Practica 09 Flashcards
¿Qué herramienta molecular se utiliza para aislar y purificar macromoléculas?
Electroforesis
La electroforesis se basa en la movilidad de las macromoléculas en un campo eléctrico.
¿Qué tipos de macromoléculas pueden ser analizadas mediante electroforesis?
Ácidos nucleicos y proteínas
Ambos pueden ser separados y analizados por su movilidad electroforética.
¿Qué se necesita para confirmar la presencia de producto de amplificación después de una PCR?
Electroforesis en gel
La electroforesis en gel permite visualizar las moléculas de ácido nucleico.
¿Qué es la tinción Fast Blast?
Un compuesto catiónico colorido que se une a los grupos fosfato del ADN
Se utiliza para visualizar ADN en geles de agarosa.
¿Qué permite visualizar el bromuro de etidio (BrEt)?
ADN doble cadena (dsDNA)
Permite detectar hasta 1 ng de ADN emitiendo fluorescencia bajo luz UV.
¿Por qué no se pueden visualizar pequeñas cantidades de ADN en muestras biológicas antes de la PCR?
Porque son demasiado pequeñas
Se requieren amplificaciones previas para su visualización.
¿Cómo se separan las moléculas de ADN en la electroforesis?
Mediante una corriente eléctrica
El ADN, cargado negativamente, se mueve hacia el ánodo positivo.
¿Qué forma la matriz porosa en la electroforesis en gel de agarosa?
Agarosa solidificada
La concentración de agarosa determina el tamaño de los poros.
¿Qué se utiliza para aplicar la corriente eléctrica en el gel durante la electroforesis?
Buffer salino
El buffer salino permite que la corriente viaje a través del gel.
¿Cómo se expresa el peso molecular de una molécula de ADN?
Número de pares de bases (pb)
El peso molecular se relaciona directamente con la longitud de la cadena de ADN.
¿Cuál es la movilidad electroforética de las moléculas de mayor peso molecular?
Menor movilidad
Estas moléculas quedan más cerca del pozo donde se aplicó la muestra.
¿Qué componente se utiliza para incrementar la densidad de la muestra en la electroforesis?
Glicerol
El glicerol asegura que la muestra entre en el pozo del gel de agarosa al cargarla.
¿Cómo afecta el peso molecular a la movilidad electroforética de las moléculas?
Las moléculas de menor peso molecular presentan mayor movilidad electroforética
Esto significa que se desplazan más hacia el frente del gel.
¿Qué ocurre con la movilidad de las moléculas de ADN al aumentar la concentración de agarosa?
Menor tamaño de los poros y más tardan en atravesarlos
Esto es útil para separar moléculas de ADN de diferentes pesos.
¿Qué concentración de agarosa se emplea para la separación óptima de fragmentos de entre 200 y 1000 pb?
Agarosa al 3%
Esta concentración es ideal para la separación de fragmentos de ADN en ese rango de tamaño.
¿Qué es la huella genética?
El conjunto particular de variaciones genéticas propio de cada persona
La huella genética se utiliza para la identificación de individuos.
¿Qué representa un genotipo en el análisis de ADN?
El conjunto particular de alelos STR en la muestra de ADN
STR significa repeticiones cortas de nucleótidos.
¿Qué se analiza en el gel de agarosa junto a los productos de PCR?
Una escalera de alelos de ADN
Representa todos los tamaños estándar de los alelos posibles en el locus STR analizado.
¿Cómo se identifican los alelos en una muestra de ADN?
Comparando la migración de las bandas de ADN amplificadas con las bandas en la escalera de alelos
Esto permite juzgar sus tamaños relativos y sus identidades.
¿Cuántas bandas generará cada muestra de ADN de una persona?
Dos bandas
Estas representan los alelos de origen materno y paterno.
¿Cuál es el genotipo del ADN de la escena del crimen en el carril 2?
7-3
Esto indica que los alelos presentes son 7 y 3.
¿Qué se debe hacer con las muestras que no coinciden con el ADN de referencia?
Pueden excluirse de la investigación
Esto ayuda a centrar la investigación en muestras relevantes.
¿Qué se determina al analizar muchos loci en la huella genética?
Mejorar el poder de discriminación de las pruebas
Esto puede incluso permitir determinar el género de la persona.
¿Qué probabilidad hay de que otra persona tenga la misma huella genética?
Una en 10 billones
Esto hace que sea muy poco probable, a menos que sean gemelos idénticos.
