PCR y OTRAS PRUEBAS Flashcards
Que significa PCR?
Reacción en cadena de la polimerasa
Para qué se usa la PCR?
amplifica secuencia específica de DNA
Pasos de una PCR
- Secuencia molde
- Sintetiza
- Secuencia complementaria
Qué se requiere para una PCR?
- Secuencia de DNA
- Enzima DNA polimerasa (Taq)
- Desoxiribonuleótidos (dNTP)
- Primers
pH adecuado para una PCR
8.4
PCR para carga viral-bacteriana
qPCR-TR
Para qué se usan los iniciadores?
Para reconocer secuencias blanco en el DNA molde
- Proporcionan un extremo 3’
Proceso
- Desnaturalización
- Se separan las cadenas de DNA con una temp de 95 grados C - Hibridación
- Los primers se alínean al extremo 3’
- 50-60 grados C - Extensión
- Taq (polim) actúa sobre el complejo de los primers
- Agrega dNTP’s (desoxirribo) complementarios para crear cadenas completas
- 72 grados C
PCR para virus RNA y su carga viral
QPCR-RT
PCR que busca polimorfsimos
PCR-RFLP
Métodos que utilizan anticuerpos monoclonales
- ELISA
- Citometría de flujo
- Western Blot
¿Qué detecta Western -blot?
Proteínas específicas
Determina número de células y sus características físicas y químicas:
Citometría de flujo
Detecta y localiza secuencia de ADN
FISH
fluorescence in situ hybridization
Sitios que reconocen las enzimas de restricción tipo 2:
Secuencias palindrómicas