MÓDULO 4. TÉCNICA HISTOLÓGICA Flashcards
1
Q
Es el estudio de los tejidos, cuya función es la descripción de la composición de la estructura de las células y tejidos vivos
A
La Histología
2
Q
Año en el que fueron posibles por primera vez las observaciones histológicas
A
A partir del año 1600 cuando se incorporó el microscopio a los estudios anatómicos
3
Q
La histología representa el nexo de unión entre…
A
la bioquímica, la fisiología y la genética; los procesos patológicos y la clínica
4
Q
Es una característica importante del estudio histológico
A
Es una ciencia visual que se basa en la microscopía y otras modalidades de imágenes para revelar las subestructuras de células, tejidos y órganos
5
Q
Son los objetivos de la histología
A
- Proporcionar una base para el tratamiento de tejidos enfermos y lesionados.
- Establecer una base para el aprendizaje de la histopatología; la relación entre la estructura anormal y los defectos fincionales relacionados
- Comprender la relación entre la función y la estructura de los tejidos.
- Comprender la estructura del tejido a niveles no visible a simple vista, incluídas las relaciones tridimensionales entre los constituyentes bioquímicos.
6
Q
Son considerados el padre de la histología y el padre de la histología moderna, respectivamente
A
Marcello Malpighi y M. F. Xavier Bichat
7
Q
Es considerado el inventor del microscopio
A
Zacharias Jansen o Zacharias Janssen
8
Q
Su constribución consistió en la primera clasificación de los tejidos y en identificar el origen microscópico de las enfermedades
A
Xavier Bichat
9
Q
Inventa el microscopio electrónico hacia el año 1931
A
Ernst Ruska
10
Q
Innovación del miscroscopio electrónico
A
Aumento de 5000x
11
Q
Es el objeto de estudio funamental de la histología
A
Los tejidos y las células que los componen
12
Q
Herramientas que permiten el estudio de la histología
A
La microscopía y la técnica Histológica
13
Q
Es una serie de pasos ordenados que permiten preparar el tejido para su observación a través del microscopio
A
La ténica histológica
14
Q
Ténica histológica más común en el microscopio de campo claro
A
Ténica histológica común o de inclusión en parafina
15
Q
Describa la ténica de inclusión en parafina
A
Las muestras se infiltran en parafina a fin de que tengan la consistencia adecuada para obtener los bloques con las muestras o especímenes. A continuación estos bloques se incertan en un micrótomo que produce cortes muy finos.
16
Q
Paso adicional de la ténica histológica que permite distinguir con más claridad los componentes estructurales de las células y tejidos
A
La tinción
17
Q
Impulsa el desarrollo de la agricultura, identifica las patología que afectan la salud, Colabora en los procesos de investigación criminalística, brinda información especializada para la investigación criminalística, Permite explorar hipótesis, identificar problemas y soluciones mediante el cultivo de tejidos
A
Son algunas aplicaciones de las ténicas histológicas
18
Q
Obtención de la muestra → Fijación → Inclusión → Corte → Tinción → Montaje
A
Son los pasos en la ténica histológica
19
Q
Sección delgada de tejido biológico, generalmente preparada con técnicas de histología, que se corta en una dirección específica para su posterior análisis microscópico.
A
Corte Histológico
20
Q
La muestra se obtiene de un individio vivo
A
Biopsia
21
Q
La muestra se obtiene de un cadáver
A
Necropsia
22
Q
Biopsia incisional
A
Se obtiene una sección de la lesión
23
Q
Biopsia excisional
A
Es extraída de la lesión completa
24
Q
Son los principales tipos de biopsias
A
Punción y aspiración con aguja fina (PAAF)
Punción y aspiración con aguja gruesa (PAAG)
Citología exfoliativa
25
Bipsia. Se utiliza para obtener tejido sanguíneos
PAAF
26
Biopsia. Se utiliza para obtener muestras de médula ósea
PAAG
27
Biopsia. Se utiliza para obtener muestras de las células de los epitelios
Citología exfoliativa
28
Las células se matan para detener los procesos celulares. Se lleva acabo por la inmersión de un pequeño trozo del tejido en el fijador
Fijación
29
Son los distintos agentes químicos utilizados durante el proceso de fijación
Formaldehído, glutaraldehído, tetróxido de osmio
30
Se retira el agua del tejido. Se realiza de manera gradual para evitar que el tejido se deforme; se utiliza alcohol en concentraciones crecientes
Deshidratación
31
Para retirar el alcohol y reemplazarlo con un agente aclarante
Aclaramiento
32
Son solventes orgánicos involucrados en el proceso de aclaramiento
Tolueno, xileno y benceno
33
En este paso la parafina penetra en el interior de la célula; se forma un bloque
Infiltración e Inclusión
34
Los medio de inclusión son ceras insolubles en agua, por lo general...
la parafina
35
Utilizando un micrótomo, los tejidos tejidos deben cortarse en láminas muy delgadas para posibilitar su observación en el microscopio
Corte o microtomía
36
Espesor adecuado producido por el micrótomo
5-10 micras
37
Los cortes deben ser desparafinados para poder ser observados en el microscopio, de lo contrario sería imposible teñirlos. Se emplean agentes aclarantes para que reemplacen la parafina
Desparafinación
38
Son los disolventes empleados durante el proceso de la desparafinación
Xilol y tolueno
39
Los tejidos deben rehidratarse con soluciones alcohólicas en concentraciones decrecientes
Rehidratación
40
En este paso las muestras se tiñen
Coloración
41
Son los tipos de tinciones con las que pueden ser coloreadas las muestras durante el proceso de coloración
Monocrómicas, dicrómicas y tricrómicas
42
Es el método de tinción más utilizado
Combinación de hematoxilina y eosina (HE)
43
Forma en la que la HE tiñe los componentes de la muestas
Los componentes nucleares de azul y las estcuturas citoplasmáticas de color rosado
44
Los cortes se montan en el portaobjetos usando resinas acrílicas sintéticas para que se conserven
Montaje
45
Son los métodos de coloración
Monocrómicas, bicrómicas y tricrómicas
46
Azul de metileno y azul de toluidina
Son ejemplos de tinciones monocrómicas
47
Hematoxilina y eosina
Es la tinción convencional; tricrómica
48
Los componentes ácidos captan este colorante durante el uso de la tinción HE
Hematoxilina
49
Los componentes básicos captan este colorante durante el uso de la tinción HE
Eosina
50
Son ejemplos de componentes ácidos en los tejidos observados bajo el microscopio
ADN y ARN
51
Son ejemplos de compontenes básicos en los tejidos observados bajo el microscopio
Proteínas
52
Azulmorado
Es el color que exhiben los componentes ácidos coloreados el HE
53
Es el color que reciben los componentes básicos coloreados pro la tinción con HE
Rosanaranja
54
Se les da el nombre de basófilo
A los componentes ácidos coloreados por HE
55
Se les da el nombre de eosinófilo o acidófilo
A los componentes básicos coloreados por el HE
56
Son las tinciones más empleadas en las tricrómicas
Masson, Gallego y Gomori
57
Ayudan a distinguir entre los tejidos básicos (epitelial, conjuntivo y muscular)
Las tinciones tricrómicas
58
Forma en la que tiñe la tinción Masson:
Músculo: Rojo; Tejido conjuntivo: Azul rey; Núcleo: Negro
59
Músculo: Amarillo; Tejido conjuntivo: verde; núcleo: rojo
Forma en la que tiñe la tinción Gallego
60
Músculo: Rojo; Tejido conjuntivo: verde brillante; Núcleo: negro
Tinción Gomori
61
Son tinciones que sirven para hacer evidentes biomoléculas en tejidos o en las células
Tinciones selectivas
62
Con tetraóxido de osmio (color oscuro) y sudán rojo (color rojo)
(Tinción selectiva para) Lípidos
63
Mucina, Glucocálix, glucógeno
(Tinción selectiva para) Carbohidratos
64
Se utilizan tinciones como PAS (Tinción del ácido peryódico de Schifft) o carmín de Best (Color rojo carmín o magenta)
(Tinción selectiva para) Carbohidratos
65
Son las distintas fibras proteicas que son teñidas selectivamente para su observación bajo el microscopio
Elásticas y Reticulares
66
Las tinciones de reyes (Rosa-magenta), Orceína (Morado intenso) y Verhoeff (Café oscuro) se emplean para hacer notorio esta componente tisular
Fibras elásticas
67
La técnica de Wilder (impregnación metálica), sirve para demostrar estas fibras
Fibras reticulares
68
Otros métodos para resaltar componentes específicos
Inmunomarcaje, Técnicas argénticas
69
Se aprovecha de la especificidad antígeno-anticuerpo
Inmunomarcaje **(Revisar para mejor profundidad: cómo funciona el inmunomarcaje?)**
70
Las impregnaciones metálicas emplean sales de oro que se adhieren a la superficie de las células, en especial a las del tejido nervioso; estas emplean, con respecto a la microscopía estas técnicas
Técnicas argénticas
71
Son los tipos de tinciones empleadas en la microscopía de luz
- Colorantes básicos
- Colorantes ácidos
- Colorantes liposolubles
- Reacciones histoquímicas de multicomponentes
72
Son las ténicas visuales empleadas en la microscopía electrónica (MET)
Metal pesado
73
Tinciones: Hematoxilina, azul de toluidina, azul de metileno, azul alcián;
Afinidad: Componentes tisulares basófilos (p. ej. ADN, ARN, Polianiones, p. ej. glucosaminoglucanos sulfatados)
Colorantes básicos
74
Tinciones: Eosina, naranja G, fucsina ácida
Afinidad: Componentes tisulares acidófilos (p. ej., proteínas citoplásmicas
básicas)
Colorantes Ácidos
75
Tinciones: Rojo aceite 0, negro Sudán
Afinidad: Hidrocarburos de cadena larga (grasas, aceites, ceras)
Colorantes Liposolubles
76
Las distintas tinciones del método de reacciones histoquímicas de multicomponentes
Reacción del PAS, Reacción de Feulgen
77
Las distintas tinciones de Metal Pesado
Acetato de Uranilo, citrato de plomo; tetraóxido de osmio; Rojo Rutenio
78
Afinidad: Inespecífico; se absorbe a las superficies, mejora el contraste
Metal pesado (1/3)
Tinción: Acetato de uranilo, citrato de plomo
79
Relaciona la estructura y la función del tejido; se utilizada para localizar muchas enzimas
Histoquímica Enzimática
80
Algunas de las enzimas localizadas mediante la histoquímica enzimática
Fosfata ácida, deshidrogenasas, peroxidasas
81
Es el mecanismo de la técnica Histoquímica enzimática
Se utilizan anticuerpos marcadas para localizar antígenos de células y tejidos
82
A menudo se utilizan cortes congelados ya que las enzimas se activan con la energía cinética proporcionada por el calor
Es una característica de la ténica histoquímica enzimática
83
Método Gomori. Tejido incubado con glicerofosfato y nitrato de plomo. El fosfato liberado por las enzimas se combina con el plomo para producir un precipitado incoloro de fosfato de plomo. El sulfuro de amonio reacciona con el fosfato de plomo para formar un precipitado de sulfuro de plomo negro. Útil para distinguir los lisosomas de otros gránulos y organelos citoplásmicos. También se utiliza en inmunohistoquimica.
Es el método empleado para la localización histoquímica enzimática de la enzima Fosfata Ácida
84
Secciones de tejido incubadas con sustrato específico de deshidrogenasa y tetrazol. La enzima transfiere iones de hidrógeno del sustrato al tetrazol, lo que reduce el tetrazol a formazán, un precipitado oscuro. Las deshidrogenasas específicas se dirigen a sus
sustratos específicos.
Método histoquímico enzimático para localizar las deshidrogenasas
85
A menudo, se demuestra al incubar el tejido con 3,3' diaminobencidina (DAB, diaminobenzidine) y peróxido de hidrógeno. La enzima transfiere hidrógeno de la DAB al peróxido, y la DAB oxidada forma un precipitado café oscuro denso en electrones en el sitio de actividad de la enzima. Útil para microscopia óptica y electrónica. También se utiliza en inmunohistoquímica.
Método histoquímico enzimático para localizar las peroxidasas
86
Son los tipos de localización de antígenos
Inmunohistoquímica directa e indirecta
87
El tejido que contiene el antígeno se incuba en la solución que de anticuerpo marcado de tal manera que el anticuerpo se une directamente al antígeno y la marca aparece en el sitio antigénico
Inmunohistoquímica directa
88
Las secciones de tejido se incuban con anticuerpos primarios específicos para el antígeno de interés. Estos anticuerpos se unirán selectivamente a los antígenos presentes en el tejido.
Se agregan anticuerpos secundarios que están marcados con una enzima. Estos anticuerpos secundarios se unirán a los anticuerpos primarios y amplificarán la señal.
Revelado de la enzima: Se añade un sustrato específico para la enzima unida a los anticuerpos secundarios. Cuando la enzima entra en contacto con el sustrato, produce un producto de reacción detectable, como un cambio de color.
Inmunohistoquímica indirecta
89
Se utilizan para estudiar células y tejidos vivos sin la interferencia de los mecanismos homeostáticos del organismo, Facilitan la manipulación controlada del entorno.
Cultivo de células
90
Células y tejidos aislados y desarrollados en cultivo
Se denominan in vitro (en vidrio)
91
Se llaman in vivo (en la vida)
Se encuentran en el organismo intacto
92
Consiste en una solución salina isotónica amortiguada a la que se le añaden nutrientes (aminoácidos, vitaminas, hormonas, hidratos de carbono) de una composición que se controla de forma rígida. A menudo se añaden agentes antibacteriales y antimicóticos
Medio de cultivo
93
Normalmente es el medio que los baña in vivo
Plasma
94
Son los tipos de cultivos
Cultivo Celular y Cultivo de tejidos y órganos
95
En el cultivo en suspensión, las células se suspenden en un medio libre o en perlas flotantes. En algunos casos, las células se suspenden en bloques semisólidos de matriz extracelular o agarosa. En el cultivo en placa, las células se adhieren a placas de cultivo de tejidos de plástico o vidrio. Las placas se pueden recubrir con sustancias que mejoran la adherencia y la función celular, como gelatina, colágena, polilisina, albúmina o extractos de matriz extracelular.
Cultivo Celular
96
Es una característica a tomar en cuenta en las células cultivadas en placa
Se comportan de manera diferente según las densidades
97
Son las dos formas en las cuales pueden ser cultivadas las células según su densidad
Monocapas confluentes o densidades clonales
98
Permite el crecimiento de colonias de células individuales o clonas
Cultivo celular en densidades clonales
99
Se utiliza para estudiar la diferenciación embrionaria y la morfogénesis lejos del entorno complejo del embrión.
Cultivo de Tejidos y Órganos
100
Los tejidos o fragmentos se aíslan y se cultivan como explantes, por lo general en la interface aire/medio
Método de cultivo de tejidos y órganos
101
Afinidad: Carbohidratos complejos como glucógenos y glucosaminoglucanos)
RHM (1/2)
Tinción: Reacción del PAS
102
Afinidad: Cromatina Nuclear (ADN, Proteínas vinculadas)
RHM (1/2)
Tinción: Reacción de Feulgen
103
Afinidad: Fijador, se une a los fosfípidos de la membrana y mejora el contraste
Metal pesado (1/3)
Tinción: Tetraóxido de Osmio
104
Afinidad: Polianiones; carbohidratos complejos (p. ej. oligosacáridos del glucocáliz y glucosaminoglucanos de la matriz extracelular)
Metal pesado (1/3)
Tinción: Rojo Rutenio
