préparation biopsie Flashcards
quel est le temps de préparation pour une biopsie et que nécessite un prélèvement de grande taille ?
environ une semaine, un prelevement de grande taille nécessite une étude macroscopique au préalable (taillle max 2cm/2cm)
Décrit la fixation pour une biopsie
1ère étape
Initialement composée de 60% d’eau et après fixation 60% de fixateur
Durée = 2 à 5h pour de petits pre et 24h à 48h pour+ grd
Ethanol, formol(+ utilisé !!!) ou coloration avec fixateur (acide picrique, acide acétique) (possible de mélanger colorant et fixateur la))
décrit la déshydratation pour une biopsie
2ème étape= la déshydratation
but = substituer fixateur par un DESHYDRATANT HYDROPHILE de type éthanol
par bains successifs d’ethanol à C° croissante ( 50%puis 70,90 ou 95 et enfin 100%)
à la fin le tissus contient 60% d’ethanol100
décrit l’infiltration pour une biopsie
3ème étape = infiltration
but = substituer l’éthanol par un solvant ORGANIQUE HYDROPHOBE en générale du xylène ( solubilise des lipides, impacte vacuole)
par bains successifs de xylène à C° croissante ( 50%puis 70,90 et enfin 100%)
à la fin tissus contient 60% de xylène
Que représente les lacunes blanches en coupe histologie ?
ce sont les adipocytes sans vacuoles du fait du traitement au xylène
décrit l’imprégnation pour une biopsie
4éme étape = l’imprégnation
Importante pour la coupe car matière initialement incolore et molle
substitution du xylène par de la paraffine liquide (dans étuve à 50° à 60°, svt 3 bains à C° croissante pour finir à 100% de paraffine)
svt 48 à 72h en fonction taille
à la fin tissus contient 60% de paraffine liquide ( molecu linéaires hydrocarbures saturés, liquide au delà de 40 45°, soluble ds solvant orga comme xylène)
décrit l’inclusion pour une biopsie
5ème étape =
Plaque chauffante avec paraffine coulée fond du moule puis solidification rapide
à la fin tissus comportent 60% de paraffine solidifiée
décrit la coupe pour une biopsie
6ème étape =
Coupe de 3 à 5 microns grâce à un MICROTOME. Série de coupe réalisée ( coupes en ruban pour rep obj du prélévmt)
décrit le montage et collage sur lame de verre
7ème étape =
On trempe les coupes dans eau chaudes pour pouvoir récupérer les coupes avec la lame de verre elle se colle NATURELLEMENT (possible 4 coupes sur 1 LDV)
Puis séchage par plaque chauffante ou bien étude
Pour prelmt osseux 2 possibilités = calcium enlevé ( déminéralisation) ou résine plus dure est utilisé pour voir tissus minéral, osseux (coupe au couteau)
Décrit l’étape de la coloration
8ème étape =
s’utilise que en phase aqueuse donc étapes dans sens inverses = déparaffinage avt colo et réhydratation du prélèvement
Comment ? Xylène pour solubiliser paraffine puis rinçage éthanol pour éliminer solvant et enfin rinçage à l’eau pour réhydrater puis application colorant
à la fin fragile attention donc application colle et lamelle de verre au dessus coupe pour protéger
