PCR

Question 1

Para una PCR se requiere (4)

Answer 1

• Secuencia de DNA
• Enzima DNA polimerasa.
• Desoxiribonucleotidos (dNTP)
• Primers

Question 2

Enzima que polimeriza una cadena de DNA tomando como molde una preexistente.

Answer 2

DNA polimerasa

Question 3

Equipos donde se realiza:

Answer 3

termocicladores

Question 4

Amortiguador:

Answer 4

pH adecuado (8.4)

Question 5

Los iniciadores de PCR tienen alto contenido en:

Answer 5

G-C

Question 6

Para el inicio de la desnaturalización, se necesita una temperatura de:

Answer 6

95º C

Question 7

Ciclos de amplificación (3)

Answer 7

o Temperatura de desnaturalización.
o Temperatura de alineamiento (4G + C) + (2A+T)
o Temperatura extensión

Question 8

Esquema de la PCR (3)

Answer 8

Inicio de la desnaturalización
Ciclos de amplificación
Amplificación final

Question 9

Durante la desnaturalización…

Answer 9

Se separan las cadenas de DNA (95ºC)

Question 10

Durante la hibridación..

Answer 10

Los primers se alinean al extremo 3’

Question 11

Significado de PCR

Answer 11

Reacción en cadena de la polimerasa

Question 12

Temperatura para la hibridación

Answer 12

50º C a 60º C

Question 13

Durante la extensión…

Answer 13

La Taq polimerasa actúa sobre el complejo templado de primers y agrega dNTPs complementarios para crear cadenas completas

Question 14

Temperatura de la extensión

Answer 14

72ºC

Question 15

Al final de la PCR se realiza:

Answer 15

Gel de electroforesis

Question 16

Detección cualitativa de un segmento de ADN

Answer 16

PCR estándar

Question 17

Detección cualitativa de varios segmentos de ADN en una sola reacción de PCR

Answer 17

PCR múltiple

Question 18

Detección de polimorgismos genéticos (SNPs)

Answer 18

PCR-RFLP

Question 19

Detección de virus ARN

Answer 19

RT (transcriptasa reversa) PCR

Question 20

Detección cualitativa de uno o varios segmentos de ADN, cuantificación de ADN en la muestra o expresión de genes

Answer 20

PCR-TR (tiempo real) o qPCR

Question 21

Técnica utilizada para separar el ADN, ARN o moléculas o proteínas en base a su tamaño y carga eléctrica.

Answer 21

Electroforesis

Question 22

Elementos necesarios para una electroforesis (4)

Answer 22

Cámara de electroforesis
Gel de agarosa
Marcador de peso molecular
Transiluminador violeta

Question 23

Es el método más sensible para cuantificar los ácidos nucleicos.

Answer 23

PCR tiempo real (qPCR)

Question 24

PCR estándar donde se utilizan tinciones o sondas con fluoróforos para la detección de los fragmentos amplificados

Answer 24

PCR tiempo real (qPCR)

Question 25

Síntesis de cADN a partir de ARN mediante transcripción reversa, seguido de una PCR

Answer 25

RT-PCR (transcriptasa reversa)

Question 26

PCR estándar con paso posterior de digestión con enzimas de restricción

Answer 26

PCR-RFLP

Question 27

Amplificación de 2 o más segmentos de ADN utilizando varios partidores en una sola reacción de amplificación. La detección de la amplificación es mediante geles de agarosa.

Answer 27

PCR múltiple

Question 28

Amplificación de un segmento de ADN utilizando dos partidores. La detección de la amplificación es mediante geles de agarosa

Answer 28

PCR estándar

Question 29

Sistemas reporteros de fluoresencia de la PCR en tiempo real (qPCR)

Answer 29

Específicos No específicos

Question 30

Sondas fluorescentes de oligonucleótidos con un reportero fluorescente.

Answer 30

Específico

Question 31

Moléculas intercalantes que tienen afinidad por el dsDNA y generan una señal fluorescente.

Answer 31

No específicos

Question 32

Dos tipos de cuantificación de la PCR en tiempo real (qPCR)

Answer 32

Absoluta y relativa

Question 33

Evaluar los cambios en la expresión de genes en distintos estados fisiológicos.

Answer 33

Cuantificación relativa

Question 34

* Conocer el número exacto de copias amplificadas del blanco. * Concentración precisa de ácidos nucleicos en una muestra. * Medir la carga viral o la carga bacteriana de un tejido.

Answer 34

Cuantificación absoluta

Question 35

Los cambios en la expresión de genes en distintos estados fisiológicos para la cuantificación relativa se basan en:

Answer 35

Los niveles de RNAm del gen blanco comparados con un gen de referencia que no cambia su expresión a pesar de que los estados fisiológicos se modifiquen por diversas causas.