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Biologie 1 > Observations microscopiques des microorganismes > Flashcards

Observations microscopiques des microorganismes Flashcards

1
Q

Quels sont les 2 grand types de microscopes

A

photonique et électronique

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Q

Quel autre nom peut on donner au microscope photonique

A

optique

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Q

Quel est la grande différence entre photonique et électronique

A

photonique: longueur d’onde des photons

électronique: longueur d’onde des électrons

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4
Q

3 Composé des microscopes

A

condensateur
objectif
oculaire

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5
Q

Quel est la formule pour trouver l’agrandissement

A

objectif x oculaire

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6
Q

quel est la force de l’oculaire utilisé en laboratoire sur le microscope photonique

A

10x

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7
Q

quel sont les objectif possible en laboratoire sur le microscope photonique

A

10x
40x
100x

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8
Q

Définir la limite de résolution

A

distance minimale entre deux points qui peuvent être percus comme étant distincts pour tout système optique

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9
Q

Nommer le facteur limitant du microscope photonique

A

Limite de résolution

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10
Q

Nommer les facteurs ou on peut intervenir

A

longueur d’onde
indice de réfraction du milieu
1/2 angle du cône de lumière entrant dans l’objectif

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11
Q

Longueur d’onde de la lumière visible

A

400 à 700 nm

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12
Q

longueur d’onde Ultraviolet

A

180 à 400 nm

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13
Q

indice de réfraction de l’Air

A

1.0

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14
Q

indice de réfraction du verre

A

1.5

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15
Q

indice de l’huile à réfraction

A

1.56

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16
Q

Qu’est ce que l’huile a réfraction

A

utilisé pour les objectifs à forts grossissement…

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17
Q

limite de construction de l’objectif

A

coût

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18
Q

Quel autre limite

A

le contraste

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19
Q

définition du contraste

A

capacité de distinguer une structure de son environnement

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20
Q

vrai ou faux: le contraste est proportionnel à la différence de quantité de lumière absorbée

A

vrai

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21
Q

Vrai ou faux: dans une préparation à l’état frais le contraste augmente

A

faux il diminue

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22
Q

Comment peut on augmenter le contraste dans un microscope a fond clair

A

Coloration

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23
Q

Pourquoi doit-on colorer lors de l’utilisation d’un microscope à fond clair

A

peu de colorant vitaux ce qui exigent une fixation et une coloration

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24
Q

vrai ou faux: les colorants sont toujours de charges positives

A

faux les colorants sont positif et négatifs

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25
Q

vrai ou faux: les colorants sont hydrophobes

A

vrai

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26
Q

que veut dire coloration simple

A

un seul colorant

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27
Q

Vrai ou faux: la charge du bleu de méthylène est +

A

vrai

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28
Q

de quel couleur est le violet cristal dans une charge +

A

violet

29
Q

de quel couleur est le violet cristal dans une charge -

A

rouge

30
Q

c’est quoi la coloration de Ziel-Neelsen?

A

La coloration de Ziehl-Neelsen est une méthode de coloration permettant l’identification des mycobactéries au microscope.Elle fait partie des colorations qui mettent en évidence l’acido-alcoolo-résistance, caractère fondamental des mycobactéries, en prenant en compte la difficulté de pénétration des colorants.

31
Q

nommer des types de microscopes photoniques

A
  • a fond clair
  • contraste de phase
  • fond noir
  • contraste d’interférence
  • fluorescence
32
Q

Comment peut on décrire l’image d’un microscope a fond noir

A

structure clair sur fond noir

33
Q

quels sont les différences du condensateurs d’un microscopes à fond noir

A

cône de Abbe + miroirs, éclairage obliques et visualisation des rayons déviés

34
Q

vrai ou faux au microscope a fond noir, on observe des cellules mortes

A

faux on observe des cellules vivantes

35
Q

vrai ou faux au microscope a fond noir on observe des structures sans fixation et coloration

A

vrai

36
Q

différences internes du microscopes à contraste de phase

A

condensateurs et objectifs, anneaux de phase

37
Q

principe du microscope à contraste de phase

A

mise en phase de la lumière incidente. La réfraction de la lumière par les structures cellulaires sont des changements de phase de la lumière et change aussi l’intensité de la lumière. Les structures de densité différentes réfractent différemment la lumière et l’intensité lumineuse est différentes

38
Q

comment peut on décrire l’image observé au microscope à contraste de phase

A

images sombres sur fond clair, parfois filtres colorés

39
Q

vrai ou faux le microscope à contraste de phase est moins récent que le microscope à fond noir

A

faux contraste de phase est plus récent

40
Q

quel est la limite du microscope à contraste différentielle

A

préparation transparente

41
Q

comment fonctionne le microscope à contraste d’interférence différentielle

A

lumière polarisée à angle variable
réfractions différentes modifie la polarisation
intensité lumineuse différente
coloration vive et impression de pseudo-relief 3d

42
Q

différences du microscope à contraste d’interférence différentielle

A

condensateur: système de lentilles polarisantes contrôlées par informatique

43
Q

vrai ou faux Avec le microscopes d’interférence différentielle on utilise la coloration et la fixation

A

faux on utilise aucun des deux on visualise de structures fines sans coloration ni fixation

44
Q

vrai ou faux Avec le microscopes d’interférence différentielle on observe des cellules vivantes

A

vrai

45
Q

2 applications des microscopes à flurescence

A

fluorochrome vitaux

immunofluorescence

46
Q

comment est ce qu’on utilise le microscope à (épi)fluorescence

A

On utilise des colorants fluorescents (fluorochrome ), ils absorbent les rayons UV (émission visible).Lampe UV excitatrice, filtre sélectif (bloquant) observation visible.

47
Q

c’est quoi des fluorochrome vitaux

A

distinctions des cellules vivantes ou mortes

48
Q

quelles sont les distinctions entre les cellules mortes et vivantes au microscopes à fluorescence

A

vivante: exclusion par la membrane cytoplasmique
morte: membrane cytoplasmique perméable

49
Q

Comment fonctionne l’immunofluorescence

A

couplage d’anticorps spécifique/protéines/ organisme aux fluorochromes
détection des anticorps par fluorescence

50
Q

vrai ou faux: l’immunofluorescence peut aider dans le diagnostique d’une maladie

A

vrai

51
Q

Expliquez comment l’immunofluorescence peut jouer un rôle dans le diagnostique

A

On peut détecter des pathogènes selon la sensibilité de la fluorescence à l’anticorps. On peut le faire dans l’environnement et dans l’échantillon clinique

52
Q

En quel année a été créer le microscope électronique

A

1931

53
Q

Quel grossissement est utilisé au microscope électronique et quel est la limite de résolution ?

A

grossissement = 400,000x

Limite de résolution = 0.05nm

54
Q

Comment fonctionne l’image d’un microscope électronique

A

pour former l’image en contrôlant le faisceau d’électrons et pour le faire converger sur un plan particulier par rapport à l’échantillon. Le principe est similaire à celui du microscope optique qui utilise des lentilles en verre pour focaliser la lumière sur ou au travers de l’échantillon pour former une image.

55
Q

Quel sont les parties présentent que sur le microscope électronique

A 
électro-aimant
lentille magnétique
écran fluorescent
plaque photographique
détecteur numérique
56
Q

Limite du microscope électronique

A

Les électrons voyagent dans le vide et sont non-pénétrant

Lorsque le matériel est vivant, le contraste diminue, on doit donc faire un coloration pour augmenter le contraste

57
Q

Expliquez la technique d’ombrage

A

On vaporise de métaux ce qu’on veut observer avec un angle précis jusqu’à ce que l’échantillon soit recouvert afin qu’il projette une ombre.
On fait la même chose avec des billes témoins qui ont une taille prédéfini afin de comparer les ombres.

58
Q

Expliquez la technique de contraste négatif

A

Le contraste négatif permet d’assombrir le fond sans colorer l’objet lui-même et donc de le rendre visible sans le modifier, par simple contraste. Il y a une accumulation d’Acide phosphotungstique dans le creux , les creux sont donc plus ombres pour qu’on voit les reliefs de la structure d’un virus

59
Q

Expliquez le cryodécapage

A

on sublime la glace superficielle, sous vide et à basse température ; cela augmente les reliefs de l’échantillon, ce qui donne une meilleure visibilité au microscope. On congèle l’échantillon une très basse température -180 , pour faire une coupe transversale on fracture aux zones de faiblesse, ensuite on fait une technique d’ombrage

60
Q

expliquez l’immuno-localisation cellulaire

A

Avec la fluorescence, on peut localiser un anticorps, structure et protéine spécifique dans une cellule

61
Q

2 types de microscopie électronique

A

à transmission et à balayage

62
Q

expliquez la cryomicroscopie et/ou la cryotomographie électronique

A

Contrairement à d’autres techniques de préparation (dont la coloration négative), aucun colorant ou fixateur chimique n’est utilisé. De plus, le complexe macromoléculaire peut rester dans un environnement (tampon) proche de ses conditions physiologiques (en termes de pH et de concentration en sel). La congélation rapide des échantillons dans de l’éthane liquide (−160 °C) fige ces derniers dans leur état natif dans une glace amorphe4. Les images obtenues étant des projections 2D de l’ensemble des objets congelés, ceci permet d’accéder à la structure interne de macromolécules complexes. L’utilisation de la cryo-microscopie (manipulation et maintien des échantillons à basse température) multiplie la durée de vie de l’échantillon sous le faisceau d’électrons par un facteur deux ou trois. On peut faire une reconstruction 3d.

tomographie: image de strate de l’échantillon

63
Q

Comment fonctionne le microscope à balayage

A

On fait le balayage de la surface de l’échantillon ce qui donne à la surface un effet 3d. Les électrons sont réfléchi et capter par un détecteur latéral. La limite de résolution est augmenté.

64
Q

Comment fonctionne le microscope à transmission

A

Les électrons traversent l’échantillon sont détecter sous l’échantillon, on a donc une image par transparence. La limite de résolution diminue.

65
Q

différence entre l’image par transmission et l’image par balayage

A

Transmission: intérieur de la structure
Balayage: structure 3d extérieur

66
Q

Comment fonctionne le microscope confocal à balayage laser

A

sa source lumineuse est un laser (UV), qui balaye point par point l’objet à analyser horizontalement, verticalement et temporellement. On utilise des fluorochromes afin d’augmenter le contraste. Dans sa configuration « réflexion », il utilise un miroir semi-réfléchissant, qui réfléchit le rayon provenant de l’objet vers un détecteur. Ce dernier peut ainsi mesurer l’intensité lumineuse de chaque point et la stocker dans un ordinateur. On fait une numérisation de l’image, on peut avoir une reconstitution et quantification informatique en 3d ou 4d (temps )

67
Q

applications du microscope à balayage laser

A

détection ou localisation d’une structure dans une cellule, un tissus
développement d’un biofilm dans le temps
quantification + position de cellule vivantes/mortes

68
Q

nommer 2 types de microscopes à balayage de sonde

A

effet tunnel, force atomique (nanotechnologie, biomatériaux)

69
Q

expliquez le microscope a effet tunnel (balayage de sonde)

A

une sonde balaie la surface de l’échantillon . mesure le déplacement vertical/ horizontal et le courant entre les nuages électroniques, liens intermoléculaire en milieu aqueux

Biologie 1 (3 decks)

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