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Biologia Celular > Microscopia > Flashcards

Microscopia Flashcards

1
Q

Robert Hooke

A

1635- 1703

Componentes básicos
1665- observó la célula

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2
Q

Luz visible

A

490 - 780

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3
Q

Refracción

A

Cambio de dirección de la luz a un medio de distinta densidad

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4
Q

Imagen real

A

Amiplifica
Invierte
Captura en una pantalla

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5
Q

Imagen virtual

A

Se amplifica
No se invierte
No se captura en pantalla

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6
Q

Lentes del microscopio óptico

A
  1. Condensador
  2. Objetivo - imagen real
  3. Ocular- imagen virtual
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7
Q

Máxima capacidad de amplificación ( aumentos) de un objeto

A

2,500 X

Nota: una lupa o lente objetivo tiene 4X

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8
Q

Campo claro

A
  • características estructurales
  • fondo : blanco
  • muestras teñidas
  • poco aumento
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9
Q

Preparación muestras en campo claro

A
  1. Cortes de 4 micras (1 mm = 1000 micras)
  2. Sacar H2O de la muestra sólida
  3. Reemplazar por cera
  4. Enfriamiento
  5. Rebanadas en porta objetos
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10
Q

Campo oscuro

A
  • Fondo: negro
  • Poco aumento
  • escaso contraste
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11
Q

¿En que se basan los “principios de la microscopia”?

A

Radiación electromagnética
Partículas y ondas
Luz= fotones

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11
Q

Campo claro - USOS

A

Muestras teñidas o de alto contraste

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12
Q

Campo oscuro USOS

A

Bacterias
Protozoarios
Tejidos sin teñir
Cultivos celulares

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13
Q

Contraste de fase

A
  • anillos de fase
  • luz atraviesa un cuerpo y la luz se hace lenta sobre la muestra
  • imágenes con un halo luminoso

Ej: conteo de espermatozoides
15-40 millones/ml
Mediana 250 millones / eyaculacion

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14
Q

Contraste de fases USOS

A

Escaso contraste - casi transparentes
Células vivas
Tiempo real

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15
Q

Normansky

A
  • primas de wollas
  • polarización de la luz
  • relieve/ repujado de células
  • estructuras / superficie
16
Q

Normansky/ diferencial de interferencia USOS

A

Sin teñir
Gruesas
Apariencia seudo relieve

17
Q

Microscopía estereoscópica

A

La luz se emite por arriba y se refleja.
No atraviesa la muestra.
Cuerpos GRANDES y OPACOS

3D
Colores
No se invierte - cx

18
Q

Epifluorescencia USOS

A

Estructuras específicas mediante reacciones antígeno- anticuerpo

IHC

19
Q

Microscopia electrónica - INTRO

A

Max Knoll , Ernst Ruska

1931 Alemania

20
Q

M. Electrónica CARACTERÍSTICAS

A
  1. Transmisión: campos magnéticos, emisión electrones.
    Los ē se desvían por imanes
  2. Condensador: placa fotográfica de zinc.
    Se ve Si los ē pasaron por la muestra.
  3. óptica (fotones) y electrónico (ē)
  4. Blanco y negro
  5. Máxima magnificación: 500,000 X
21
Q

M. Electrónica USOS

A

Virus
DNA
Membranas
Aminoácidos

22
Q

M. Electrónica TIPOS

A
  1. Transmisión

2. Barrido

23
Q

Transmisión (electrónica) PREPARACIÓN DE MUESTRA

A
  1. Muestra tejido
  2. 1er contraste: osmio, glutaraldehido
    Se pega el metal a las células
  3. Colocar en molde
  4. Rellenar con epon (polímero)
  5. Calentar a 60 C/ 8 hrs = sólido
  6. Cortar 0.5 micras (ultra microtomo)
  7. Rejilla de cobre
  8. 2da tinsion- Uranilo y plomo
  9. Los ē rebotan donde no hay metal y siguen trayecto hasta la placa, formando una imagen 2D
24
Q

Barrido (electrónica) PREPARACIÓN DE MUESTRA

A

Electrones

  1. Muestra se coloca en metal y vaporizador (anillo de oro)
  2. Se baña la muestra en oro
  3. Rayo ē barre/ escanea muestra
  4. Rayos rebotan sobre el oro y son captados por el sentillador
  5. Se crea imagen
25
Q

Barrido CARACTERÍSTICAS

A

Blanco y negro
2D
Cosas grandes o pequeñas

26
Q

Epifluorescencia (m. Estereoscópico)

A

La luz viene de arriba
Lámpara de mercurio –> luz UV
Muestras preparadas con anticuerpos

Lámpara emite luz UV específicamente al anticuerpo.

2D

27
Q

Fluoresecencia EJEMPLOS

A
  1. Anticuerpos- reconocen antígeno por su glucoproteina.
    Linfocitos B de
  2. Cariotipo: representación gráfica de cromosomas en una célula
28
Q

Confocal (m. estereoscópica)

A

2D ó 3D

Enfoca el láser y toma fotos
Junta imágenes
Crea imagen 3D

29
Q

Fraccionamiento celular DEFINICIÓN- OBJETIVO

A

Conjunto de técnicas y métodos.

Objetivo: separar organelos que componen una célula.

30
Q

Etapas fracción celular

A
  1. Rompimiento de células

2. Separación fracción deseada

32
Q

Desarrollo centrifugal

A

1940

33
Q

Citología/ citoquimica

A

Estudio estructural de la célula

  1. Desarrollo
  2. Forma
  3. Dimensiones
  4. Constitucion física
34
Q

Citología TÉCNICA

A
  1. Raspado de células
  2. Esparcimiento en laminilla
  3. Tinsion

Ej: papanicolau
Raspado mucosa nasal
no se quita tejido

35
Q

Citología CÉLULAS

A
  1. Anuclear: parte ketarinisada (protección patogenos)
  2. Superficial
  3. Intermdiate
  4. Parabasal
36
Q

Histologia

A

Comportamiento células en su conjunto.

37
Q

Tinsiones

A
  1. Hematoxilina: básico y tiñe ácidos. Ej: núcleo

El núcleo es ácido por el RNA/ DNA (ácidos nucleicos) - demasiados fosfatos

  1. Eosina: ácido y tiñe básicos. Ej: citoplasma
38
Q

IHC - Inmunohistoquimica

A

Utilización anticuerpos que se unen específicamente a un blanco.

39
Q

Centrifugacion diferencial

A

Distintas densidades de componentes celulares

Biologia Celular (6 decks)

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