Outils D’étude De La Cellule Flashcards
2 types de microscopie photonique ?
- Confocal : échantillon épais, au moins 1 laser, possibilité de 3D
- A fluorescence (utilisation de fluochrome)
Qu’est-ce que le fluochrome ?
Donner des exemples
C’est une molécule qui émet des photons après excitation.
Dapi : émet dans le bleu , excité dans les UV
Fluorescéine : émet dans le vert, excité dans le bleu
Rhodamine : émet dans le rouge, excité dans le vert
2 types de microscopes électroniques ?
- EM balayage : électrons balaient surface échantillon (image lisse 3D)
- EM transmission : électrons plus ou moins transmis (image en 2D, nuances de gris, rugueux)
Qu’est ce que l’immunofluorescence ?
Utilisation d’un anticorps lié à un fluochrome contre un antigène donné afin de le repérer facilement.
Pour amplifier le signal, des AC secondaires peuvent être utilisés : immunofluorescence indirecte
Par quel moyen peut-on voir la protéine intra cellulaire ? Cela a-t-il une conséquence ?
Perméabilisation de la cellule entraînant la mort de celle-ci
Qu’est ce que la cytométrie en flux ?
Technique de détection, tri et comptage afin de quantifier des cellules/ molécules intracellulaires…
Méthodes pour faire rentrer un transgène dans une cellule vivante ?
-Micro-injection
-Electroporation
-Transfection (ADN encapsulé dans liposomes)
Culture primaire :
-Tissu prélevé
-Bon modèle physiologique
-Durée de vie courte
Culture en lignée :
-Cellules tumorales, cancéreuses, primaires immortalisées
-Génome modifié
-Durée de vie longue
Culture de cellules souches :
-Ex : issues du blastocyte
-Donne tout types de cellules organiques