Práctica de extracción de ADN Flashcards
Pasos para la extracción del ADN
1.- Lisis (se degrada la membrana biológica con detergentes y proteinasa K y AL)
2.- Precipitación
3.- Purificación
4.- Lavados (AW1, AW2, AE)
5.- Elusión
Función de la Proteinasa K
Digerir proteínas (como histonas) e impurezas del ADN, así como proteger los ácidos nucleicos
Características importantes que nos interesan en la extracción de ADN
- Pureza
- Concentración
Es un amplificador genético
PCR
Técnicas de estudio de los ácidos nucleicos
- Southern blot (ADN)
- Northern blot (ARN)
- Western blot (Proteínas específicas)
Temperatura a la que se conserva el ADN
- Poco tiempo (4°C)
- Muchos años (-80°C)
¿A qué cantidad de nanómetros es posible medir la pureza del ADN?
260-280nm
Técnicas que forman parte del diagnóstico molecular
- PCR
- Electroforesis en gel
- PCR Cualitati
Significado de AL
Solución de lisis
Significado de AE
Solución de elución
Espectro de luz UV
Menos a 400nm
¿A qué temperatura debe estar la proteinasa K para la extracción de ADN?
56°C
Diferencia entre plasma y suero
- Plasma tiene factores de coagulación
- Suero carece de factores de coagulación
Diferencia entre electroforesis vertical y horizontal de los Ácidos Nucleicos
- Vertical: Se analizan tanto moléculas de ADN como proteínas
Horizontal: Generalmetne se trabaja con ADN O ARN
Áreas de interés en la extracción de ADN
- Ingeniería Genética
- Clonación
- Tecnología ADN recombinante