PCR Flashcards

1
Q

Requerimientos para hacer una PCR

A

Secuencia de DNA

Enzima DNA polimerasa

Desoxirribonucleotidos

Primers

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Q

Enzima que polimeriza una cadena de DNA tomando como molde una preexistente.

A

DNA polimerasa

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3
Q

Nombre de la DNA polimerasas?

A

Taq

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4
Q

DNTP

A

Desoxirribonucleicos

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5
Q

Cofactor de la DNA polimerasa (taq)

A

Cloruro de magnesio

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6
Q

Alto contenido en GC

Se utilizan para reconocer secuencias blanco en el DNA molde

Proporcionan un extremo 3’

Forward 5’ a 3’

Reverse 3’ a 5’

A

Iniciadores de PCR

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7
Q

+Se separan las cadenas DNA

+95ºC (20 a 30 seg)

A

Desnaturalización del DNA

Primer paso

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8
Q

+Los primers se alinean al extremo 3´

+Tm 50ºC a 60ºC ((4G+C)+(2A+T))

A

Hibridación

Segundo paso

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9
Q

+La Taq polimerasa actúa sobre el complejo templado de primers

+Agrega dNTP´s complementarios para crear cadenas completas

+72ºC

A

Extensión

Tercer paso

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10
Q

Que se realiza al final de una PCR

A

Una electroforesis

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11
Q

Técnica mediante la cual se separan las biomoleculas en disolución cuando se ven sometidas a un campo eléctrico

A

Electroforesis

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12
Q

Amplificación de un segmento de DNA utilizando dos partidores.

Detección mediante gel de agarosa

A

PCR Estandard

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13
Q

Amplificacion de dos o más segmentos utilizando varios partidores en una sola reacción de amplificación

Detección mediante gel de agarosa

A

PCR multiple

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14
Q

Sintesis de cADN a partir de ARN mediante transcriptasa reversa seguido de una PCR

A

RT-PCR

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15
Q

PCR estandard donde se utilizan tinciones o sondas con fluroforos para detección de fragmentos amplificados

A

PCR tiempo real

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16
Q

+Camara de electroforesis

+Genera campo eléctrico alrededor de un gel

+La cámara cuenta con dos polos que se conectan a una fuente de energía

A

Elementos necesarios para electroforesis

17
Q

Cuantos ciclos se realizan para obtener una PCR?

A

40

18
Q

PCR estandard el cuantificable?

A

No, es cualificable

19
Q

La carga define la velocidad de electroforesis? V/F

A

Falso

20
Q

La PCR es una reaccion en cadena de la polimerasa que sirve para obtener copias de genes o fragmentos de ADN? V/F

A

Verdadero

21
Q

Para que utilizamos la PCR?

A

Para amplificar secuencias específicas del ADN codificante

22
Q

Para poder realizar una carga bacteriana o viral es necesario realizar una PCR tiempo real? V/F

A

Verdadero

23
Q

Característica esencial de PCR tiempo real

A

Cuantificar la cantidad de DNA en la muestra

24
Q

Conocer el numero exacto de copias amplificadas del blanco

Medir la carga viral o la carga bacteriana de un tejido.

Concentración precisa de ácidos nucleicos en una muestra

A

Cuantificacion absoluta PCR tiempo real

25
Q

Evaluar los cambios en la expresión de genes en distintos estados fisiológicos.

A

Cuantificacion relativa PCR tiempo real

26
Q

Que mide western blot?

A

Proteinas específicas en una muestra de sangre o tejido.

27
Q

Que mide southern blot?

A

Secuencia específica de
ADN en una muestra de sangre o tejido

28
Q

Que mide northern blot?

A

Secuencia de ARN
específica en un muestra de sangre o de tejido.