microscopia y tincion Flashcards
ortocromasia
capacidad de un tejido teñirse del color del colorante
metacromasia
capacidad de un tejido de hacer viraje de color azul al rojo.
en forma monomerica es azul, básico y catiónico y cuando se polimerizan pasa a ser rojo, ácido y aniónico.
colorantes metacromáticos:
- azul de metileno
- azul de toluidina
- mucicarmim de meyer
Tejidos metacromaticos:
- cartílago
- célula caliciforme
- mastocito
- basófilo de sangre
Que es un fijador y para que se utiliza?
son sustancias, que puede ser química o física que tiene el objetivo de conservar la muestra de manera que evite la autolisis.
como fijador físico, se usa la tecnica de congelación por medio de nitrógeno líquido.
mientras que como fijador físico, se utiliza formol 4% (o 4º), porque es universal y es considerado un buen fijador. es bueno tener en cuenta que el formol solo conserva la estructura y no la ultraestructura.
que condiciones deben cumplir para considerarse buen fijadores?
- mata rápido, o sea, evita lá autolisis
- alto poder de penetración
- facilita la coloración
- evita artefactos
- evita secreciones post morte
- ser económico
cual técnica más utilizada para adn, justificar
Es el método de Feulgen, que tiñe (reconoce) la desoxirribosa.
Este método es considerando una variante del método PAS, pero no es el mismo método.
eso porque este método es hecho con Reactivo de Schiff + HCl-
El color es MAGENTA
aumento total
ocular (10x) x objetivo
objetivo:
de campo (4x)
seco débil (10x)
seco fuerte (40x)
inmersión (100x)
Límite de Resolución, conviene aumentarlo o disminuirlo?
Límite de resolución es la mínima distancia entre dos puntos para poder diferenciarlos.
Conviene disminuirlo/reducirlo
O sea, cuánto menor sea el límite de resolución de un microscopio, este nos dará mejores datos sobre la estructura del objeto que queremos observar.
imagen que va a salir del microscopio
mayor/invertida y virtual
límite de resolución del ojo, del microscopio óptico y del electrónico
ojo: 0,2 milimetros (mm)
M.O: 0,2 micrómetros (um)
M. E: 3 a 10 amstrong (A)
Poder de Resolución
Es la capacidad de ver con nitidez. O sea, capacidad que posee el objetivo de dar los detalles más finos del objeto de estudio.
Es la inversa al límite de resolución.
Por qué el microscopio electrónico tiene mayor poder resolutivo que el microscopio óptico?
porque los electrones tiene la longitud de onda muy baja que aumenta muchísimo el poder resolutivo, o sea
porque el M. Electrónico tiene una longitud de onda mucho menor que la luz
cuales mecanismos se usa para aumentar el poder resolutivo en M. Óptica
Al aumentar la apertura numérica (cantidad de rayos luminosos que capta el objetivo), aumenta el poder resolutivo.
Al disminuir la longitud de onda de la luz, aumenta el poder resolutivo.
que es y para que sirve la hematoxilina? que pasos son necesario para su aplicación?
Es un colorante de rutina, que se usa primero.
A primórdio tiene un color rojo, pero necesita ser activado para utilizarlo. La activación se da por medio de un mordiente, que es el alumbre de potásico, que hace el viraje del rojo para el color azul.
Cuando hace este viraje, pasa a comportarse como un colorante básico, o sea, catiónico. Así, va a tinir estructuras ácidas (anionicos). Estas estructuras, por tener afinidad con colorantes básicos, son llamadas de basofilas.
Estructuras estás como:
ácidos nucleicos (núcleo) (ADN, ARN)
RER
ribosomas
Pasos previos a su utilización van a ser:
1. Obtención de la Muestra
2. Fijación
3. Inclusión
4. Montaje:
- Corte
- Montaje
- Coloración (en la coloración hye, se usa primero la hematoxilina)
Por que los glúcidos tienen tincion negativa? como se tiñen los hidratos de carbono? que técnica se utiliza y cual su importancia?
Porque no poseen carga neta, o sea, no son ni ácidos ni básicos.
Para tiñirlos hay que usar una técnica alternativa, o sea, un método histo químico. Así que se utiliza el método de PAS.
Este método se basa en que el Ácido Peryodico primero oxida grupos hidroxilos libres de dos átomos de carbono vecinos transformándose en grupo aldeídos. estos grupos reacciónan con el reactivo de schiff dando el color magenta.
los glúcidos están en:
- golgi
- inclusiones glucógenas
- grânulos de mucigeno(gags)
- m. basales (epitélios)
- glucocalix
- glucoproteina
como se tiñen lípidos. explicar fundamentos de esta técnica
primero hay que hacer el método de congelación para conservar los lípidos y para teñirlos se usa colorantes Sudán, que son casi insolubles en agua, el principal es el Sudan Black (tiñe vainas mielinicas)
