clair (fction pH)
Granulocytes ( eosinophiles en rose, neutrophiles violet et foncé/rose-orangé, et basophiles en bleu
Quels sont les autres techniques de cytologie à visé diagnostique ?
Cultures cellulaires ( caryotype humain in vitro, étalement pour voir au MO)
A partir culture vivante (spz au MO avec lumière particulière pour relief)