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Practica 08 Flashcards

1
Q

¿Qué es la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)?

A

Es una técnica de biología molecular que permite amplificar selectivamente una secuencia específica de ADN.

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Q

¿Quién desarrolló la PCR y en qué año?

A

Kary Mullis en 1985.

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3
Q

¿Cuáles son algunas aplicaciones de la PCR?

A
  • Identificación de agentes patógenos
  • Diagnóstico de polimorfismos o mutaciones
  • Medicina forense
  • Pruebas de paternidad
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4
Q

¿Qué tipo de material genético se puede utilizar como molde en PCR?

A

ADN extraído de pequeñas muestras como sangre, folículos pilosos, células de la mejilla o trozos de hueso.

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5
Q

¿Qué se necesita teóricamente para realizar una PCR?

A

Una única hebra intacta de ADN molde.

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6
Q

¿Cuáles son los componentes principales de la reacción de PCR?

A
  • Buffer de reacción
  • dNTPs
  • ADN polimerasa termoestable
  • Dos oligonucleótidos (cebadores o primers)
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7
Q

¿Cuál es la función del buffer de reacción en la PCR?

A

Mantiene un pH de 8.0 y contiene MgCl2 como cofactor enzimático.

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8
Q

¿Qué son los dNTPs en el contexto de la PCR?

A

Son los nucleótidos (adenina, guanina, timina y citosina) que se incorporan a las nuevas cadenas de ADN.

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9
Q

¿Qué papel juega la ADN polimerasa termoestable en la PCR?

A

Sintetiza las nuevas cadenas de ADN.

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10
Q

¿Qué son los cebadores o primers en la PCR?

A

Son oligonucleótidos que delimitan la región a amplificar y sirven como puntos de partida para la polimerización.

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11
Q

Verdadero o falso: La PCR puede realizar estudios con cantidades muy pequeñas de ADN.

A

Verdadero.

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12
Q

¿Cuál es una de las razones por las que la PCR es considerada una herramienta poderosa?

A

Su sencillez y especificidad.

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13
Q

¿Qué es la amplificación por PCR?

A

Es la replicación o copia del material genético que se lleva a cabo bajo tres principios moleculares

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14
Q

¿Cuáles son las tres etapas del ciclo de PCR?

A
  • Desnaturalización
  • Alineamiento (hibridación/anión)
  • Extensión o síntesis
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15
Q

¿A qué temperatura se realiza la desnaturalización del ADN en PCR?

A

99°C

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16
Q

¿Cuál es la temperatura de alineamiento en el ciclo de PCR?

A

52°C

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17
Q

¿A qué temperatura se lleva a cabo la extensión o síntesis en PCR?

A

72°C

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18
Q

¿Cuántas moléculas de ADN se obtienen después de 35 ciclos de PCR a partir de una sola molécula?

A

235 moléculas de ADN

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19
Q

¿Qué función tiene el termociclador en la PCR?

A

Mantener y cambiar rápidamente las temperaturas durante los ciclos de reacción

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20
Q

¿A qué temperatura se mantienen las muestras al finalizar los ciclos de PCR?

A

4°C

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21
Q

¿Qué tipo de material se utiliza como ADN molde en la PCR?

A

ADN molde en cantidades diminutas que contiene la secuencia blanco que se desea amplificar

22
Q

¿Qué componente se une a la secuencia específica en el ADN molde durante la hibridación?

23
Q

¿Qué permite programar y almacenar el termociclador?

A

Diferentes programas con diferentes ajustes de temperaturas, tiempos y número de ciclos

24
Q

Completa la frase: La PCR involucra una serie de ciclos repetitivos con etapas de _______.

A

desnaturalización, alineamiento/hibridación y extensión

25
¿Cuántos ciclos de reacción se realizan típicamente en una PCR?
35 ciclos
26
¿Cuál es el bloque del termociclador que permite la variación de temperatura?
Bloque de aluminio
27
¿Cuántos pares de bases hay en el genoma humano?
Alrededor de 3,500 millones de pares de bases.
28
¿Qué porcentaje del genoma humano es idéntico entre diferentes individuos?
El 99.9%.
29
¿Qué son los loci en el contexto genético?
Son direcciones o ubicaciones genéticas.
30
¿Qué es un alelo?
Son diferentes formas o tipos de un solo locus.
31
¿Qué significa que un locus sea bi-alélico?
Que tiene dos formas diferentes.
32
¿Qué son las secuencias polimórficas?
Son secuencias que difieren entre individuos y se utilizan para determinar la huella genética.
33
¿Qué es la huella genética?
Es el genotipo de una muestra individual de ADN.
34
¿Para qué se utiliza la huella genética?
Para la identificación de personas, medicina forense, pruebas de paternidad, etc.
35
¿Qué tipo de muestras biológicas se requieren para obtener ADN?
Sangre, semen, cabellos, saliva, huesos, trozos de piel, etc.
36
¿Qué se asume si las huellas genéticas de dos muestras biológicas coinciden?
Que proceden del mismo individuo o de gemelos homocigotos.
37
¿Qué son las Repeticiones Cortas en Tandem (STR)?
Son segmentos de repeticiones cortas localizadas en distintos cromosomas.
38
¿Cuántos alelos se han descubierto para el locus THO1?
Más de 20 alelos.
39
¿Qué se necesita para determinar la huella genética?
La amplificación de las regiones polimórficas mediante PCR.
40
¿Qué es el poder de discriminación en el análisis de la huella genética?
Es la capacidad de distinguir la diferencia genética entre diferentes individuos.
41
¿Qué se sintetiza durante la reacción de PCR?
Miles de millones de copias de cada uno de los dos alelos STR originales.
42
Completa la frase: La huella genética se determina analizando muchos _______ para mejorar el poder de discriminación.
loci.
43
¿Qué se hace en un escenario forense con muestras de ADN?
Se determina la huella genética de la muestra de ADN de la escena del crimen y de los sospechosos.
44
¿Qué técnica se utiliza para la amplificación en un solo locus en la práctica?
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) ## Footnote Esta técnica permite amplificar segmentos específicos de ADN.
45
¿Cuál es el locus específico mencionado en la práctica para la amplificación?
BXP007 ## Footnote Este locus se utiliza para análisis de ADN en la identificación de personas.
46
¿Qué se analiza después de la amplificación por PCR?
Productos de la PCR comparados con un marcador de peso molecular ## Footnote Esto se realiza a través de un análisis electroforético en gel de agarosa.
47
¿Qué permite conocer la comparación de los productos de PCR con el marcador de peso molecular?
El número de repetidos en ambos alelos de los loci STR ## Footnote Esto es importante para determinar coincidencias con muestras de escenas del crimen.
48
¿Cuál es el objetivo principal de la práctica?
Clonar in vitro Repeticiones Cortas en Tandem 'STR' de DNA genómico ## Footnote Esto se realiza mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa.
49
¿Qué se debe conocer sobre la Reacción en Cadena de la Polimerasa en esta práctica?
La aplicación, la función de cada uno de los componentes y características generales del Termociclador ## Footnote El Termociclador es esencial para llevar a cabo el ciclo de amplificación del ADN.
50
Completa la frase: En esta práctica se realiza la amplificación por PCR en un solo locus, el locus _______.
BXP007
51
¿Qué se utiliza para la interpretación de la huella genética en esta práctica?
Análisis electroforético de ADN en gel de agarosa ## Footnote Este análisis permite visualizar los productos de la PCR.
52
¿Qué permite ver si hay coincidencias con la muestra tomada de la escena del crimen?
El análisis del número de repetidos en los alelos STR presentes en el genoma ## Footnote Esto es fundamental para la identificación en investigaciones forenses.

Practicas de biomol (3 decks)

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