Microscopie Flashcards
C’est quoi les propriétés de la lumière sur un objet?
Réflexion
Absorption
Transmission
Diffraction
Réfraction
C’est quoi la résolution?
Capacité d’une lentille de présenter les objets clairement sans chevauchement
Courte longueur d’onde = meilleure résolution
Type de microscope optiques?
Fond clair
Fond noir
Contraste de phase
Fluorescence
Confocal
Type de microscope électroniques?
À balayage
À transmission
C’est quoi un microscope à fond clair?
Échantillon plus foncé
Spécimen frais et contrasté ou mort et colorés
Grossissement max: 1000X
C’est quoi un microscope à fond noir?
Observation de microorganismes vivants
Pas colorer
Spécimen brillant
Plus faible grossissement
C’est quoi un microscope à contraste de phase?
Observation des structures internes (non colorés)
Contraste entre structures d’épaisseurs (Brillant = faible indice de réfraction, foncé = fort indice)
C’est quoi un microscope à fluorescence?
Fluorescence: capacité à absorber la lumière UV et émettre de la lumière
Fluorochrome: substance fluorescence
Filtre d’excitation: laisse passer les rayons UV qui vont exciter le fluorochrome
Filtre d’émission: Laisse passer les rayons UV émis par le fluorochrome
C’est quoi l’immunofluorescence?
Utilisation d’anticorps associés à des fluorochromes
C’est quoi un microscope confocal?
Images tridimensionnelles
Utilisation de fluorochromes
Par couche
Image 3d ou 2d
C’est quoi la microscopie électronique?
Longue préparation
Utilisation d’électrons au lieu de la lumière
Électroaimants au lieu de lentilles
C’est quoi un microscope à transmission?
Observation des structures internes
Électrons frappent directement le spécimen et ensuite dans le détecteur
100 000X
C’est quoi un microscope à balayage?
Montre la surface du spécimen
Électrons renvoyés vers un capteur
10 000X
C’est quoi un microscope à force atomique?
Lit le relief et en construit une image
Détails moléculaires
100 000 000X
Comment on prépare un montage frais?
Technique simple
Goutte suspendue
Comment on prépare un montage fixe?
Séchage à l’air
Fixation à chaud
Coloration
À quoi sert un colorant basique?
Les ions positifs se collent sur les bactérie à cause de leurs charges négatives
Exemples:
Bleu de méthylène (coloration simple)
Violet cristallisé (coloration de gram)
Safranine (coloration de gram)
Vert de malachite (endospore)
C’est quoi les trois types de colorations?
Simple: Un colorant basique
Différentiel: Plusieurs colorants
Négatif: Fond de la lame
C’est quoi la coloration de Gram?
Coloration différentiel
1- Application du violet cristal
2- Traitement à l’iode
3- Lavage avec un mélange (décoloration)
4- Application de la safranine (Gram négative)
C’est quoi la coloration acido-alcoolo résistante?
Coloration différentielle
Acide mycosique ne laisse pas passer la coloration de Gram
1- Chauffé et rinçage à l’eau
2- Décoloration acide-alcool et rinçage à l’eau
3- Bleu de méthylène qui reste sur la couche d’acide mycolique
C’est quoi la coloration des endospores?
Difficulté pour les colorants de passer la paroi spirale
Coloration de Schseffer-Fulton
1- Frottis fixé
2- Vert de malachite (chauffage et évaporation)
3- Lavage à l’eau
4- Contre-coloration à la safranine
5- Dernier lavage à l’eau
C’est quoi la coloration négative des capsules?
Coloration simple (safranine)
Colore le fond de la lame
C’est quoi la coloration des flagelles?
Procédé complexe
Utilisation de mordant pour rendre les flagelles plus épais puis d’un colorant basique
C’est quoi les colorants acides?
Coloration des structures positives et du fond de la lame
